您的位置: 专家智库 > >

国家自然科学基金(30500435)

作品数:10 被引量:33H指数:3
相关作者:丛延广胡福泉胡勇黎庶陈志瑾更多>>
相关机构:第三军医大学重庆理工大学遵义医学院更多>>
发文基金:国家自然科学基金重庆市自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 10篇中文期刊文章

领域

  • 7篇医药卫生
  • 4篇生物学

主题

  • 3篇毒力
  • 3篇沙门菌
  • 3篇伤寒
  • 3篇伤寒沙门菌
  • 3篇基因
  • 2篇阴性菌
  • 2篇突变株
  • 2篇细菌
  • 2篇抗原
  • 2篇基因组学
  • 2篇革兰
  • 2篇革兰阴性
  • 2篇革兰阴性菌
  • 2篇宏基因组
  • 2篇宏基因组学
  • 1篇单基因
  • 1篇单交
  • 1篇蛋白抗原
  • 1篇原核表达
  • 1篇致病

机构

  • 9篇第三军医大学
  • 2篇重庆理工大学
  • 1篇重庆工学院
  • 1篇遵义医学院
  • 1篇中国人民解放...
  • 1篇解放军第三医...

作者

  • 9篇丛延广
  • 6篇胡福泉
  • 4篇胡勇
  • 3篇黎庶
  • 2篇王刚
  • 2篇熊坤
  • 2篇陈志瑾
  • 1篇饶贤才
  • 1篇郑润泉
  • 1篇胡晓梅
  • 1篇张云茹
  • 1篇王景
  • 1篇邱蓉荣
  • 1篇滕亮
  • 1篇龚明福
  • 1篇穆媛嫒
  • 1篇康继
  • 1篇余铖灏
  • 1篇张金龙

传媒

  • 3篇第三军医大学...
  • 2篇生命的化学
  • 1篇中国科学(C...
  • 1篇免疫学杂志
  • 1篇微生物学免疫...
  • 1篇Scienc...
  • 1篇现代生物医学...

年份

  • 1篇2012
  • 1篇2010
  • 4篇2009
  • 2篇2008
  • 1篇2007
  • 1篇2006
10 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
利用转座子建立细菌单基因突变株库的策略和方法
2008年
构建细菌突变株是认识细菌基因功能的一个重要途径。如果针对某个细菌建立一个包括所有基因的单基因突变株库,对于该细菌基因功能的认识无疑具有巨大的推动作用。本文综述了利用转座子建立细菌突变株库的工作,并侧重于其构建策略和方法。
丛延广胡福泉
关键词:转座子突变株
革兰阴性菌基因敲除载体的构建及其应用被引量:11
2009年
目的构建1个适用于革兰阴性菌的精确基因敲除载体并证明其有效性。方法构建的载体主要包括以下成分:π蛋白依赖性复制起点oriR6K;接合转移基因mob,使载体可以通过简单的接合方式实现转移;多克隆位点序列:EcoRⅠ-XbaⅠ-ApaⅠ-SfiⅠ-SacⅠ-NotⅠ-SpeⅠ-NdeⅠ-SacⅡ-BglⅡ;反向选择标志SacB;正向选择标志卡那霉素抗性片段。载体构建完成后,采用该载体对弗氏枸橼酸杆菌的yeeZ基因进行框架内敲除,以验证其有效性。结果成功构建了敲除载体,命名为pYG4,并对yeeZ基因进行了框架内精确敲除获得突变株。结论本研究构建的载体适用于对革兰阴性菌进行目的基因的精确敲除,将在细菌基因功能研究中得到广泛的应用。
王景穆媛嫒黎庶陈志瑾熊坤丛延广
关键词:突变株基因功能
伤寒沙门菌感染过程中体内诱导表达蛋白抗原的筛选被引量:1
2009年
在感染过程中,病原体会表达一系列基因产物以适应体内环境.因此,病原体只在宿主体内表达或高表达的基因可能与致病机制密切相关.本研究用体内诱导抗原技术(in vivo induced antigen technology,IVIAT)来筛选伤寒沙门菌感染过程中体内诱导表达的抗原,共筛选到7个体内诱导(in vivo induced,IVI)抗原,分别是BcfD(菌毛结构亚单位)、GrxC(谷氧还蛋白3)、SapB(ABC转运系统)、T3663(ABC未知转运系统)、T3816(可能的有关硫氰酸酶的硫转移酶)、T1497(可能的TonB依赖受体)和T3689(功能未知),其中BcfD,GrxC,SapB,T3663和T3689这5个抗原与吸附处理后的健康志愿者的血清无交叉免疫反应.这些筛选到的体内诱导抗原是新药和疫苗开发的潜在靶标,同时也有利于新诊断方法的研究.
胡勇丛延广黎庶饶贤才王刚胡福泉
关键词:伤寒沙门菌毒力
伤寒沙门菌bcfD基因的克隆表达被引量:1
2010年
目的构建伤寒沙门菌BcfD基因的原核表达质粒,表达BcfD蛋白。方法PCR法从伤寒沙门菌Ty2菌株基因组中扩增bcfD目的基因,经克隆和亚克隆构建原核表达载体pET-30a-bcf,将该重组质粒转化E.coliBL21(DE3)并进行原核表达,用SDS-PAGE和免疫印迹分析表达蛋白。结果扩增到与bcfD基因预期大小相符的片段,测序证明与bcfD基因序列完全一致,SDS-PAGE显示该蛋白主要以包涵体的形式表达,相对分子质量为42×103,免疫印迹分析表明,表达产物与经用大肠杆菌吸附处理后的伤寒患者血清能进行免疫反应。结论成功构建了bcfD基因原核表达载体并在大肠杆菌中表达了目的蛋白。
胡勇丛延广邱蓉荣张云茹胡福泉
关键词:沙门菌伤寒抗原细菌原核表达
利用IVIAT技术初步筛选伤寒沙门菌的体内诱导基因被引量:9
2008年
目的利用体内诱生抗原筛选技术初步筛选伤寒沙门菌的体内诱导基因。方法首先将3个伤寒病人恢复期的血清等体积混合,用体外培养的伤寒沙门菌全菌体、超声裂解产物及加热变性裂解产物充分吸收处理。然后采用pET-30a/b/c表达载体系统构建伤寒沙门菌Ty2菌株的基因组表达文库,并以吸收后的血清为探针,筛选伤寒沙门菌基因组表达文库。结果从5000个克隆中获得5个阳性克隆,对阳性克隆测序和序列检索分析表明,涉及6个开放阅读框。结论本实验利用IVIAT筛选体内诱导基因的各个程序是正确的,并初步筛选到伤寒沙门菌的体内诱导基因。
胡勇丛延广王刚胡福泉
关键词:伤寒沙门菌毒力
革兰阴性菌基因快速失活载体的构建及其应用被引量:1
2009年
目的构建适用于革兰阴性菌的快速基因失活载体系统并进行初步应用。方法应用分子克隆技术构建快速基因失活载体系统。载体成分主要包括:π蛋白依赖性复制起点ori R6K;编码接合转移的mob片段;多克隆位点序列;含有2个XcmⅠ酶切位点的T载体形成片段以及多种耐药片段,包括Chl(氯霉素抗性)、Tet(四环素抗性)、Km(卡那霉素抗性),获得的载体分别命名为EK3-Chl、EK3-Tet、EK3-Km。采用构建的EK3-Tet载体对弗氏枸橼酸杆菌的yeeZ基因进行插入突变,以验证其有效性。通过XcmⅠ酶切EK3-Tet质粒形成T载体状态,将PCR扩增得到的两端截短的yeeZ基因与该T载体直接连接,获得的质粒采用接合方式转移到弗氏枸橼酸杆菌ATCC8090中以实现整合,双抗培养基筛选整合突变株,对获得的突变株进行鉴定和形态观察。结果成功构建了EK3-Chl、EK3-Tet和EK3-Km,并对yeeZ基因进行插入突变获得突变株,步骤简便,工作周期短。结论上述构建的载体系统能够对革兰阴性菌进行目的基因的快速插入失活,该载体可在细菌基因功能研究中得到一定的应用。
龚明福滕亮张金龙黎庶胡晓梅陈志瑾熊坤丛延广
关键词:基因失活
体内诱生抗原鉴定技术被引量:2
2006年
体外不表达而只在体内才表达的基因称为体内诱导基因。研究表明,体内诱导基因涉及病原菌在体内的生存和致病过程,因此有重要意义。最近提出的体内诱生抗原鉴定技术(invivo-inducedantigentechnology,IVIAT)就是用于筛选病原菌体内诱导基因的一种方法。该方法不使用动物模型,而是采用经病原菌体外表达抗原吸收处理的病人血清来检测病原菌的表达文库,从而筛选体内诱导基因;方法简便、快速。这些筛选得到的体内诱导基因有助于病原菌致病机制的研究,同时也能够为抗菌药物、诊断试剂及疫苗设计等研究提供潜在靶标。
胡勇丛延广胡福泉
关键词:致病机制毒力
Identification of in vivo induced protein antigens of Salmonella enterica serovar Typhi during human infection被引量:9
2009年
During infectious disease episodes, pathogens express distinct subsets of virulence factors which allow them to adapt to different environments. Hence, genes that are expressed or upregulated in vivo are implicated in pathogenesis. We used in vivo induced antigen technology (IVIAT) to identify antigens which are expressed during infection with Salmonella enterica serovar Typhi. We identified 7 in vivo induced (IVI) antigens, which included BcfD (a fimbrial structural subunit), GrxC (a glutaredoxin 3), SapB (an ABC-type transport system), T3663 (an ABC-type uncharacterized transport system), T3816 (a putative rhodanese-related sulfurtransferase), T1497 (a probable TonB-dependent receptor) and T3689 (unknown function). Of the 7 identified antigens, 5 antigens had no cross-immunoreactivity in adsorbed control sera from healthy subjects. These 5 included BcfD, GrxC, SapB, T3663 and T3689. Antigens identified in this study are potential targets for drug and vaccine development and may be utilized as diagnostic agents.
HU Yong1,2, CONG YanGuang1, LI Shu1, RAO XianCai1, WANG Gang3 & HU FuQuan1 1 Department of Microbiology, Third Military Medical University, Chongqing 400038, China
关键词:SALMONELLAENTERICASEROVARINDUCEDANTIGENVIRULENCE
宏基因组学:基本策略及在医学研究领域中的可能应用被引量:3
2007年
宏基因组学(metagenomics)的提出是分子生物学领域的一个重要进展。在自然生境中有大量不可培养微生物的存在,无法通过培养法进行研究,而宏基因组学的策略则突破了这一束缚。宏基因组学是从生境中取得全部微生物的基因组,并进行系统研究的方法。该文介绍宏基因组学的基本情况,并着重探讨其在医学研究领域中的可能应用。
丛延广胡福泉
关键词:宏基因组学宏基因组微生物
宏基因组学技术在酶开发方面的应用被引量:2
2012年
宏基因组技术是近些年发展起来的生物新技术。其针对环境样本中的全部微生物基因组DNA开展研究,可以覆盖过去无法研究的不可培养微生物,极大地拓宽了研究的广度,因而,一经提出就得到广泛应用,并取得丰富成果。本文主要针对宏基因组技术在酶开发方面的有关应用进行综述。
余铖灏郑润泉康继丛延广
关键词:宏基因组
共1页<1>
聚类工具0