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上海市青年科技启明星计划(04qmhl414)

作品数：2 被引量：4H指数：1
相关作者：贺华孙青芳沈建康卞留贯卢亦成更多>>
相关机构：第二军医大学上海交通大学医学院附属瑞金医院台州市中心医院更多>>
发文基金：上海市青年科技启明星计划上海市自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 2篇医药卫生

主题

  • 2篇真核
  • 2篇真核表达
  • 2篇真核表达载体
  • 2篇基因
  • 2篇核表达
  • 1篇蛋白
  • 1篇点突变
  • 1篇定点突变
  • 1篇抑癌
  • 1篇抑癌基因
  • 1篇荧光
  • 1篇荧光蛋白
  • 1篇增强型绿色
  • 1篇增强型绿色荧...
  • 1篇神经纤维
  • 1篇神经纤维瘤
  • 1篇生物学
  • 1篇生物学功能
  • 1篇生物学功能研...
  • 1篇突变

机构

  • 1篇第二军医大学
  • 1篇上海交通大学
  • 1篇上海交通大学...
  • 1篇台州市中心医...

作者

  • 2篇卞留贯
  • 2篇沈建康
  • 2篇孙青芳
  • 2篇贺华
  • 1篇赵建祥
  • 1篇贺子建
  • 1篇薛跃华
  • 1篇林亦海
  • 1篇赵卫国
  • 1篇卢亦成

传媒

  • 1篇浙江医学
  • 1篇中华神经医学...

年份

  • 1篇2010
  • 1篇2009
共 2 条 记 录，以下是 1-2
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排序方式：
NF2基因突变体真核表达载体的构建和表达被引量：1
2010年
目的构建NF2突变体真核表达载体，并观察其在人胚肾细胞HEK293中的表达。方法采用分子生物学方法构建NF2突变体，将突变体克隆入真核表达载体pEGFP—N1中，进行筛选和鉴定，然后在脂质体介导下，将重组载体转染至真核细胞HEK293中，应用Western blot法检测蛋白的表达。结果通过使用重叠延伸PCR法定位突变，从野生型NF2基因cDNA模板中扩增得到预期大小的NF2突变体条带，DNA测序证实NF2突变体序列的正确性。重组载体转染HEK293后能产生merlin蛋白。结论本研究成功构建重组载体pEGFP—N1-NF2突变体，其转染HEK293后，能有效表达于HEK293中。
林亦海卞留贯薛跃华孙青芳贺子建贺华赵卫国沈建康
关键词：基因增强型绿色荧光蛋白真核表达
Ⅱ型神经纤维瘤基因突变型的构建及生物学功能研究被引量：3
2009年
目的构建Ⅱ型神经纤维瘤（NF2）抑癌基因546位点突变的真核表达载体，并在大鼠神经鞘瘤细胞（RT4）中诱导表达。方法用定点突变法将pEGFP—Nl—NF2第546位异亮氨酸（Ile）突变为蛋氨酸（Met）从而构建NF2突变子pEGFP—NI—NF2^△Ile546Met，经酶切和测序鉴定后用脂质体法将其转染至RT4细胞，同时设pEGFP—N1-NF2转染组做为对照，Western blot法检测细胞pEGFP—NF2蛋白的表达，MTT法检测转染后细胞的增殖情况。结果酶切测序证实定点突变成功，Westem blot结果显示RT4细胞能表达pEGFP—NF2蛋白，pEGFP-Nl-NF2△Ile546Met转染组RT4细胞抑制率低于pEGFP—N1-NF2转染组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论成功构建了1个能够在RT4细胞中表达的单个点突变的NF2基因真核表达载体。
贺华赵建祥卢亦成孙青芳卞留贯沈建康
关键词：定点突变真核表达载体抑癌基因
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