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南京医科大学科技创新基金资助项目(CX2004004)
作品数:
1
被引量:2
H指数:1
相关作者:
喻容彬
缪林
刘政
张发明
季国忠
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相关机构:
第四军医大学西京医院
南京医科大学第二附属医院
南京医科大学
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发文基金:
南京医科大学科技创新基金资助项目
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相关领域:
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喻容彬
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医学研究生学...
年份
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2006
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Smad4/DPC4基因小发夹RNA质粒表达载体的构建和鉴定
被引量:2
2006年
目的:构建Smad4基因小发夹RNA(shRNA)表达载体。方法:设计、合成3对编码Smad4基因shRNA的寡核苷酸序列,并分别将其克隆入pGCsi-H1/Neo/GFP质粒,酶切、测序鉴定,脂质体法转染293细胞。实时荧光定量PCR检测RNA干扰(RNA i)的抑制效果。结果:在经HindⅢ和BamHⅠ双酶切分别鉴定三种重组载体后,DNA测序证实小干扰RNA(siRNA)序列正确,并被准确克隆入载体。实时荧光定量PCR检测结果表明三种重组载体psiSm ad4-1、psiSm ad4-2和psiSm ad4-3载体,分别对293细胞中Smad4基因mRNA表达的特异性抑制率为39.00%、8.80%和73.80%。结论:成功构建Sm ad 4 pGCsi-H1/Neo/GFP/shRNA质粒,为后期研究Smad4基因在肿瘤细胞中的作用机制和基因治疗打下基础。
季国忠
张发明
黄曙
缪林
刘政
喻容彬
王学浩
关键词:
RNA干扰
SMAD4
小发夹RNA
293细胞
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