浙江省科技攻关计划(2004C32049)
- 作品数：4 被引量：31H指数：4
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- 相关机构：浙江省农业科学院更多>>
- 发文基金：浙江省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- α-半乳糖苷酶产酶菌种的定向筛选及诱变选育被引量：6
- 2006年
- 从土壤样品分离、实验室保藏菌种及引进菌种共200多个菌株中,经纸层析定向筛选,获得20株具有显著产α-半乳糖苷酶活性特性的菌株。进一步以R15#菌株为出发菌株,经60Co诱变处理,及紫外—亚硝基胍复合诱变,得到产α-半乳糖苷酶性能稳定、活力较高的变异菌株3个,其产酶活力达231 U/g以上,平均比出发菌株提高190.9%。其中RM48#菌株经连续传代7代,产酶性能未出现较大的变异,具有较好的遗传稳定性。该菌株经鉴定为黑曲霉变种(Aspergillus nigerv.Tiegh)。
- 许尧兴许少春姚晓红李艳丽
- 关键词：Α-半乳糖苷酶
- 培养基组成及发酵条件对黑曲霉变种产α-半乳糖苷酶的影响被引量：5
- 2009年
- 为获得高产α-半乳糖苷酶,通过单因素实验,研究黑曲霉变种Aspergillus nigerv.TieghCGMCC1182在固态发酵条件下产α-半乳糖苷酶的培养基组成和发酵条件,继而采用Ln18(37)正交试验设计,对影响黑曲霉A.nigerv.Tiegh CGMCC1182产α-半乳糖苷酶的7个主要因素进行研究,对影响产酶的重要因素进一步优化.结果表明,黑曲霉变种A.nigerv.Tiegh CGMCC1182产α-半乳糖苷酶的最适培养基组成为:麸皮∶豆粕=7∶3(W/W),在此基础上添加2.0%的棉子糖、2.5%的(NH4)2SO4和0.5%的MgSO4;产酶最适发酵条件为:培养温度30℃,培养基含水率55%,培养基装量为250 mL三角瓶中装入14 g培养基,接入10%(V/W)的孢子悬浮液(孢子浓度107个?mL-1),静置培养68 h获得最高α-半乳糖苷酶产量,酶活达308.5 U?g-1.
- 许尧兴李艳丽许少春柳永姚晓红
- 关键词：Α-半乳糖苷酶培养基组成发酵条件黑曲霉固体发酵
- 两种测定程序对饲用α-半乳糖苷酶活性检测结果的比较被引量：12
- 2004年
- 根据α 半乳糖苷键物质及其结构组成,设计了两种饲用α 半乳糖苷酶活性的检测程序。结果表明,以棉子糖为底物的DNS法,因饲料中干扰因素较多,导致酶活性偏低。而以对硝基苯酚 α D 半乳糖吡喃糖苷底物的p NPG法,具有操作简便,灵敏度高,重现性好等特点。其测定条件为:反应系统pH4.0,反应温度40℃,反应时间10min,底物浓度5mmol/L。
- 许尧兴姚晓红许少春李孝辉范永仙
- 关键词：Α-半乳糖苷酶
- 黑曲霉变种RM48 α-半乳糖苷酶的分离纯化及其酶学性质研究被引量：12
- 2009年
- 经硫酸铵沉淀、疏水柱层析和分子筛层析,从黑曲霉变种RM48(Aspergillus niger v.Tiegh RM48)固体发酵后的浸提液中分离纯化了α-半乳糖苷酶.SDS-PAGE分析表明,此酶蛋白的分子量约为108kDa.酶学性质研究表明,该酶的最适反应温度是60℃,耐热温度为40℃;最适反应pH为4.5,在pH3.0～6.0之间保持90%以上的酶活性;在实验的金属离子范围内,所有金属离子对黑曲霉变种RM48α-半乳糖苷酶均有抑制作用,其中Cu2+和Fe2+抑制作用最为显著,Li2+、Zn2+、Mn2+、K+、Na+、Ca2+、Mg2+和Co2+对酶活性有轻微的抑制作用.在pH4.0和60℃反应条件下此酶的Km为7.37mmol·L-1,Vmax为5618IU·mg-1·min-1.成熟酶蛋白N端序列为DEKAYSPCYY,与已报道的α-半乳糖苷酶蛋白无同源性.
- 许尧兴李艳丽柳永许少春姚晓红
- 关键词：Α-半乳糖苷酶分离纯化酶学性质
