广东省科技攻关计划(2003B30902)
- 作品数：2 被引量：20H指数：2
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- 相关机构：广东省微生物研究所更多>>
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- 相关领域：生物学更多>>
- 生物发光法微生物快速检测试剂的性质及其影响因素研究被引量：13
- 2006年
- 研究了ATP生物发光微生物快速检测试剂的反应动力学、反应最适温度、pH以及各种影响因素。在ATP生物发光反应中,测试系统中D-荧光素用量为40～50μg／mL时对反应已经足够;发光脉冲计数CPM值随反应时间的延长不断降低,开始的1min内,其CPM值下降最快,然后下降速度不断减缓;反应的最适温度为24℃-25℃;而体系的最佳pH为7．2—7．4。配制好的发光试剂溶液置于4℃保存45h,可以保持86％的活力,在25℃时保温1h,活力下降较少,随时间的增加,活力逐渐下降,到6．5h时,仅剩53．5％的活力,而在33℃时,随着保温时间的延长,酶活力下降较快,保温1．5h,活力剩下59．1％,因此保存温度对发光试剂活力的影响非常大。各种化学物质如酸、碱、盐及表面活性剂都会抑制ATP发光反应,当NaCl浓度达到1．5g／L时,即可以抑制52．5％的发光,TritonX- 100及酸、碱对系统均有一定的影响,CTAB、SDS及TCA则严重抑制发光反应。
- 张菊梅吴清平李程思吴慧清
- 关键词：生物发光微生物快速检测试剂影响因素
- 微生物细胞ATP释放条件研究被引量：7
- 2006年
- 在ATP生物发光法微生物细胞ATP释放剂的筛选研究中，发现采用环糊精等环状化合物可以解除表面活性剂类细胞ATP释放剂对发光反应系统的抑制作用，其中，7．5g／L环糊精CD（a）能中和1．5g／L的表面活性剂Ec和Es、Et，可以完全排除Ec、Es、Et对发光反应的抑制作用。通过比较各种细胞ATP释放剂释放ATP效果，筛选、组合出以表面活性剂Ec为代表的微生物细胞ATP释放剂；通过优化实验，发现用0．25～0．50g／L的Ec处理菌液1～2min时，细胞ATP的释放效果最好，从而建立了室温条件下简便、快速的微生物细胞ATP释放方法和ATP释放剂对发光反应系统抑制的消除方法。
- 张菊梅吴清平吴慧清郭伟鹏李程思
- 关键词：微生物生物发光
