国家自然科学基金(30772150)
- 作品数：7 被引量：8H指数：2
- 相关作者：范慧敏刘中民牛永胜唐光亮刘刚更多>>
- 相关机构：同济大学附属东方医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市卫生系统百名跨世纪优秀学科带头人培养计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肺移植后闭塞性细支气管炎综合征的防治策略
- 2009年
- 单纯肺移植和心肺联合移植是临床上治疗某些终末期心肺疾病的重要手段，近20年来，由于外科手术的进步和新的免疫抑制剂的不断推出，肺移植及心肺联合移植患者术后早期的存活率明显提高，然而患者的长期存活仍受到闭塞性细支气管炎综合征（BOS）等慢性并发症的影响。肺移植术后2．5年内，BOS的发生率为27％，移植后5．6年内，BOS的发生率为51％，发生BOS者的存活率仅为30％～40％，比未发生BOS者约低20％～40％。本文结合近年来BOS发病机制的研究成果，对BOS的防治新策略作一综述。
- 牛永胜范慧敏刘中民
- 关键词：闭塞性细支气管炎心肺疾病移植后心肺联合移植BOS免疫抑制剂
- 慢病毒介导shRNA特异性沉默TLR4基因对大鼠肺泡巨噬细胞功能的影响
- 2010年
- 目的构建表达大鼠TLR4 shRNA的慢病毒,并观察其对大鼠肺泡巨噬细胞TLR4的抑制作用和对内毒素(LPS)诱导的IL-6、IL-1β释放的影响。方法设计并构建4个可能具有干扰效力的shRNA表达质粒,将他们分别与预先构建好的TLR4表达质粒共转染HEK-293T细胞,筛选出一段干扰效果最好的shRNA,使用Gateway的方法重组到慢病毒表达载体中并进行病毒包装和滴度测定,使用包装好的慢病毒感染大鼠肺泡巨噬细胞系NR8383并加入LPS刺激,ELISA检测IL-1β、IL-6的释放情况。结果成功筛选出具有较高干扰效率的shRNA,并成功包装入慢病毒,慢病毒滴度为2.0×106TU/ml。转染慢病毒后的LPS诱导的肺泡巨噬细胞IL-1β、IL-6的释放均明显减少(P<0.05)。结论成功构建了表达大鼠TLR4 shRNA的慢病毒,具有良好的抑制IL-1β、IL-6表达的作用,为下一步动物体内实验基因治疗大鼠肺移植后的慢性排斥反应奠定良好的基础。
- 刘建范慧敏刘中民
- 关键词：TOLL样受体4慢病毒白细胞介素1Β
- 慢病毒介导siRNA干扰MyD88表达对大鼠肺泡巨噬细胞功能的影响被引量：3
- 2010年
- 目的采用RNA干扰技术，通过构建表达大鼠髓样分化因子88（MyD88）siRNA慢病毒干扰大鼠肺泡巨噬细胞MyD88g／表达，检测其对细胞功能的影响。方法针对MyD88基因，设计并构建3对siRNA表达质粒，分别与预先构建好表达MyD88N质粒共转染HEK-293T细胞，Westernblot检测MyD88的表达情况，筛选出其中1对干扰效率最高的siRNA，用Gateways方法构建慢病毒干扰载体包装成慢病毒，将慢病毒转染大鼠肺泡巨噬细胞系NR8383胞并加入内毒素（LPS）诱导，未转染慢病毒的细胞作为空白对照组和LPS激活组：空白对照组加入与LPS等体积的PBS；LPS激活组加入LPS刺激。ELISA测定各组细胞因子（IL-18、IL-6）释放情况。结果成功筛选出了1对干扰效率最高的siRNA并包装成慢病毒，病毒滴度为2．0×10^6TU／ml。LPS诱导后，与对照组相比．感染慢病毒的NR8383细胞MyD88表达明显受到抑制，IL-1β、IL-6的释放均显著减少，差异有统计学意义。结论慢病毒介导RNA干扰能够有效抑制NR8383细胞MyD88基因的表达，显著减少胞因子的释放，为以抗原提呈细胞（APC）为靶向的体内实验治疗大鼠肺移植相关闭塞性细支气管炎（obliterative bronchitis，OB）的研究提供了手段。
- 唐光亮范慧敏刘中民
- 关键词：MYD88大鼠肺泡巨噬细胞RNAI慢病毒
- CD28超抗体对大鼠闭塞性气管病的治疗作用
- 2009年
- 目的:研究CD28超抗体对在体扩增调节性T细胞的效果及对大鼠闭塞性气管病的影响。方法:采用大鼠同种异体异位气管移植模型。治疗组受体移植当天经腹腔注射CD28特异性单克隆超抗体JJ316(0.5 mg);对照组注射同型抗体mIgG(0.5 mg)。于术后第7天采用流式细胞仪检测颈部淋巴结单个核细胞中CD4+CD25+T细胞和CD4+Foxp3+T细胞的比率;第21天取出移植气管进行病理形态学检查。结果:术后第7天CD28超抗体治疗组大鼠的颈部淋巴结中CD4+CD25+T细胞及CD4+Foxp3+T细胞的比率(8.5%±3.4%,11.5%±2.7%)均显著高于mIgG对照组(1.8%±1.9%,3.2%±2.1%)(P<0.05);第21天CD28超抗体治疗组较mIgG对照组气管闭塞及上皮损伤程度明显减轻。结论:CD28超抗体可靶向扩增调节性T细胞,减轻了大鼠闭塞性气管病的管腔闭塞。
- 牛永胜范慧敏曹浩刘刚史乾刘中民
- 关键词：气管移植调节性T细胞CD28
- 大鼠肺移植后闭塞性细支气管炎模型的改进被引量：1
- 2009年
- 肺移植已成为终末期肺疾病唯一有效的治疗方法，但是闭塞性细支气管炎（OB）却是肺移植后长期存活的主要障碍。目前用于OB研究的大鼠动物模型主要是采用同种异体气管腹腔大网膜包埋或皮下移植的方法。我们对原有动物模型的制作方法加以改进，采用大鼠同种异体气管原位移植，建立了一种更接近临床的OB实验模型。
- 牛永胜范慧敏韩俊毅刘刚刘中民
- 关键词：闭塞性细支气管炎大鼠动物模型移植后鼠肺同种异体
- 肺移植相关闭塞性细支气管炎的免疫进展被引量：2
- 2010年
- 闭塞性细支气管炎（obliterative bronchiolitis，081是肺移植或心肺移植后一种进行性细支气管闭塞．小气道功能紊乱和呼吸受阻。临床上称为闭塞性细支气管炎综合症（bronchiolitis obliterans syndrome．BOS），其发病机制较为复杂，包括免疫学和非免疫学因素及其他致病因素。病理学特点为近呼吸细支气管及其周围炎症和纤维增生，
- 唐光亮范慧敏
- 关键词：纤维化
- 肺移植后闭塞性细支气管炎综合征的危险因素与发病机制被引量：2
- 2009年
- 闭塞性细支气管炎综合征(bronchiolitis obliterans syndrome,BOS)是影响肺移植术后长期存活的最主要并发症,且加强免疫抑制和抗炎治疗效果不佳。肺移植后导致闭塞性细支气管炎综合征的机制涉及免疫和非免疫因素启动气道上皮、细胞外基质、新生血管及淋巴管系统的进行性损伤与异常增生重塑,形成恶性循环。其中内源性免疫是导致细支气管闭塞和发展为BOS的主要致病因素,但各种感染或化学损伤可能导致激活树突状细胞的危险信号释放,从而激发排斥反应。因此,降低非依赖同种异体免疫因素的风险与治疗免疫排斥同样重要。
- 牛永胜范慧敏刘中民
- 关键词：肺移植闭塞性细支气管炎慢性排斥适应性免疫天然免疫
