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华东农村地区利福平耐药结核病的分子流行病学特征研究: 目的描述中国华东农村地区利福平耐药结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)的耐药相关分子特征和成簇性规律方法募集浙江省和江苏省两个农业县一年间结防所新登记的结核病人,收集病人痰标本、...; 王继江胡屹蒋伟利王伟炳徐飚; 文献传递

多种基因分型技术在识别结核分枝杆菌基因型的联合应用被引量：3: 2009年; 目的评价MTB散在分布重复单位（MIRUs）和IS5110限制性内切酶片段长度的多态性（IS6110-RFLP）基因分型技术，以及两者联合应用在我国华东农村地区MTB分子流行病学研究中的应用及其效果。方法以人群为基础的横断面研究设计，采用比例法确定2004-2005年从浙江省德清县和江苏省灌云县收集的351株MTB菌株的耐药性，利用间隔区寡核苷酸分型方法识别北京基因型MTB，并进行MIRUs和IS6110-RFLP独立基因分型和串联联合应用。结果先对351株MTB菌株采用MIRUs基因分型可以识别235种基因型，包括46个成簇基因型和189个惟一基因型，分辨力为0．9317；用IS6110-RFLP可进一步从成簇基因型中识别出28个亚组，分辨力为0．9989。相对而言，先对目标菌株采用IS6110一RFLP基因分型，可识别267基因型，分辨力为0．9684，包括46个成簇基因型和221个惟一基因型，再用MIRUs基因分型技术可进一步从成簇基因型中识别出31个亚型，分辨力为0．9992。两种顺序不同联合分型方法的基因分型的辨别能力相似，尤其是在耐多药MTB（分辨力分别为0．9965和0．9963）及北京基因型MTB（分辨力分别为0．9930和0．9933）的分型中。结论MIRUs分型的方法简便、快速，结果有效、可靠，在大规模的结核病分子流行病学研究中，可先采用MIRUs，再对成簇MTB菌株进行IS6110-RFLP二次分型的联合分型策略。; 胡屹蒋伟利赵琦王伟炳徐飚; 关键词：分枝杆菌结核串联重复序列基因型

中国东部农村地区结核分枝杆菌北京基因型菌株的成簇性及耐药特征研究被引量：6: 2011年; 目的探讨MTB北京基因型在人群中的分布及其耐药类型和相关分子特征。方法江苏省灌云县和浙江省德清县1年内登记确诊的结核病患者399例，分离出MTB菌株者351例，其中男237例，女l14例；年龄18－82岁，平均（46±35）岁。采用比例法确定分离株对一线抗结核药物的耐药类型，用直接基因测序识别耐药相关的基因突变，用间隔区寡核苷酸分型技术识别MTB北京基因型，以IS6110限制性内切酶片段长度的多态性（IS6110IS6110－RFLP）技术确定MTB基因型及其成簇性和惟一性。结果在分离得到的351株MTB菌株中北京基因型243株，北京基因型患者中耐多药、耐异烟肼和耐利福平分别占18．5％（45／243）、43．2％（105／243）和22．2％（54／243），明显高于非北京基因型[7．4％（8／108）、24．1％（26／108）和12．0％（13／108）]；北京基因型菌株中rpoB和katG基因的联合突变率较高，分别为13．2％（32／243）和4．6％（5／108），OR=2．553，95％∞为1．031－6．324；北京基因型菌株的成簇率[41．2％（100／243）]明显高于非北京基因型[11．1％（12／108）]，OR=5．503，95％CI为2．851～10．622。结论在我国东部农村地区，感染北京基因型菌株的结核病患者发生耐异烟肼、耐利福平和耐多药结核病的危险性较大，其发病有可能由于近期传播所致。; 马慧胡屹蒋伟利王伟炳徐飚; 关键词：分枝杆菌结核基因型

华东农村地区耐药结核病传播及其影响因素的分子流行病学研究被引量：15: 2010年; 目的对江苏和浙江省两个农业县全年登记的结核病患者中分离获得的耐药结核分枝杆菌（结核菌）进行基因分型，描述以基因型“成簇性”为定义的耐药结核病在该地近期传播及其影响因素。方法以结核菌散在分布重复单位（MIRU）和IS6110限制性内切酶片段长度多态性（IS6110-RFLP）基因分型技术识别耐药结核菌基因型的“成簇性”和“惟一性”，描述223例耐药结核病患者结核菌分离株的成簇性分布特征，识别耐药结核菌的人群间传播，分析人口学特征、社会经济水平和就医行为对耐药结核病传播的影响。结果223株耐药结核菌株中有52株具有成簇性，形成22个簇，提示簇内患者问发生了耐药结核病的近期传播；其余171株的基因型表现为“惟一性”。耐药结核菌成簇性影响因素分析显示：与18～30岁人群相比，30～60岁年龄组（30～岁／18～岁年龄组：30．9％vs11．9％；OR=3．297，95％CI：1．169～9．297）和复治耐药结核病患者（复治／初治：32．9％vs．18．4％；OR=2．163，95％CI：1．144～4．090）所感染的结核菌更容易成簇；对异烟肼和利福平同时耐药的耐多药结核菌比仅耐一种一线抗结核药物的单耐药菌株更多地表现为成簇（47．2％％15．5％；OR=4．773，95％CI：2．316～9．837），耐药结核菌株的近期传播呈现以村落为单位的小范围、散发特点。结论华东农村地区人群中存在耐药结核病的近期传播，其主要传播方式可能为村落内偶然接触；耐药结核病的控制需要重点关注中年人群和复治结核病患者。; 徐飚胡屹王伟炳蒋伟利; 关键词：耐多药结核病基因型

华东农村地区利福平耐药结核病的分子流行病学特征研究被引量：5: 2009年; 目的描述华东农村地区利福平耐药结核分枝杆菌（结核菌）的耐药相关分子特征和成簇性规律。方法以浙江省和江苏省两个农业县结核病防治所一年内所有登记的结核菌检测阳性肺结核病例为研究对象，收集痰标本、培养分离菌株，并进行问卷调查；对培养获得的结核菌株采用比例法进行药敏试验。对获得的65株利福平耐药结核菌株进行rpoB基因利福平耐药决定区和katG基因异烟肼耐药相关热点区测序，采用间隔区寡核苷酸分型（spoligotyping）方法识别北京株，采用IS6110限制性内切酶多态指纹技术（RFLP）对分离株进行基因分型和成簇性分析。结果92％（60／65）的利福平耐药菌株在利福平耐药决定区531位（57％）、526位（29％）或516位（11％）发生突变，82％（49／60）的rpoB基因突变菌株为耐多药结核菌（MDR—TB）；spoligotyping识别出54株（83％）北京家族菌株；IS6110-RFLP发现共有24株（37％）利福平耐药菌株成簇，形成11个簇，提示簇中病例的结核菌近期传播。所有成簇菌株都为MDR—TB。共有7个簇，簇内菌株具有不完全相同的利福平耐药相关的rpoB基因突变。分析可能与成簇性相关的因素，初治病例在菌株成簇患者中的比例高于在菌株非成簇患者巾所占的比例（初治／复治：OR=3．342，95％CI：1．081～10．32）。结论在其他耐药结核菌（如异烟肼耐药结核菌）中进一步产生对利福平的选择性耐药和生长，很有可能是利福平耐药结核病流行的基础，而既往较长的不规则治疗史也为利福平耐药的发生和传播提供条件。; 王继江胡屹蒋伟利王伟炳徐飚; 关键词：基因分型

我国东部农村五县耐药结核病流行及其社会学和生物学的危险因素被引量：13: 2011年; 目的了解我国东部农村五县耐药结核病的流行水平，分析影响耐药结核病流行的生物、人口和社会学危险因素。方法以我国东部山东省、江苏省和浙江省农村地区5个县（区）结核病防治所2008年至2009年登记的所有初治和复治的结核病患者为研究对象，收集痰标本、培养分离菌株，并进行问卷调查；对培养获得的结核菌株采用比例法进行一线抗结核药物（利福平、异烟肼、乙胺丁醇和链霉素）的药物敏感试验。以Mantel—Haenszel卡方检验、Fisher精确概率法、方差分析以及非条件Logistic回归方法分析资料。结果在获得的380株结核菌株中，共有105株为耐药菌株，总耐药率为27．6％。初始耐多药结核病率和获得性耐多药结核病率分别为8．4％和23．3％。对研究对象所在区县、性别进行调整后发现，患者即往治疗史（OR-一3．900，95％CI：1．737～8．704）、肺部空洞（OR-1．987，95％CI：1．001～3．942）以及年龄较大（OR一1．020，95％CI：1．010～1．045）与耐多药结核病发生有关。结论我国东部沿海地区结核病患者的耐药结核病和耐多药结核病患病率高于国际平均水平，但低于国内平均水平。既往治疗史和肺部空洞与耐多药结核病发生有关，年龄较大的结核病患者发生耐多药结核病的危险性较高。; 吴琳琳胡屹赵琦王伟炳徐飚; 关键词：耐药结核病生物学社会学耐多药结核病结核病患者

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国家自然科学基金(30771843)

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