深圳市科技计划项目([2005]209-18)
- 作品数:1 被引量:2H指数:1
- 相关作者:徐伟锋朱惠明王娜蔡筱彦宋洋更多>>
- 相关机构:暨南大学附属第二医院更多>>
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- 相关领域:医药卫生更多>>
- 腺病毒载体携带凋亡素基因对人胃癌细胞的致凋亡作用被引量:2
- 2008年
- 目的探讨带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记的重组腺病毒载体介导的凋亡素(VP3)基因对人胃癌细胞的致凋亡作用。方法在HEK293细胞中包装Ad-EGFP-VP3和Ad-EGFP两种腺病毒,大量扩增,并测定两种腺病毒滴度。以MOI=20感染人胃癌细胞,12,24,48h后在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达;用Hoechst33258试剂盒染色,观察凋亡形态学改变。24h后用RT-PCR检测VP3基因的表达。6,12,24,48,72h后用FCM检测胃癌细胞的凋亡率。结果Ad-EGFP-VP3滴度为2.4×108pfu/ml,Ad-EGFP滴度为2.1×108pfu/ml。Hoechst33528染色显示Ad-EGFP-VP3感染的胃癌细胞出现凋亡形态学改变。RT-PCR检测仅有Ad-EGFP-VP3感染的胃癌细胞表达VP3基因的mRNA。FCM检测Ad-EGFP-VP3感染人胃癌细胞12h后凋亡率达51.7%。结论带有EGFP标记的重组腺病毒载体介导VP3基因导入胃癌细胞后,能有效诱导胃癌细胞凋亡。
- 徐伟锋朱惠明宋洋王娜蔡筱彦王立生
- 关键词:凋亡素基因腺病毒胃癌细胞