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低强度脉冲超声对同种异体软骨细胞-藻酸钙凝胶复合物修复兔膝关节软骨缺损的影响被引量：4: 2013年; 目的探讨低强度脉冲超声(low intensive pulsed ultrasound,LIPUS)干预后的同种异体软骨细胞-藻酸钙凝胶复合物修复兔膝关节软骨缺损的有效性。方法取8只2周龄新西兰白兔,采用机械法联合Ⅱ型胶原酶消化法分离双侧膝关节软骨细胞。取第3代细胞与1.2%藻酸钠溶液制成细胞悬液,调整细胞密度为5×106个/mL,制备软骨细胞-藻酸钙凝胶复合物,并给予超声干预,参数为:中心频率1 MHz,脉冲重复频率1 kHz,超声强度60 mW/cm2,作用周期50,作用时间20 min,每天1次,共干预3 d。取28～35周龄健康新西兰白兔18只,体重2.1～2.8 kg,随机分为超声凝胶组、普通凝胶组及模型组,每组6只。于3组实验动物双侧膝关节制备直径约3 mm、深3 mm的膝关节软骨缺损模型后,超声凝胶组、普通凝胶组分别于缺损区对应植入经超声干预及未行干预的软骨细胞-藻酸钙凝胶复合物,模型组不作处理。术后观察实验动物一般情况,并于术后8、12周处死动物分别行大体观察、组织学观察及Wakitani组织学评分、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色观察。结果大体观察见超声凝胶组与普通凝胶组缺损区均逐渐被新生组织填充,但前者为透明软骨样组织,后者为灰白色软骨样组织,且前者表面平整度及组织整合程度均优于后者;模型组缺损区修复缓慢且新生组织弹性差。术后8、12周修复区组织学观察及Wakitani组织学评分示超声凝胶组优于普通凝胶组,两凝胶组均优于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);两凝胶组组内8周与12周间比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。术后8、12周,超声凝胶组及普通凝胶组Ⅱ型胶原染色阳性表达面积、吸光度(A)值均显著高于模型组(P<0.05),两凝胶组术后12周时比较差异亦有统计学意义(P<0.05)。超声凝胶组组内8周与12周间比较,差异有统计学意义(P<0.05);普通凝胶组及模型组两时间点间比较,差异无统计学意义(P>0.05)�; 郭杨马勇董睿刘尚仑屠娟; 关键词：组织工程软骨软骨细胞藻酸钙凝胶低强度脉冲超声软骨缺损

低强度脉冲超声介导威灵仙干预兔膝关节软骨细胞增殖及Ⅱ型胶原和转化生长因子β1的表达被引量：9: 2014年; 背景:研究显示威灵仙可促进软骨细胞增殖,维持和促进软骨细胞合成蛋白多糖和Ⅱ型胶原;低强度脉冲超声能有效促进软骨细胞增殖、提高细胞膜的通透性,促进药物或基因的传递,从而提高药物的生物学效应。目的:观察低强度脉冲超声介导威灵仙对体外培养的兔膝关节软骨细胞增殖、Ⅱ型胶原及转化生长因子β1表达的影响,探讨低强度脉冲超声介导威灵仙在软骨损伤修复中的作用及机制。方法:体外分离培养兔膝关节软骨细胞,取处于对数生长期的2代细胞,随机分为4组:对照组,低强度脉冲超声组,威灵仙组,威灵仙+低强度脉冲超声组,干预3 d后分别采用CCK-8比色法检测软骨细胞增殖情况,细胞化学染色法分析Ⅱ型胶原分泌情况及Western blot检测转化生长因子β1的表达情况。结果与结论:干预培养3 d后,与对照组比较,其他3组细胞数量均显著增加(P<0.05),威灵仙+低强度脉冲超声组细胞数量最多;威灵仙+低强度脉冲超声组软骨细胞Ⅱ型胶原表达面积、吸光度值均显著大于对照组(P<0.05),且其差值大于低强度脉冲超声组、威灵仙组与对照组差值之和;威灵仙+低强度脉冲超声组转化生长因子β1表达水平显著,其相对灰度值显著高于其他各组(P<0.05)。结果提示低强度脉冲超声、威灵仙均可促进体外培养兔膝关节软骨细胞增殖及Ⅱ型胶原、转化生长因子β1的分泌,二者联用具有一定的协同作用。; 马勇郭杨屠娟成吉华郭各朴黄桂成; 关键词：转化生长因子Β1 威灵仙低强度脉冲超声

低强度脉冲超声激发的声微流增强藻酸钙凝胶支架材料的孔隙率和通透性研究: 2016年; 低强度脉冲超声(LIPUS)激发的声微流场所产生的剪切应力可作用于细胞膜表面,从而显著增强细胞膜的通透性。构建了三维藻酸钙凝胶支架培养系统,来模拟有利于细胞生长的营养供给和新陈代谢体内微环境;基于扫描电子显微镜、体内荧光图像和激光共聚焦图像观测技术,对LIPUS增强三维藻酸钙凝胶支架材料的孔隙率和通透性的作用机制和参数相关性进行了系统的研究。结果表明,三维藻酸钙凝胶支架材料的孔隙率和通透性可随着LIPUS的驱动声压的升高而显著增强。此外,通过对三维支架材料内的细胞增殖情况分析,发现在适当的LIPUS驱动声压(如P-=0.055 MPa)下,HeLa细胞在LIPUS作用下的三维藻酸钙凝胶支架材料中可获得更高的增殖率。; 聂欣宇马勇郭霞生屠娟章东; 关键词：通透性孔隙率低强度凝胶

骨组织工程中成骨、破骨细胞三维空间培养的研究进展被引量：2: 2014年; 骨组织工程中成骨、破骨细胞的空间分布对其治疗效果有决定性的影响。不同的细胞外基质因其不同的孔隙结构和表面微形貌,细胞在其中的空间分布情况各异。同时,在中医药、物理、西药以及生长因子等因素的干预下,细胞在三维空间结构中的分布也会受到影响。研究成骨、破骨细胞在三维结构中的空间分布变化,可以推进骨组织工程研究的进展。; 钱超郭杨马勇; 关键词：骨组织工程细胞分布中医药

低强度脉冲超声治疗骨关节炎的应用进展被引量：7: 2014年; 近年来低强度脉冲超声治疗骨关节炎在临床研究中取得了一定的疗效。研究内容涉及软骨细胞、Ⅱ型蛋白胶原、胶原酶、转化生长因子β、滑膜炎及病理改变等方面。系列临床研究结果说明低强度脉冲超声是一种无创伤、操作方便、费用低廉、疗效确切、并发症少的治疗方法。本文就低强度脉冲超声治疗骨关节炎的应用进展作一综述。; 成吉华赵丹郭杨马勇; 关键词：低强度骨关节炎软骨细胞胶原酶

低强度脉冲超声对兔关节软骨细胞增殖及Ⅱ型胶原表达的影响被引量：5: 2014年; 目的探讨低强度脉冲超声(LIPUS)对体外培养兔关节软骨细胞增殖及其合成Ⅱ型胶原的影响。方法选取生长状况良好的第3代兔膝关节软骨细胞,随机分为空白组及3种强度的LIPUS干预组,其超声强度分别为40、50、80m W/cm2,其余作用参数相同,中心频率:1.0 MHz,脉冲重复频率:1.0 KHz,脉冲宽度:200μs,作用周期:50。各LIPUS干预组每日照射20 min,连续照射3 d后,采用CCK-8比色法检测软骨细胞增殖情况,免疫组化染色分析Ⅱ型胶原表达量的变化。结果强度50、80 m W/cm2的LIPUS干预组软骨细胞增殖较空白组显著增多(P<0.01),且50 m W/cm2LIPUS的作用最为明显,而40 m W/cm2LIPUS促软骨细胞增殖效应与空白组相比差异无统计学意义(P=0.249);各强度LIPUS组Ⅱ型胶原表达量均高于空白组(P<0.01),尤以50 m W/cm2LIPUS组Ⅱ型胶原表达量增加最为显著,优于40、80 m W/cm2LIPUS的效应(P<0.01)。结论 LIPUS能够促进体外培养关节软骨细胞增殖,增加软骨细胞Ⅱ型胶原的分泌,且强度为50 m W/cm2时效应较为明显。; 郭杨马勇董睿刘尚仑屠娟黄桂成; 关键词：低强度脉冲超声软骨细胞细胞增殖

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江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目(2010-WS-082)

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