国家自然科学基金(39730200)
- 作品数：37 被引量：223H指数：9
- 相关作者：姚开泰何志巍谢鹭李虹许亮国更多>>
- 相关机构：湖南医科大学中南大学中山大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金美国中华医学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 稳定表达鼻咽癌来源潜伏膜蛋白1基因的鼻咽癌细胞系的建立被引量：3
- 2001年
- 目的 :建立稳定表达鼻咽癌 (NPC)来源潜伏膜蛋白 1(LMP1)的鼻咽癌细胞系。方法 :利用基因重组技术构建NPC来源LMP1的一般性真核表达载体及上皮特异性表达载体 ,并将其转染鼻咽癌细胞系CNE - 2 ,用PCR、RT -PCR及蛋白印迹等检测N -LMP1在CNE - 2中的整合和表达。结果 :①成功构建了N -LMP1的一般性和上皮特异性表达载体。②N -LMP1基因在CNE - 2细胞中获得了正确表达。结论 :成功建立了稳定表达NPC来源LMP1的鼻咽癌细胞系 ,为进一步研究LMP1在鼻咽癌细胞中的作用机制奠定基础。
- 蓝轲甘润良任彩萍何志巍谢鹭姚开泰
- 关键词：爱泼斯坦-巴尔病毒鼻咽肿瘤
- 用芯片技术分析鼻咽癌周围的基质细胞基因表达特点被引量：6
- 2003年
- 背景与目的:鼻咽的基质细胞是如何参与鼻咽癌的癌变过程一直是研究的热点,本研究利用芯片技术分析鼻咽癌周围的基质细胞基因表达特点,探讨基质细胞在鼻咽癌发生和发展中的可能机制。方法:采用atlashumanselecttumorarray滤膜,通过比较鼻咽癌组织和鼻咽癌细胞系的基因表达谱,获得鼻咽癌周围的基质细胞基因表达特点。结果:鼻咽癌周围的基质细胞至少可以特异地表达40个基因显示。结论:鼻咽癌周围的基质细胞具有基因的特异表达。
- 李虹韩为农冯湘玲周文姚开泰
- 关键词：鼻咽肿瘤基质细胞基因表达
- 用肿瘤cDNA阵列分析鼻咽癌组织的基因表达被引量：11
- 2000年
- 采用人类肿瘤cDNA阵列建立鼻咽癌基因表达谱,从生长(细胞周期)和死亡(凋亡)调节通路考察鼻咽癌相关的分子改变。发现鼻咽癌的发生可能是生长因子持续存在的情况下凋亡受抑制的后果。提供了将cDNA阵列用于肿瘤病因研究的新思路。
- 谢鹭许亮国何志巍周文王磊张玲李赞姚开泰
- 关键词：基因表达肿瘤CDNA阵列鼻咽癌组织病因
- 一种简单、快速、高效的基因定点突变方法被引量：5
- 2000年
- 小规模抽提含有编码小鼠补体Ⅱ型受体(mCR2)cDNA的质粒,体外合成两对寡核苷酸突变引物,利用PCR反应将突变引入mCR2cDNA中,即产生P15S和T68Y两种定点突变。然后用DpnI对消化PCR产物以去除模板DNA,取适量消化产物转化大肠杆菌XL1-Blue,随机挑选克隆进行测序筛选、鉴定所需突变株。结果表明这一新方法不仅操作简单、快速,而且突变率极高,几乎100％。
- 任彩萍刘卫东何志巍姚开泰
- 关键词：鼻咽癌EBV基因定点突变
- 小鼠补体受体Ⅱ型基因改造后感染EB病毒
- 2001年
- 通过对小鼠补体受体Ⅱ型基因 (CR2 )进行定点突变 ,然后将野生型和突变型小鼠CR2 / 1(MCR2 / 1)及人CR2 (hCR2 )用电穿孔方法导入小鼠SP2 / 0进行表达 ,采用免疫组织化学等方法鉴定阳性细胞系。用EB病毒对转染阳性细胞进行感染 ,EBER 1杂交结果显示 ,仅转染hCR2和突变型MCR2 (mtMCR2 )的SP2 / 0细胞感染了EB病毒 ,前者感染EB病毒的阳性率较后者高很多。这为进一步研究EB病毒进入细胞的机制及建立EB病毒相关的鼻咽癌动物模型奠定了良好的基础。
- 任彩萍蓝轲刘卫东何志巍王慧姚开泰
- 关键词：EPSTEIN-BARR病毒基因突变鼻咽癌原位杂交小鼠
- 用cDNA表达阵谱比较鼻咽癌与正常鼻咽组织的基因表达谱差异被引量：18
- 1998年
- Atlas^（TM）cDNA Expression array Ⅰ是Clontech公司1997年4月推出的第1张商品化大规模核酸阵谱,包括588个严格选择的处于严密转录调控、在不同生物过程中起关键作用的人类基因cDNA序列,分6个功能区（A,B,C,D,E,F）点阵于1张尼龙膜上。我们用其做了人胚鼻咽、成人鼻咽和鼻咽癌组织的基因表达谱,比较其差异。材料包括胚胎鼻咽2例,成人慢性鼻咽炎活检组织11例及鼻咽癌活检组织17例。提取总RNA,纯化Poly A+RNA,合成放射性标记cDNA探针,与阵谱杂交及放射自显影。结果见图1与表1。
- 黎众魁谢鹭何志巍姚开泰
- 关键词：鼻咽癌鼻咽组织基因表达谱
- 鼻咽癌病理学研究被引量：11
- 2003年
- 宗永生
- 关键词：鼻咽癌病理特点肿瘤分化病理诊断
- 鼻咽癌中生长因子细胞因子mRNA差异表达分析被引量：7
- 2000年
- 目的 :考察鼻咽癌中差异表达的生长因子 细胞因子 ,推测鼻咽癌发生中可能存在的免疫机制。方法 :采用cDNA阵列杂交技术 ,同时对 98个己知与肿瘤相关的生长因子 细胞因子在鼻咽癌、正常鼻咽组织及其他几种头颈部鳞癌中的mRNA表达水平进行筛查 ,筛选出在鼻咽癌中差异表达的生长因子 细胞因子基因。结果 :在鼻咽癌中上调的基因包括 :早期生长应答蛋白 1,肝癌来源生长因子 ,白介素 1β ,血小板来源生长因子A链 ,干细胞因子 ,畸胎瘤来源生长因子 ,干扰素诱导肽、蛋白 ,干扰素调节因子及干扰素受体等 ;在鼻咽癌中下调的基因有 :TGF β 2等。 结论 :鼻咽癌细胞可能自分泌或促进分泌大量生长因子 ,鼻咽癌侵润淋巴细胞分泌的细胞因子主要为Th1细胞型。
- 谢鹭许亮国蓝轲何志巍李官成姚开泰
- 关键词：鼻咽癌细胞因子CDNA阵列MRNA
- 鼻咽癌及癌旁组织的超微结构形态定量被引量：2
- 2001年
- 目的 探讨鼻咽癌病理学发生发展进程中的形态学特点与规律 .方法 应用体视学技术 ,在超微结构水平 ,对人鼻咽部正常假复层纤毛柱状上皮、鼻咽癌旁异型增生 /化生上皮和鼻咽癌 3种上皮细胞核的形态改变进行了定量测试 .用于定量分析的体视学参数包括 Vvn,Svn,Nvn,Vve,vn,sn共6个参数 .结果 6个参数按正常鼻咽上皮→癌旁上皮→癌的顺序逐渐增大 ,且差异具有显著性 .结论 提示鼻咽癌病理发展存在一个由正常上皮→异型增生 /化生→癌的逐步渐进的过程 ,异型增生
- 杨兴龙申洪宗永生
- 关键词：鼻咽癌超微结构
- 提高EB病毒血清学在诊断鼻咽癌中的效益被引量：28
- 2002年
- 目的 探讨同时应用VCA IgA、EA IgA和EA IgG三项检测在血清学诊断鼻咽癌中的效益。方法 收集 2 6 6例未经治疗的鼻咽癌患者和 347例健康成人的血清。用免疫酶法检测VCA IgA ,用酶联免疫吸附法 (ELISA)替代免疫酶法检测EA IgA和EA IgG抗体。应用新的统计学方法来评估这三项检测的不同优势比。结果 同时应用VCA IgA、EA IgG和EA IgA三项检测的灵敏度和特异度分别为 95 .11%和 97.4 1% ,高于这三项检测的单独应用 (VCA IgA为 90 .6 0 %和 94 .5 2 % ,EA IgG为93.98%和 93.6 6 ,EA IgA为 89.84 %和 88.18% )。再者 ,VCA IgA、EA IgG和EA IgA三项检测均呈阳性者的优势比 (1912 .5 )远远高于其中两项检测呈阳性者 (VCA IgA和EA IgG为 2 7.90 32 ;EA IgG和EA IgA为 11.16 90 ;VCA IgA和EA IgA为 8.0 32 8) ,而两项检测阳性的优势比又高于单个检测阳性者(VCA IgA为 0 .12 14 ;EA IgG为 0 .170 5 ;EA IgA为 0 .0 4 88)。结论 ELISA法较免疫酶法更能确切反映血清中EB病毒早期抗原的抗体水平。VCA IgA、EA IgG和EA IgA的联合应用能显著提高灵敏度和特异度 ,明显增高检测阳性的优势比 ,因此 ,能有效地提高EB病毒血清学在诊断鼻咽癌时的效益。
- 张昌卿宗永生黄宝珍孙韵叶永照冯凯涛李经略张锋
- 关键词：鼻咽肿瘤EPSTEIN-BARR病毒血清学酶联免疫吸附测定
