国家自然科学基金(30771802) 作品数:3 被引量:14 H指数:3 相关作者: 余焕玲 肖荣 麻微微 李丽 向丽 更多>> 相关机构: 首都医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 北京市教育委员会科技发展计划 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
β淀粉样肽31—35和25—35对培养大鼠皮质神经元的毒性作用 被引量:8 2009年 目的比较β淀粉样肽(Aβ)25—35和31—35对培养大鼠皮质神经元的毒性作用及其途径的差异,以进一步证明A1331.35是诱发神经细胞毒作用的有效较短片段。方法将新生Wistar大鼠大脑皮质神经细胞分离、培养48h后,按照完全随机设计的方法分对照组、Aβ25—35(25μmol/L)和Aβ31-35(25μmol/L)处理组,24h后收集细胞。通过四甲基偶氮唑蓝比色法测定细胞的活性、激光扫描共聚焦显微镜检测线粒体膜电位的变化、单细胞凝胶电泳技术检测DNA损伤情况、反转录聚合酶链反应(RT—PCR)方法检测神经细胞凋亡相关基因(Bcl-2、Bax和p53)mRNA的表达。每个实验重复3次。结果与对照组[吸光度值(A值)为1.038±0.125,荧光强度差值为4.280±0.358]相比,A1325—35和Aβ31-35处理组细胞的A值(分别为0.746±0.071和0.811±0.083)和荧光强度差值(分别为3.050±0.240和2.806±0.203)均显著降低(tA值分别为4.023、5.401,t荧光强度差值值分别为9.524,7.589,P值均〈0.01);Aβ25-35和Aβ31—35处理组彗星细胞的拖尾率分别为59.0%及48.5%,尾长分别为(57.3±4.7)μm及(54.2±6.8)μm,与对照组[拖尾率为4.5%,尾长为(5.2±1.1)μm]相比均显著增加,差异有统计学意义(x^2拖尾率值分别为99.397和137.071,t尾长值分别为19.058和29.173,P值均〈0.01);Aβ25—35和Aβ31-35处理组Bax/Bcl-2分别为1.2774±0.0762和1.0330±0.0683,显著高于对照组(0.2090±0.0991)(t值分别为2.429和2.356,P值均〈0.05);p53/β-actin分别为2.0284±0.2223和1.9505±0.2725,高于对照组(1.6560±0.0853)(t值分别为2.366和2.503,P值均〈0.05)。结论Aβ31—35同Aβ25-35一样均可引起新生大鼠大脑皮质神经细胞的损伤,其作用机制可能与Aβ的直接细胞毒性及其介导的细胞凋亡作用 张晓红 余焕玲 肖荣 向丽 李丽 麻微微 张杰 褚金花关键词:大脑皮质 神经元 Β-淀粉样肽 神经毒性 染料木黄酮和叶酸对β淀粉样肽31—35诱导的细胞及线粒体膜损伤的拮抗作用 被引量:3 2010年 目的 探讨染料木黄酮(Gen)和叶酸(FA)对β淀粉样肽31-35(Aβ31-35)诱导的神经细胞膜及线粒体膜损伤的拮抗作用.方法 按照简单随机抽样的方法,将原代培养的大鼠大脑皮质神经细胞分为5组,即对照组、Aβ31-35(25μmol/L)、Gen(27μg/ml)、FA(40μg/ml)及Gen和FA(Gen 27μg/ml+FA 40μg/ml)联合干预组.各干预组预先在培养液中加入Gen和(或)FA,2 h后加入Aβ31-35,继续培养24 h后收集细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定细胞的活性、荧光偏振法检测细胞膜流动性、激光扫描共聚焦显微镜(LCM)检测线粒体膜电位和流式细胞术(FCM)检测线粒体膜通透性转运作用.每个实验至少重复3次.结果 Gen组、FA组和Gen+FA组的A570值分别为0.982±0.110、0.947±0.061和0.996±0.090,与Aβ31-35组相比差异有统计学意义(t值分别为3.523、2.745和3.966,P值均<0.01).细胞膜的黏度值与Aβ31-35组相比,Gen组(1.75±0.28,t=2.085,P<0.05)和FA(1.66±0.37,t=2.357,P<0.05)单独或联合(1.50±0.20,t=3.784,P<0.05)干预后,细胞膜的黏度值显著降低,差异有统计学意义,表示细胞膜流动性升高.线粒体膜电位结果显示,Gen、FA与Gen+FA联合干预后,线粒体膜电位(荧光强度差值依次为5.286±1.792,5.884±2.022,6.120±2.124)比Aβ31-35组(3.364±1.140,F=7.585,P<0.01;t值分别为:2.406、2.887、3.040,P值均<0.01)显著增高.流式实验结果显示,经Aβ处理神经细胞的线粒体通透性转运孔(MPTP)开放,而此现象可经Gen和FA的干预有效逆转.结论 Gen和(或)FA对Aβ31-35引起的神经细胞膜及线粒体膜损伤具有拮抗作用. 余焕玲 张晓红 肖荣 李丽 向丽 封锦芳 苑林宏 麻微微关键词:染料木黄酮 叶酸 神经细胞 Β-淀粉样肽 染料木黄酮对β淀粉样肽25-35介导的PC12细胞凋亡过程相关基因表达的影响 被引量:3 2011年 目的研究不同剂量的染料木黄酮(Gen)对β淀粉样肽25-35(Aβ25-35)介导的PC12细胞凋亡的保护作用,并探讨了可能的分子调控机制。方法PC12细胞传代培养48 h后,选取生长良好的同批次细胞,随机分为5组,即对照组、Aβ模型组(20μmol/L)、Gen干预组(25、50和100μmol/L)。Gen预处理2 h后,经Aβ25-35染毒,建立细胞损伤模型;24 h后,收集细胞,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测PC12细胞caspase-3、caspase-9、bcl-xl、bad和LRP5基因的表达。结果与对照组相比,Aβ组细胞caspase-3、caspase-9和bad mRNA表达上调,其差异具有统计学意义(P<0.05),bcl-xl、LRP5 mRNA表达下调,差异具有统计学意义(P<0.05);与Aβ组相比,Gen高剂量组可显著下调PC12细胞caspase-3、caspase-9和bad mRNA表达(P<0.05);Gen高剂量组可显著上调bcl-xl、LRP5 mRNA,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 Gen可能是通过下调细胞凋亡促进基因caspase-3、caspase-9和bad mRNA表达,上调细胞凋亡抑制基因bcl-xl、LRP5 mRNA表达,拮抗Aβ诱导的神经细胞凋亡,从而发挥神经细胞保护作用。 何玲玲 封锦芳 肖荣 余焕玲 麻微微 丁冰杰 苑林宏关键词:Β淀粉样肽 染料木黄酮 PC12细胞 基因表达 细胞凋亡 染料木黄酮对Aβ25-35介导的PC12细胞凋亡过程相关基因表达的影响 目的 :研究不同剂量的染料木黄酮(Gen)对β淀粉样肽25-35介导的PC12细胞凋亡的保护作用,并探讨了可能的分子调控机制。方法 :PC12细胞传代培养48 h后,选取生长良好的同批次细胞,随机分为5组,即对照组、Aβ... 何玲玲 封锦芳 肖荣 余焕玲 麻微微 丁冰杰 苑林宏关键词:Β淀粉样肽 染料木黄酮 PC12细胞 细胞凋亡 Combined genistein and folic acid prevent oxidative injury induced by β-amyloid peptide(31-35) in primary cultured cortical neurons and its mitochondria To explore the mechanism(s) of the neuroprotective effects of genistein(GEN) alone or combined effects with fo... Bingjie Ding~(1,a),Linhong Yuan~(1,a),Huanling Yu~a,Li LI~b,Weiwei Ma~a, Yanxia Bi~a,Jinfang Feng~a,Rong Xiao~(*,a) School of Public Health and Family Medicine,Capital Medical University,Beijing 100069 a:Department of Nutrition and Food Hygiene,Capital Medical University,Beijing,100069,PR China b:Center for Disease Control and Prevention in Chaoyang district,Beijing,100021,PR China关键词:GENISTEIN NEURONS MITOCHONDRIA NEUROPROTECTION 文献传递