甘肃省农业生物技术专项(GNSW-2010-09)
- 作品数：11 被引量：97H指数：8
- 相关作者：逯忠新储岳峰贺英高鹏程赵萍更多>>
- 相关机构：中国农业科学院兰州兽医研究所石河子大学宁夏大学更多>>
- 发文基金：甘肃省科技支撑计划甘肃省农业生物技术专项国家科技基础性工作专项更多>>
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- 山羊支原体山羊肺炎亚种甘肃株的分离及鉴定被引量：20
- 2011年
- 2007年甘肃某地羊场山羊发生以呼吸困难、咳嗽和胸膜肺炎为特征的呼吸道传染病,经临床诊断为羊支原体性肺炎。用改良的Thiaucourt's培养基对病山羊的肺组织进行病原分离,成功分离到1株支原体M1601,经菌落形态观察、生化试验、PCR鉴定、以16S rRNA基因序列构建的分子进化树分析和动物致病性试验,证明该分离株属于山羊支原体山羊肺炎亚种。
- 郭晗储岳峰赵萍高鹏程贺英樊祜卿冯小明逯忠新
- 关键词：山羊支原体山羊肺炎亚种山羊传染性胸膜肺炎PCR鉴定RRNA
- 山羊支原体山羊肺炎亚种湖北株的鉴定及其外膜蛋白的免疫原性研究被引量：13
- 2011年
- 从湖北某地山羊肺脏中分离支原体,经多次克隆纯化后进行生化试验、显微镜观察、PCR及酶切分析、基因特征鉴定以及用动物致病性试验对该菌株进行了鉴定,命名为GH2,进一步通过免疫印迹对GH2株外膜蛋白及GH2株全菌蛋白免疫原性进行分析,并用抗Y98血清和抗PG3血清进行比较,筛选GH2株特异性的外膜蛋白,结果表明GH2株为山羊支原体山羊肺炎亚种,存在于GH2外膜蛋白中的相对分子质量大约为60和49.7ku的蛋白可能是其主要的免疫原性蛋白,也是GH2株区别于丝状支原体山羊亚种标准株PG3和绵羊肺炎支原体标准株的主要特异性抗原。这一结果为山羊支原体山羊肺炎亚种的诊断和疫苗研制提供了良好的理论基础。
- 赵萍郭晗贺英高鹏程张念章逯忠新
- 关键词：山羊支原体山羊肺炎亚种外膜蛋白免疫原性
- 我国17株绵羊肺炎支原体分子分型及其菌体蛋白免疫印迹被引量：10
- 2011年
- 【目的】分别从基因和蛋白水平研究我国部分地区绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae)分离株的分子特征,并了解其免疫原性蛋白的差异。【方法】对分离自8个地区的17株绵羊肺炎支原体进行扩增片段长度多态性(Amplified Fragment Length Polymorphism,AFLP)和十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(Sodium Dodecyl Sulphate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis,SDS-PAGE)分析,采用NTsys-2.10e软件对AFLP和SDS-PAGE结果进行聚类,并用绵羊肺炎支原体模式株Y98高免血清对部分分离株进行免疫印迹分析。【结果】当相似系数分别为0.78和0.85时,绵羊肺炎支原体分离株可根据8个来源地区分成8个AFLP群和8个SDS-PAGE群;用8株分离株进行免疫印迹共出现6条蛋白条带,分子质量分别为105 kDa、83 kDa、65 kDa、42 kDa、40 kDa或26 kDa,其中83 kDa和40 kDa蛋白为8个菌株保守的免疫原性蛋白。【结论】我国部分地区绵羊肺炎支原体分离株之间存在遗传差异,不同分离株的主要免疫原性蛋白也存在一定差异,但83 kDa和40 kDa蛋白为其保守的免疫原性蛋白。本研究首次对我国部分地区绵羊肺炎支原体分离株进行了分子分型与免疫印迹分析,结果将为绵羊肺炎支原体病的新型诊断技术开发和疫苗研制奠定理论基础。
- 许健储岳峰高鹏程赵萍贺英剡根强逯忠新
- 关键词：绵羊肺炎支原体AFLPSDS-PAGE免疫印迹
- 绵羊肺炎支原体的分离鉴定被引量：7
- 2013年
- 为明确甘肃某羊场发生的疑似绵羊肺炎支原体肺炎的病原,利用支原体培养基从一份患肺炎的绵羊肺脏病料中分离到一个菌落。通过菌落形态观察、生化试验和特异性PCR方法进行了鉴定。结果分离物在固体培养基上生长的菌落呈圆形无中心脐,能水解葡萄糖但不能水解精氨酸,不消化酪蛋白,PCR能扩增出绵羊肺炎支原体特异的大小为361bp的目的片段,测序比对表明该基因序列与绵羊肺炎支原体标准株Y98的同源性为98%。鉴定结果表明引起该养殖场发病的病原为绵羊肺炎支原体。
- 张轩赵萍贺英高鹏程储岳峰郑莹莹逯忠新
- 关键词：绵羊肺炎支原体聚合酶链反应
- 牛支原体生长曲线的测定和培养基筛选被引量：14
- 2012年
- 为筛选最适于牛支原体(Mycoplasma bovis)生长的培养基,利用活菌计数方法测定了牛支原体OF2株在改良Thiaucourt’s培养基、牛心汤培养基和改良KM2培养基中的生长曲线。结果发现,牛支原体在改良Thiaucourt’s培养基中生长30 h即可达到平台期,平均最高生长滴度7.0×109ccu/mL;在牛心汤培养基中生长40 h即可达到平台期,平均最高生长滴度4.0×109ccu/mL;在改良KM2培养基中生长50 h达到平台期,其平均最高生长滴度为7.0×108ccu/mL。结果表明,牛支原体在改良Thiaucourt’s培养基中生长快、滴度高,为下一步牛支原体灭活疫苗的研究提供了参考依据。
- 邵倩储岳峰何生虎逯忠新
- 关键词：培养基筛选
- 绵羊肺炎支原体GH3-3株在改良KM2培养基中的增殖情况被引量：5
- 2011年
- 绵羊肺炎支原体GH3-3MoGH3-3株是我国绵羊支原体肺炎灭活疫苗制苗菌株。为研究MoGH3-3株在改良KM2培养基中的生长及繁殖特性,利用活菌计数方法对其在不同培养阶段的生长滴度(颜色变化单位)进行测定,并绘制生长曲线。结果表明,传代稳定的MoGH3-3株在改良KM2培养基中培养12h开始进入对数生长期,培养72h进入稳定期,培养120h时进入衰亡期。本研究可为绵羊肺炎支原体培养特性研究和疫苗生产工艺研究提供参考数据。
- 许健储岳峰赵萍高鹏程贺英张莹剡根强逯忠新
- 关键词：绵羊肺炎支原体增殖
- 山羊传染性胸膜肺炎灭活疫苗(M1601株)的研制
- 用实验室试制的三批山羊传染性胸膜肺炎灭活疫苗(M1601株),分别从安全性、最小免疫剂量、免疫持续期、保存期等方面进行了研究,结果表明该疫苗对不同生理状况的山羊均安全,不论羔羊还是成年羊,最小免疫剂量均为3ml,免疫持续...
- 赵萍贺英储岳峰高鹏程张轩逯忠新
- 关键词：山羊传染性胸膜肺炎疫苗
- 文献传递
- 山羊支原体山羊肺炎亚种培养基的筛选及生长曲线测定被引量：4
- 2012年
- 为筛选出山羊支原体山羊肺炎亚种的适宜培养基,将山羊支原体山羊肺炎亚种分离株M1601分别接种Thiaucourt肉汤、MEM-KM2和TSA 3种不同的培养基,测定其在3种不同培养基中生长滴度、生长速度,并测定了M1601在最适培养基中在不同培养阶段的生长滴度。结果表明,添加2g/L丙酮酸钠和150mL/L马血清的Thiaucourt肉汤培养基最适宜山羊支原体山羊肺炎亚种的生长,生长滴度可达109 CCU/mL,在培养6h后开始进入对数生长期,培养60h后进入稳定期,培养72h时后进入衰亡期。此试验结果为山羊支原体山羊肺炎亚种培养特性研究提供了参考数据。
- 高珊逯忠新许立华
- 关键词：山羊支原体山羊肺炎亚种培养基
- 绵羊肺炎支原体免疫蛋白质组学的初步研究被引量：10
- 2012年
- 利用双向电泳及免疫印迹方法对绵羊肺炎支原体MoGH3-3分离株的抗原蛋白进行筛选,并采用基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱对其进行初步鉴定。结果,共筛选到MoGH3-3株3个主要抗原蛋白点,其中2个被鉴定为延伸因子(elongation factor Tu,EF-Tu),1个为丙酮酸脱氢酶E1-a亚单位(pyruvate dehydrogenase E1-alpha subunit,PDHA)。结果表明,EF-Tu及PDHA是绵羊肺炎支原体主要的抗原蛋白,这为下一步绵羊支原体肺炎基因工程疫苗的研制提供了靶标。
- 许健储岳峰高鹏程赵萍贺英剡根强逯忠新
- 关键词：绵羊肺炎支原体免疫印迹蛋白质组学
- 家畜重要支原体病疫苗的研究进展被引量：10
- 2011年
- 综述了山羊传染性胸膜肺炎、传染性无乳症、猪支原体肺炎、牛传染性胸膜肺炎和牛支原体病等几种重要的家畜支原体疾病疫苗的优点、缺点、研究进展以及应用情况,展望了利用基因工程技术开发有关新型疫苗的前景,旨在为研制新型家畜支原体疾病疫苗、减少其对家畜养殖带来的损失提供思路。
- 张轩储岳峰逯忠新
- 关键词：家畜支原体病疫苗
