浙江省科技厅项目(2011F20012)
- 作品数:1 被引量:4H指数:1
- 相关作者:尤金彪王怡婷沃恩康吴海波王巧刚更多>>
- 相关机构:浙江省医学科学院更多>>
- 发文基金:浙江省医学科学院青年基金浙江省卫生高层次创新人才培养工程项目浙江省公益性技术应用研究计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 双重实时荧光PCR对流感病毒检测及分型方法的研究被引量:4
- 2013年
- 目的:建立双重实时荧光PCR方法用于流感病毒检测,实现对新甲型H1N1流感病毒,H1和H3亚型季节性流感病毒,H5和H9亚型禽流感病毒的亚型区分。方法:根据GenBank公布的基因序列,针对M基因保守区设计引物和探针,用于流感病毒检测和定量;针对HA基因设计引物和探针,用于病毒分型。建立和优化双重实时荧光PCR反应体系,进行敏感度和特异性评价,同时对32份已知亚型的流感病毒样本进行检测,验证所建方法的实用性。结果:基于M基因的实时荧光PCR方法定量范围为5×101到5×108个目的拷贝。经优化的双重实时荧光PCR方法对不同亚型流感病毒的检测灵敏度在50~500拷贝之间,各亚型之间没有交叉反应。建立的方法能够检测出本研究涉及的所有流感病毒标本,分型准确率达到96.9%。结论:建立的双重实时荧光PCR方法具有敏感度高,特异性好等优点,实现对流感病毒样本准确分型,适用于流感的鉴别诊断及病毒载量测定。
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- 关键词:流感病毒