山西高校科技研究开发项目(200138)
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 相关作者：史天良赵英芳赵素莲更多>>
- 相关机构：山西省肿瘤研究所山西医科大学更多>>
- 发文基金：山西高校科技研究开发项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人源性食管鳞癌cDNA文库的构建及鉴定被引量：1
- 2007年
- 目的:构建人源性食管鳞癌cDNA噬菌体表达文库。方法:从人食管鳞癌组织中提取总RNA并分离纯化mRNA,用RT-PCR合成cDNA单链,LD-PCR扩增双链cDNA,除去<500bp的小片段,与载体λTriplEx2噬菌体左右臂连接,经体外包装即构成全长cD-NA噬菌体表达文库。转化E.coliXL1-Blue感受态细胞,测定文库的滴度,确定文库的容量大小,用蓝白筛选测定文库的重组率,PCR鉴定cDNA插入片段的大小。结果:构建的人源性食管鳞癌cDNA噬菌体表达文库滴度为1.64×106pfu/mL,重组率为98.6%,cDNA插入片段的大小为0.7～2.5kb,平均长约1.5kb。结论:成功构建1个人源性食管鳞癌cDNA噬菌体表达文库,适合于大批量筛选cDNA克隆的食管鳞癌肿瘤抗原基因。
- 赵英芳赵素莲史天良
- 关键词：DNA基因表达
