国家重点基础研究发展计划(2003CB515306) 作品数:23 被引量:97 H指数:5 相关作者: 丁斐 姜保国 张培训 周松林 张琦 更多>> 相关机构: 南通大学 北京大学 苏州大学 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 国家自然科学基金 南通市工业科技创新计划资助项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
神经再生素促大鼠背根神经节神经突起生长显微图像的分形特征 2006年 目的:研究分维数与神经再生素(nerve regeneration factor,NRF)剂量促离体培养新生大鼠背根神经节(dorsal root ganglions,DRGs)神经突起生长之间的关系。方法:采用计盒维数方法,计算在不同浓度NRF条件下大鼠DRGs荧光显微图像的分维数。结果:离体培养大鼠DRGs显微图像的分维数随神经突起数量和长度的变化呈现一致的变化规律。结论:分维数可以作为一个重要定量指标表征大鼠DRGs神经元生长与NRF浓度的依赖关系。 汤乐民 汤敏 张琦 汤欣 丁斐关键词:神经再生素 背根神经节 分维数 神经生长颗粒含药血清对大鼠背根神经节生长的影响 被引量:3 2009年 目的:研究神经生长颗粒(NGG)含药血清对体外培养新生大鼠背根神经节生长及高分子量神经丝蛋白(NF-H)和生长相关蛋白43(GAP43)表达的影响。方法:采用体外大鼠背根神经节(DRG)植块培养,通过免疫荧光细胞化学法,观察不同剂量的含药血清对DRG神经突起生长的影响;采用DRG单细胞分离培养,通过实时荧光定量PCR和免疫印迹法分别观察不同剂量的含药血清对DRG细胞NF-H和GAP43基因及蛋白表达的影响。结果:免疫荧光细胞化学法提示NGG含药血清能促进DRG神经突起的生长;实时荧光定量PCR和免疫印迹法结果提示NGG含药血清能增加体外培养的DRG细胞NF-H、GAP43mRNA和蛋白的表达。结论:NGG含药血清能促进体外培养DRG神经突起的生长并促进NF-H和GAP43的表达,表明NGG对发育期感觉神经元具有一定的神经营养作用。 龚炎培 张琦 陈褚 丁斐关键词:背根神经节 生长相关蛋白43 牛膝提取物神经再生素促小鼠坐骨神经再生的实验研究 被引量:23 2009年 目的观察中药牛膝提取物神经再生素(NRF)对小鼠损伤坐骨神经的修复作用。方法ICR小鼠50只,雌雄各半,行坐骨神经夹伤术,随机分成5组:NRF高、中、低剂量组,弥可保组(阳性对照),生理盐水组(空白对照)。术后每日腹腔注射给药。采用小鼠坐骨神经功能指数(sc iatic function index,SFI)、组织形态学及电镜检查,观察NRF对损伤坐骨神经的影响。结果与空白对照组相比,NRF可显著改善小鼠的坐骨神经功能。超微结构观察表明,实验组有髓神经纤维的髓鞘形态、厚度、成熟度均优于对照组,而变性纤维的数目少于对照组。结论NRF能促进小鼠坐骨神经损伤后的修复及其功能的恢复。 刘小君 程琼 丁斐关键词:牛膝 神经再生素 坐骨神经损伤 神经再生 神经生长液含药血清对神经元生长和雪旺细胞增殖的影响 2008年 目的观察神经生长液含药血清对体外培养的背根神经节神经元生长和雪旺细胞增殖的影响,探讨其促损伤神经修复的机制。方法制备神经生长含药血清;采用新生大鼠背根神经节及雪旺细胞体外培养,通过形态学分析,观察神经生长液含药血清对背根神经节神经元突起生长的影响;采用MTT、BmIU标记和细胞计数法,观察神经生长液含药血清对雪旺细胞活力及其增殖的影响。结果高剂量的神经生长液含药血清,可有效地促进大鼠背根神经节神经元生长;高、低剂量的神经生长液含药血清均能显著增加大鼠雪旺细胞的活力,促进雪旺细胞增殖。结论神经生长液含药血清具有促进神经元生长、增强雪旺细胞活力、促进雪旺细胞增殖作用。 龚炎培 刘小君 张琦 丁斐关键词:神经元 许旺细胞 神经生长液 含药血清 红景天苷对谷氨酸损伤海马神经元Bax和Bcl-2表达的影响 被引量:2 2010年 目的观察红景天苷对谷氨酸(Glu)损伤海马神经元Bax和Bcl-2基因和蛋白表达的影响。方法原代培养胚鼠海马神经元,不同浓度红景天苷(60、120、240μmol/L)预孵育24 h后,加入125μmol/L Glu损伤24 h。四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各组海马神经元活力;显微镜下观察各组细胞形态;Hoechst染色观察细胞凋亡情况;RT-PCR观察细胞内Bax和Bcl-2 mRNA的表达变化;Western blot观察细胞内Bax和Bcl-2蛋白的表达变化。结果红景天苷细胞可显著改善Glu损伤后的神经元生长状态和活力,降低Glu引起的细胞凋亡率(均P<0.01);拮抗Glu损伤导致的细胞Bcl-2/Bax mRNA及其蛋白比例的下降,此作用存在剂量效应关系,至240μmol/L时作用最显著(P<0.05或<0.01)。结论红景天苷可显著拮抗Glu诱导海马神经元的凋亡,其机制可能与调节凋亡相关基因Bax和Bcl-2的表达有关。 陈霞 张书强 丁斐关键词:红景天苷 谷氨酸 海马神经元 BAX BCL-2 大鼠坐骨神经损伤修复后近端轴突再生的初步研究 被引量:2 2009年 目的采用生长相关蛋白-43(GAP-43)对sD大鼠坐骨神经近端新生轴突进行标记,观察坐骨神经损伤修复后近端轴突再生过程。方法64只SPF级SD大鼠于右侧坐骨神经分叉以上5mm处切断坐骨神经,分别采用原位缝合以及生物可溶性甲壳质套管小间隙(2mm)缝合方法进行修复,分别于术后1、3、7及14d取材。观察神经缝合处组织大体形态;套管内坐骨神经生长状态;近端新生轴突形态,并应用图像分析方法对新生轴突数目进行定量分析。结果套管小间隙缝合组大鼠神经缝合处粘连情况较轻.免疫荧光染色显示:术后14d,新生纤维神经干形成圆锥形向前生长,形态规则均一。原位缝合组大鼠缝合处粘连较重,新生轴突于7d左右长过缝合点,坐骨神经远端新生轴突散在分布,形态不规则。免疫荧光染色图像分析结果显示:大鼠坐骨神经损伤修复后,术后3d原位缝合组新生轴突数目较套管缝合组多,差异有统计学意义(P〈0.01);术后7d套管小间隙缝合组大鼠坐骨神经开始大量再生;术后14d左右,套管小间隙缝合组新生轴突数目显著高于原位缝合组(P〈0.05)。结论甲壳质套管具有良好的生物相容性,套管内新生轴突前沿以圆锥形向前生长,新生轴突形态较原位缝合组好,套管小间隙修复7d后新生轴突数目开始较原位缝合组多。本实验主要观察了两种术式修复后大鼠坐骨神经新生轴突的生长规律,也从组织学角度解释了生物套管小间隙套接方法的再生效果比原位缝合效果好的可能原因所在。 张丞 王艳华 郁凯 张培训 张宏波 姜保国关键词:生长相关蛋白 坐骨神经 轴突 神经生长颗粒对大鼠腓总神经横断损伤的修复作用 被引量:1 2008年 目的研究神经生长颗粒(NGG)对大鼠腓总神经横断损伤的修复作用。方法SD大鼠50只,随机分为NGG高、中、低剂量组(剂量分别为5.2g生药/kg、2.6g生药/kg、1.3g生药/kg)、弥可保组(剂量为625μg/kg)、空白对照组。行大鼠腓总神经横断缝合术,术后每日灌胃给药。于术后2周、3周、4周行足迹实验,测定展趾功能,术后4周行电生理检测,测定复合肌动作电位和神经干动作电位检测,组织形态学分析,测定再生有髓神经纤维数、髓鞘厚度和胫前肌肌纤维截面积,观察NGG对大鼠腓总神经损伤的修复作用。结果与空白对照组相比,NGG组展趾功能、复合肌动作电位和神经干动作电位波幅及恢复率、再生有髓神经纤维计数、髓鞘厚度及胫前肌横截面积均显著增高,且呈剂量依赖的量效关系。结论NGG有利于轴突生长和髓鞘形成,可以促进大鼠损伤神经修复和神经功能的恢复。 顾剑辉 龚蕾蕾 黄丽 薛成斌 顾晓松关键词:腓总神经 电生理 红景天苷对谷氨酸损伤海马神经元的保护作用 被引量:21 2008年 目的观察红景天苷(salidroside)对谷氨酸(Glu)损伤海马神经元的保护作用。方法胚鼠原代培养海马神经元,与不同浓度的红景天苷(10、20和40mg/L)共同孵育24h,加入125μmol/L谷氨酸损伤海马神经元15min。采用MTT法检测细胞活性;生化法测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活力的变化;膜联蛋白-V-FITC(annexin V-FITC)和碘化吡啶(PI)双标染色以及Hoechst染色观察细胞凋亡情况;激光共焦显微镜观察细胞内Ca2+的变化。结果红景天苷可明显改善谷氨酸损伤后细胞的活性,抑制谷氨酸损伤后培养液中LDH的活力,降低谷氨酸引起的细胞凋亡率,降低谷氨酸损伤后细胞内的Ca2+浓度。结论红景天苷可明显拮抗谷氨酸损伤海马神经元的作用,其机制可能与抑制谷氨酸引起的Ca2+内流有关。 陈霞 周松林 顾晓松 丁斐关键词:红景天苷 谷氨酸 海马神经元 细胞培养 神经再生素促大鼠背根神经节生长作用的研究 被引量:8 2006年 目的研究神经再生素(NRF)对体外培养新生大鼠背根神经节生长及NF-H表达的影响。方法体外大鼠背根神经节(DRG)培养;免疫荧光细胞化学、实时荧光定量PCR和Western blot等方法。结果免疫荧光细胞化学结果提示,NRF能促进背根神经节神经突起的生长,浓度为2.0 mg/L时生长状况最佳;实时荧光定量PCR和Western blot结果提示,NRF能增加体外培养的背根神经节NF-H mRNA和蛋白的表达,在浓度为2.0 mg/L时表达最高。结论NRF能促进体外培养背根神经节神经突起的生长和NF-H的表达,表明NRF对发育期感觉神经元具有神经营养作用。 张琦 汤欣 丁斐关键词:神经再生素 背根神经节 神经丝蛋白 实时荧光定量PCR 远端神经变性对神经再生放大规律的影响 被引量:2 2008年 目的探讨应用正常供体神经修复预变性受体神经时,再生神经纤维放大的效果。方法将雄性SD大鼠12只,随机分为变性组、对照组,所有动物均实行手术。变性组应用部分正常腓总神经修复变性8周胫神经远端;对照组应用部分正常腓总神经修复UPN损伤后胫神经远端。术后3个月进行神经电生理测量、肌力测量、组织学观察、神经锇酸染色及有髓神经纤维计数,并计算两组神经再生放大率。结果变性组和对照组神经传导速度分别为(16.992±3.737)m/s和(23.092±2.788)m/s;肌肉强直收缩力恢复率为(39.642±5.865)%和(71.098±6.778)%;再生有髓神经纤维数分别为1718.2±282.0和3340.0±506.5;神经再生放大率1.581±0.329和3.098±0.642;以上指标变性组均低于对照组(P〈0.05)。结论应用正常神经修复8周变性神经远端时,神经纤维再生放大率降低,说明损伤远端神经较长时间变性。接受再生神经纤维长入的能力降低。 寇玉辉 殷晓峰 姜保国 王艳华 张培训 张宏波关键词:外周神经 神经再生