国家自然科学基金(30772035)
- 作品数：2 被引量：6H指数：1
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- 改良Cuff技术建立小鼠颈部异位心脏移植模型被引量：6
- 2008年
- 目的改进Cuff技术制作小鼠颈部异位心脏移植模型,以简化手术操作,提高手术成功率。方法使用自制套管将供心肺动脉套接于受体右颈外静脉,将供心升主动脉套接于受体右颈总动脉。结果正式实验40例,手术成功率92.5%。手术时间约60 min,供心冷缺血时间小于30 min。结论改良Cuff技术建立小鼠颈部异位心脏移植模型,无需显微外科操作,是一种经济实用、稳定可靠、易于复制的动物模型。
- 程峰顾晓冬项建斌陈宗祐蔡端
- 关键词：心脏移植异位移植小鼠模型
- 小鼠CD80和CD86基因RNA干扰慢病毒载体的构建及体外对树突状细胞的作用
- 2008年
- 目的构建小鼠CD80和CD86基因RNA干扰慢病毒表达载体,并在体外观察其对小鼠骨髓源性树突状细胞(dendritic cell,DC)的作用。方法针对已经筛选确定的CD80基因RNA干扰有效靶序列,合成靶序列的双链DNA,接入pGCL-GFP载体,再与pHelper1.0和pHelper2.0质粒共转染293T细胞,包装产生慢病毒,以293T细胞GFP蛋白的表达水平测定病毒滴度;同法构建出CD86基因RNA干扰慢病毒载体。慢病毒感染体外培养的DC,通过荧光显微镜检测感染效率,Annexin V/PI双染色法检测感染细胞凋亡和坏死情况,流式细胞仪检测CD80和CD86的表达情况。结果PCR和测序证实,pGCL-CD80 shRNA和pGCL-CD86 shRNA慢病毒载体构建正确,病毒滴度均达2×107 TU/mL,适合感染DC的MOI值为20,此时慢病毒对DC具有低毒性,感染效率为85.42%。CD80和CD86表达的抑制率分别为82.05%和77.78%。结论成功构建出小鼠CD80和CD86基因RNA干扰慢病毒载体,其有明显抑制DC表面CD80和CD86的表达,这为移植物排斥提供了新的治疗手段。
- 顾晓冬洪军项建斌陈宗祐
- 关键词：慢病毒CD80CD86RNA干扰树突状细胞
