重庆市卫生局科研项目(04-2-143)
- 作品数：5 被引量：28H指数：4
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- 相关机构：重庆医科大学附属第一医院重庆医科大学更多>>
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- 成体神经干细胞和微环境被引量：4
- 2006年
- 杨琴谢鹏
- 关键词：成体神经干细胞微环境自我更新能力NSCS分化能力长期存活
- 新生大鼠神经干细胞的体外培养和鉴定被引量：4
- 2007年
- 目的:探讨新生大鼠神经干细胞的分离培养和鉴定。方法:采用无血清细胞培养技术,间接免疫细胞化学染色法。结果:新生大鼠脑组织分离的细胞具有连续传代和增殖能力,表达神经上皮干细胞蛋白,诱导分化后的细胞表达神经元细胞、星形胶质细胞、少突胶质细胞特异性蛋白。结论:该方法分离培养的神经干细胞保持了干细胞的未分化属性,具有自我更新和多项分化潜能。
- 杨琴曾志磊谢鹏杨军吕发金
- 关键词：神经干细胞细胞培养新生大鼠
- 刺五加体外诱导骨髓基质细胞分化为神经元样细胞的实验研究被引量：6
- 2009年
- 目的研究刺五加体外诱导骨髓基质细胞(MSCs)分化为神经元样细胞。方法采用全骨髓贴壁筛选法分离培养MSCs。含刺五加的无血清DMEM/F12诱导MSCs的分化。间接免疫荧光法、Western blot及RT-PCR检测巢蛋白(nestin)、β-Tubulin III及GFAP蛋白和mRNA的表达。结果MSCs在体外传代扩增至第3代,CD44、CD54表达阳性已达90%以上,而CD14表达阳性下降至2.37%。刺五加诱导后,MSCs胞体收缩,突起伸出,类似神经元;免疫荧光、Western blot及RT-PCR均显示刺五加诱导后的细胞nestin、β-Tubulin III蛋白和mRNA表达阳性,而GFAP表达阴性。结论刺五加可以在体外诱导MSCs分化为神经元样细胞。
- 杨琴杨军谢鹏曾志磊李傲张小东李咏梅吕发金
- 关键词：骨髓基质细胞神经元刺五加细胞分化
- 体外培养大鼠骨髓基质细胞生物学特性研究被引量：11
- 2007年
- 目的:观察体外培养大鼠骨髓基质细胞生物学特性,为诱导骨髓基质细胞分化形成神经元及分化机制和移植治疗脑缺血大鼠的研究奠定基础。方法:取4周龄Wistar大鼠,全骨髓法体外培养骨髓基质细胞,利用倒置相差显微镜观察原代及不同传代细胞生长形态特点,并应用间接免疫荧光法鉴定原代及不同传代细胞表型。结果:培养的骨髓基质细胞第3代,细胞增殖能力已趋于稳定,骨髓基质细胞表面标志CD54、CD44阳性的细胞已占到95.18%、94.36%。造血干细胞表面标志CD14阳性的细胞已从原代的23.19%降低到2.37%。结论:传3代的细胞已适合于细胞诱导分化,可作为理想细胞移植治疗的细胞来源。
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- 关键词：WISTAR大鼠骨髓基质细胞细胞培养
- 刺五加注射液体外诱导骨髓基质细胞分化为神经元样细胞的机制研究被引量：7
- 2008年
- 目的:研究核因子-κB(NF-κB)在刺五加诱导骨髓基质细胞(MSCs)分化为神经元样细胞中的作用。方法:试验分对照组和刺五加诱导组。采用倒置显微镜观察细胞形态;免疫荧光检测MSCs表型、诱导后神经细胞标记蛋白表达和NF-κB亚基p65核移位情况;Western blot法检测诱导组、对照组IκBα的表达。结果:刺五加诱导1 h,可见部分细胞体积缩小,立体感增强,胞体收缩成锥形或球形;诱导5 h,较多细胞成三角形或球形,细胞微丝收缩,伪足形成细长突起,局部交织成网,部分细胞脱落、死亡。诱导7 d,多数细胞成锥形、三角形、球形,交织成网,形成较典型的神经元样细胞。对照组5 h时细胞无明显形态变化,7 d时偶见锥形细胞。免疫荧光检测到诱导组诱导1 h时nestin表达即为强阳性,到第7天仍为阳性,而β-ⅢTubulin在第1小时为弱阳性,3,5 h则为强阳性,并持续到7 d仍为阳性。神经细胞特异性烯醇化酶(NSE)在第3小时为弱阳性,第5,7天则为强阳性,未见胶质细胞标记蛋白GAFP的表达;对照组各标记蛋白表达均为阴性或可疑或弱阳性。对照组出现p65由胞浆向胞核移位,而诱导组p65信号主要仍在胞浆中表达。Western blot发现诱导前IκBα蛋白相对IA为1.0,诱导后刺五加组IκBα蛋白相对IA为0.455 6±0.100 8,较诱导前明显下降(P<0.01)。诱导后对照组IκBα蛋白相对IA为0.029 6±0.009 9,较诱导前及诱导组明显下降(P<0.01)。结论:刺五加可诱导MSCs分化为神经元样细胞。在此过程中,刺五加可以抑制NF-κB的活化。
- 杨琴谢鹏曾志磊李傲杨军李咏梅
- 关键词：骨髓基质细胞刺五加注射液核因子-ΚB分化神经元
