重庆市卫生局医学科研项目(2012-1-028)
- 作品数:2 被引量:6H指数:2
- 相关作者:吴小候杨林张尧陈雄罗春丽更多>>
- 相关机构:重庆医科大学附属第一医院重庆医科大学更多>>
- 发文基金:重庆市卫生局医学科研项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 肾癌ACHN细胞exosome对自身细胞增殖和凋亡的影响被引量:4
- 2012年
- 目的探讨肾癌ACHN细胞来源的exosome对肾癌ACHN细胞自身增殖和凋亡的影响及机制。方法用超滤和蔗糖重水密度梯度超速离心法分离纯化肾癌ACHN细胞分泌的exosome;采用CCK-8法评价exosome对肾癌ACHN细胞增殖的影响;Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞术检测细胞凋亡的变化;RT-PCR和Western blotting检测CyclinD1、caspase-3 mRNA和蛋白的表达;Western blotting检测p-Akt、p-ERK1/2的变化。结果成功使用超滤和蔗糖重水密度梯度超速离心法分离纯化肾癌ACHN细胞分泌的exosome。exosome可促进肾癌ACHN细胞增殖,抑制其凋亡;在此过程中,CyclinD1 mRNA和蛋白的表达均上调,而caspase-3 mRNA表达无明显变化,caspase-3蛋白表达下调;同时p-Akt和p-ERK1/2的表达也上调。结论 exosome可促进肾癌ACHN细胞生长和增殖,抑制细胞凋亡。筛除肾癌微环境中的exosome或抑制其功能,可能成为肾癌治疗的有效新方法。
- 杨林吴小候罗春丽何云锋张尧陈雄张龙陈力学
- 关键词:EXOSOME肾癌增殖凋亡
- 肾癌细胞来源的exosomes诱导JurkatT细胞凋亡被引量:2
- 2013年
- 目的体外研究肾癌786-0细胞来源的exosomes介导肿瘤免疫逃逸的机制。方法采用CCK-8法检测肾癌786-0细胞来源的exosomes对Jurkat T细胞生长的影响,瑞氏-姬姆萨染色检测Jurkat T细胞形态变化,Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞术检测Jurkat T细胞凋亡率,ELISA法检测Jurkat T细胞分泌功能,可溶性Fas阻断实验检测exosomes对Jurkat T细胞凋亡率的影响,Western blot检测exosomes中FasL、及Jurkat T细胞caspase、Bax及Bcl-2蛋白的表达。结果肾癌786-0细胞来源的exosomes可抑制Jurkat T细胞生长,10μg/mL exosomes作用于Jurkat T细胞24 h,生长抑制率为(19.64±0.92)%,72 h为(36.24±1.12)%;400μg/mL exosomes作用24 h,生长抑制率为(55.96±1.35)%,72 h为(76.51±1.37)%。Exosomes诱导Jurkat T细胞凋亡,10μg/mL exosomes作用于Jurkat T细胞8 h,凋亡率为(7.31±1.32)%,24 h为(20.19±1.47)%;400μg/mL exosomes作用8 h,凋亡率为(27.28±1.29)%,24 h为(41.72±0.88)%。Exosomes还明显抑制Jurkat T细胞IL-2、IFN-γ、IL-6、IL-10的分泌水平;exosomes高表达FasL,可溶性Fas阻断实验能逆转Jurkat T细胞的凋亡;凋亡诱导过程中caspase-3、caspase-8、caspase-9被激活,Bax/Bcl-2上调。结论肾癌786-0细胞分泌的exosomes能诱导Jurkat T细胞凋亡,介导肿瘤免疫逃逸。
- 杨林吴小候罗春丽王丹陈力学
- 关键词:肾癌EXOSOMES免疫逃逸凋亡