广西壮族自治区自然科学基金(0991137)
- 作品数:7 被引量:18H指数:4
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- 相关机构:广西医科大学清华大学更多>>
- 发文基金:广西壮族自治区自然科学基金广西壮族自治区科学研究与技术开发计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 螺旋藻激酶分离提纯方法初探被引量:9
- 2011年
- 目的研究螺旋藻激酶的分离纯化方法,为工业化放大生产螺旋藻激酶药物提供一定的实验依据,为后续的酶学性质研究打下基础。方法配制螺旋藻激酶粗酶液,通过离心沉淀,饱和硫酸铵分级盐析,透析,凝胶层析来分离提纯螺旋藻激酶,最后用SDS-PAGE电泳法验证螺旋藻激酶纯度,测定分子量。结果通过一系列的分离提纯得到了较纯的蛋白,酶回收率达到42.3%,纯化倍数达到6.1。所得螺旋藻激酶的分子量为40 KD。结论初步探索出较为优化的螺旋藻激酶的分离纯化方法。
- 肖云晓陈高斯庞辉
- 关键词:分离纯化凝胶层析
- 螺旋藻蛋白激酶对老龄大鼠血液流变学影响的研究
- 2009年
- 目的研究螺旋藻蛋白激酶(SPK)对老龄大鼠血液流变学的影响。方法24-36月龄老年大鼠30只,按随机数字表法随机分为SPK高浓度组(A组)、SPK低浓度组(B组)和老龄对照组(C组),每组10只,3-4月龄大鼠为成年对照组(D组),10只。A、B组分别给予SPK混悬液1 g/kg、0.5 g/kg灌服C、D组灌服等量生理盐水,均连续7 d。运用全自动血液流变快速测定仪检测血液流变学各项指标。结果SPK可以降低老龄大鼠的高、中、低切变率下的全血黏度(P〈0.05),降低红细胞压积和血沉(P〈0.05)。结论SPK可以显著降低老龄大鼠的血液黏度,改善血液流变学特性。
- 连芳庞辉李小花陈高斯秦小茹罗冬覃颖脱李运福
- 关键词:血液流变学
- 螺旋藻激酶的酶学性质研究被引量:2
- 2012年
- 目的研究螺旋藻激酶的酶学性质。方法螺旋藻激酶通过硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-75凝胶过滤层析、冷冻干燥法从螺旋藻激酶发酵粗提物中纯化而来,用纤维蛋白平板法测定其纤溶活性,研究螺旋藻激酶的作用方式及温度、pH和抑制剂对其纤溶活性的影响。结果螺旋藻激酶能直接溶解纤维蛋白;它在45℃时活性最高,最适反应温度范围为45~55℃;最适反应pH为8,pH6~10内稳定性较强;EDTA和DTT对螺旋藻激酶活力无明显影响,而PMSF能完全抑制其活性。结论螺旋藻激酶热稳定性强,适宜碱性的环境。螺旋藻激酶是一种丝氨酸蛋白酶,结构中不含二硫键。
- 蒋皓陈高斯庞辉肖云晓
- 关键词:酶学性质
- 螺旋藻蛋白激酶溶栓作用的研究被引量:5
- 2012年
- 目的探索螺旋藻蛋白激酶(SPK)的溶栓作用。方法体外用试管法,通过测定血栓溶解率来研究SPK的溶栓作用;用琼脂糖-纤维蛋白平板法检测SPK的纤溶作用;体内采用结扎大鼠下腔静脉的方法复制静脉血栓模型,通过称取血栓重量来研究SPK对静脉血栓的溶解作用。结果 SPK使体外试管法的血栓溶解率显著增加;SPK可以溶解琼脂糖-纤维蛋白平板;使体内实验的静脉血栓重量减轻,各结果均具有明显的剂量-效应依赖关系。结论螺旋藻蛋白激酶具有明显的溶栓作用。
- 庞辉蒋皓李小花陈高斯
- 关键词:溶栓
- 螺旋藻激酶对人脐静脉内皮细胞t-PAmRNA、PAI-1mRNA表达的影响被引量:7
- 2012年
- 目的研究螺旋藻激酶(Spirulina kinase,SPK)对人脐静脉内皮细胞t-PAmRNA、PAI-1mRNA表达的影响,探讨其抗血栓作用机制,为开发新型溶栓药物提供理论依据。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),建立肾上腺素(Adr)损伤模型加入不同浓度的SPK,并以肝素(Hep)为阳性对照,与空白组对照,经过12,24,48 h后,逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR),扩增产物经凝胶电泳分离后,凝胶图像分析仪照相和扫描,测定各组t-PAmRNA、PAI-1mRNA与内参基因三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)mRNA的相对表达量。结果在Adr损伤模型中,2 mg/ml SPK可以上调t-PAmRNA表达,超大剂量SPK降低t-PAmRNA表达。SPK还可以随着剂量的增加明显的抑制PAI-1mRNA的表达,效果强于大剂量的肝素。结论 SPK可能通过小部分活化t-PAmRNA的表达,抑制PAI-1mRNA的表达,从而达到抗血栓的作用。
- 赵杰肖云晓蒋浩庞辉
- 关键词:组织型纤溶酶原激活物纤溶酶原激活物抑制物逆转录多聚酶链式反应
- 螺旋藻激酶提取物对血栓形成的影响被引量:6
- 2009年
- 目的探索螺旋藻激酶(SPK)提取物对血栓形成的影响。方法体外采用试管法测定家兔全血凝固时间;体内采用结扎老年大鼠下腔静脉法复制静脉血栓模型,称取血栓重量,采用毛细管法、剪尾法测定老年小鼠凝血时间(CT)和出血时间(BT)的变化,观察SPK提取物对静脉血栓形成的影响。结果SPK使体外试管法CT显著延长,使血栓形成实验的静脉血栓重量减轻,同时SPK也可以使老年小鼠的CT和BT显著延长,且各结果均具有明显的剂量-效应依赖关系。结论SPK提取物具有明显的抗凝作用。
- 陈高斯李小花庞辉贾晓栋秦小茹罗冬覃颖脱李运福
- 关键词:抗凝血血栓形成
- 螺旋藻激酶对大鼠动静脉环路血栓的溶栓作用研究被引量:4
- 2010年
- 目的探索螺旋藻激酶(SPK)对大鼠动静脉环路血栓的溶栓作用及其机制。方法采用大鼠颈动-静脉环路血栓模型,通过称取血栓重量来测定螺旋藻激酶的溶栓作用;腹主动脉取血分离血浆,测定螺旋藻激酶对血浆D二聚体、TPA含量的影响。结果螺旋藻激酶使动静脉环路血栓干、湿重明显减轻,高、低剂量螺旋藻激酶使血浆D-二聚体含量明显升高(P均<0.05),高剂量螺旋藻激酶使TPA含量明显升高(P<0.05)。结论螺旋藻蛋白激酶能抑制血栓形成,激活纤溶活性,具有较好溶栓效力。
- 庞辉李小花陈高斯凌凯南王保斌张崔勇黄家俍刘庆朱召熊安明蒙莲
- 关键词:血栓溶解