国家自然科学基金(30870073)
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
- 相关作者：陶美凤余姣姣郭航白亭丽俞燕飞更多>>
- 相关机构：华中农业大学上海交通大学更多>>
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- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 刺糖多孢菌鼠李糖和福乐糖胺合成基因的克隆和组装被引量：2
- 2012年
- 鼠李糖和福乐糖胺是多杀菌素生物合成必需的2个脱氧糖结构单元,负责其合成的4种酶的基因(gtt、epi、gdh、kre)与多杀菌素生物合成基因簇并不在一起,而是分散分布在染色体的3个位点上。为克隆到完整的多杀菌素生物合成基因簇,采用构建基因组文库、PCR扩增等手段从刺糖多孢菌NRRL18395染色体分别克隆gtt、epi、gdh和kre基因,并将其克隆组装在同一整合型载体上,以便于构建用于表达多杀菌素糖单元合成基因的表达载体。
- 郭航白亭丽陶美凤
- 关键词：刺糖多孢菌多杀菌素鼠李糖原位杂交
- 无机盐对阿维链霉菌接合转移及异源表达放线紫红素的影响被引量：7
- 2010年
- 【目的】阿维链霉菌可作为异源表达抗生素生物合成基因簇的良好宿主,但是需要优化含有大片段DNA质粒的接合转移效率。【方法】我们选取MgCl2、NaCl、Ca(NO3)2和CaCl2等4种无机盐,在0-200mmol/L浓度范围内分别研究其对大质粒向阿维链霉菌接合转移的影响,再设计完全随机试验筛选最佳条件。【结果】CaCl2对阿维链霉菌接合转移有极明显的促进作用,MgCl2也有一定提高作用。通过完全随机试验筛选出最佳的CaCl2和MgCl2浓度组合,使大质粒的接合转移效率提高11倍。同时,本研究还发现阿维链霉菌异源表达放线紫红素的最适培养基,成功表达放线紫红素。【结论】特定无机盐对阿维链霉菌接合转移效率有明显提高作用,并且能促进放线紫红素在阿维链霉菌中的表达。
- 余姣姣陶美凤
- 关键词：阿维链霉菌异源表达
- 灰红链霉菌AL7基因组文库及异源表达文库的构建
- 2012年
- 灰红链霉菌AL7对多种植物病原真菌和细菌都具有明显的抑菌活性。本研究在通用的大肠杆菌克隆宿主基础上,构建获得Dcm甲基化缺陷菌株,再引入接合转移辅助质粒pUZ8002得到菌株LP3。以LP3为宿主构建灰红链霉菌AL7的基因组粘粒文库,平均插入片段大小40kb。用高通量接合转移的方法将文库转到变铅青链霉菌TK24中,得到了异源表达文库,并从表达文库中初筛获得一些表型特异的克隆,如光秃表型、产素提前表型、产孢提前表型等。
- 刘培俞燕飞陶美凤
- 关键词：基因组文库异源表达
