国家自然科学基金(30870350)
- 作品数:7 被引量:17H指数:3
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- 中华卵索线虫雌雄寄生后期幼虫基因差异表达分析被引量:1
- 2012年
- 索科线虫是一类具有很大生防潜力的昆虫(如棉铃虫等)天敌资源,但由于其体外培养尚未获得成功,阻碍了商业化生产和大规模应用,究其原因主要是体外培养的线虫不能完成雌雄性别分化。因此,研究该类线虫性别分化机制成为近年本领域的热点课题。该文以中华卵索线虫为实验材料,采用mRNA差异显示的方法,分析了中华卵索线虫性别分化关键时期雌、雄寄生后期幼线虫的基因表达差异。在雌雄线虫体内得到具有表达差异的基因片段20条。其中8条在雄虫体内特异性表达,12条在雌虫体内特异性表达。利用信息生物学技术对所分离到的差异片段进行了序列分析。其中,Ensembl分析发现4个片段与秀丽线虫X染色体具有可匹配片段,推测这些片段可能是影响中华卵索线虫性别分化的重要基因。这些结果将为后续研究提供思路。
- 吴运梅张丽红王国秀
- 关键词:性别分化MRNA差异显示
- 中华卵索线虫核型分析
- 2013年
- 昆虫病原索科线虫的性别是由其宿主体内血淋巴营养状况决定的,本研究从细胞遗传学水平探讨了这一特殊性别决定机制。以中华卵索线虫(Ovomermis sinensis)成虫期生殖腺为试验材料,采用秋水仙素处理和Giemsa染色法,对其进行染色体核型分析。结果显示,其单倍体数目n=6,二倍体数目2n=12,核型为2n=2x=3 m+3 sm,臂比值的变化范围为1.18~2.10,雌、雄线虫染色体数目一致,均未发现异形性染色体和随体。
- 刘建拓张丽红王国秀
- 关键词:中华卵索线虫核型分析性别决定
- 中华卵索线虫cDNA文库的构建
- 2014年
- 中华卵索线虫(Ovomermis sinensis)是一种宝贵的昆虫天敌,宿主广泛,其寄生率即等于宿主的死亡率,生防潜力极大.鉴于cDNA文库在保存稀有物种基因资源与目的基因筛选及其功能研究等方面的优势,实验以中华卵索线虫为材料,采用SMART技术构建其cDNA文库.实验结果表明:滴度为1.16×10^9 cfu·mL^-1,包含6.0×10 ^6个克隆.从原始文库中随机挑16个单菌落过夜培养,提取质粒,经XhoⅠ和PstⅠ双酶切,琼脂糖凝胶电泳结果表明插入片段大小主要集中在0.5~2.0 kb之间,文库重组率接近100%.文库的各项指标均达要求,可用于全长cDNA的筛选,为新基因的获得及其结构功能研究提供了可靠材料,也为今后的生物防治等研究奠定了基础.
- 陈柳惠陈冲焦振龙王国秀
- 关键词:中华卵索线虫CDNA文库SMART技术
- 中华卵索线虫vasa基因的克隆及其表达模式分析被引量:5
- 2011年
- 为明确vasa基因在中华卵索线虫Ovomermis sinensis生殖系发育以及原始生殖细胞增殖过程中的作用,采用同源克隆与cDNA末端快速扩增技术(RACE),从中华卵索线虫中克隆得到vasa基因全长cDNA序列(3053bp),编码813个氨基酸,具有DEAD-box家族蛋白全部9个保守基序。经同源比对与系统进化树分析,确定其属于DEAD-box家族的VASA亚家族成员。利用反转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)以及实时荧光定量PCR(real time PCR)分析,vasamRNA在中华卵索线虫性腺中专一性表达,其它部位如头、尾、体壁均未检测到vasa表达信号,且在生殖腺发育初期表达量最高。此外,vasa基因转录本在中华卵索线虫胚胎发育期卵中表达量较高,证实其为母源性基因,调控中华卵索线虫胚胎发育的过程。
- 任爽陈冲刘绪生王国秀
- 关键词:昆虫病原线虫中华卵索线虫
- 中华卵索线虫的性别分化分子机理研究进展被引量:6
- 2011年
- 中华卵索线虫Ovomermis sinensis Chen et al.是一种宝贵的昆虫天敌资源,具有特殊的寄生期营养竞争压力决定其雌雄性别分化机制。本文重点概述了近年中华卵索线虫性别决定与分化、寄生期生理生化以及分子系统学研究等方面的进展,并对中华卵索线虫今后的研究方向提出了建议。
- 任爽王伟娜赵娜娜艾欢王国秀
- 关键词:中华卵索线虫性别分化分子系统学
- 基于SAFLP的我国常见索线虫科昆虫病原线虫亲缘关系分析被引量:7
- 2008年
- 本研究建立并优化了索线虫科(Mermithidae)SAFLP体系,构建了我国常见索线虫科昆虫病原线虫6属11种/亚种的指纹图谱。采用EcoRⅠ和MseⅠ两种限制性内切酶单酶切,结果显示EcoRⅠ酶更适合作为索线虫科线虫 SAFLP的内切酶。3个带有3个选择性碱基的EcoRⅠ引物进行扩增共得条带225个,片段大小为250 ~1 650 bp。通过NTsys-PC2.1软件计算了索线虫科6属11种/亚种的Nei-Li遗传距离(0.1980 ~0.4554)和相似系数,利用NTsys-PC2.1软件中的UPGMA方法构建其聚类图。索线虫科这6属11种/亚种从属级阶元可以分为两大类群:罗索属 Romanomermis和八腱索属Octomyomermis聚为一支构成第一大类群;六索属Hexamermis与卵索属Ovomermis先聚在一起然后与多索属Agamermis聚在一起,再与两索属Amphimermis聚在一起构成第二大类群。在八腱索属和两索属中属内不同种/亚种间线虫采集地相距较近的其遗传距离较近。优化的索线虫科线虫SAFLP体系能够反映索线虫科线虫种属间的亲缘关系,并与形态学的研究结果基本相符,可以用于属种的分类和亲缘关系的研究。
- 姜爱兰饶祥军贺俊飞王国秀
- 关键词:昆虫病原线虫亲缘关系
- 中华卵索线虫寄生对棉铃虫保幼激素和蜕皮激素的影响被引量:1
- 2012年
- 中华卵索线虫Ovomermis sinensis Chen广泛寄生于粮、棉、油等多种作物害虫体内,生防潜力极大,但其体外培养尚未获得成功^[1],阻碍了该线虫生物杀虫剂的开发与应用,因此,对线虫寄生期生长机制的研究具有重要意义。目前,对中华卵索线虫寄生后宿主血淋巴的相关研究主要集中在营养成分、
- 焦振龙陈柳惠王国秀
- 关键词:中华卵索线虫棉铃虫蜕皮激素保幼激素寄生作物害虫