河北省自然科学基金(C2007000828) 作品数:6 被引量:36 H指数:4 相关作者: 唐丽娟 刘淑霞 刘青娟 郭惠芳 陈宁 更多>> 相关机构: 河北医科大学 河北医科大学第二医院 更多>> 发文基金: 河北省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
高迁移率族蛋白及其TOLL样受体4在系统性红斑狼疮肾脏损害中的作用 被引量:13 2008年 目的:探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)及其受体TOLL样受体(TLR)-4在系统性红斑狼疮肾脏损害中的作用。方法:ELISA检测12例健康对照组、16例系统性红斑狼疮无肾脏损害(Systemic lupus erythematosus,SLE)和18例合并肾脏损害的系统性红斑狼疮患者(Lupus nephritis,LN)血清中HMGB1表达情况;流式细胞术检测外周血CD3/TLR-4和CD14/TLR-4表达情况;分离外周血单个核细胞,RT-PCR检测HMGB1mRNA的表达变化。结果:血清中HMGB1蛋白在LN组明显高于SLE组和健康对照组,而SLE组和健康对照组之间差异无统计学意义;LN组患者HMGB1mRNA相对表达量均高于对照组和SLE组患者;流式细胞术显示CD14+的单核细胞表面HMGB1受体TLR4在LN组表达最高(P<0.05),且与尿蛋白呈正相关(P<0.01),而CD3+的淋巴细胞表面HMGB1受体TLR4表达率在各组间无显著性差异(P>0.05)。结论:狼疮性肾炎患者PBMC能主动合成、分泌HMGB1,使患者血清中表达水平明显升高;HMGB1可能部分通过TLR4激活PBMC,介导炎症反应,从而引起肾脏损害。 刘淑霞 郭惠芳 张玉军 刘青娟 唐丽娟 段惠军关键词:系统性红斑狼疮 狼疮性肾炎 高迁移率族蛋白 TOLL样受体4 HMGB1/TLR/NF-κB在狼疮性肾炎小鼠肾组织中的表达及意义 被引量:12 2009年 目的:探讨HMGB1/TLR/NF-κB在狼疮性肾炎小鼠肾组织中的表达及作用机制。方法:选取16周龄的雄性BXSB小鼠(狼疮性肾炎模型)和同周龄C57BL/6小鼠(正常对照)作为研究对象,透射电镜观察肾组织的超微结构改变;RT-PCR检测肾皮质中HMGB1 mRNA的表达变化;免疫组织化学和流式细胞术检测肾组织中HMGB1、NF-κB、TLR2和PCNA蛋白的表达变化。结果:(1)16周时,BXSB小鼠血清中BUN水平明显升高;(2)16周时,与正常的C57BL/6小鼠相比,BXSB基底膜明显增厚,部分足突融合,内皮细胞下可见团块状电子致密物沉积;(3)狼疮性肾炎模型组小鼠肾组织的肾小球中可见较多的PCNA阳性表达,肾小管上皮细胞核内也可见少量的表达;(4)与对照组相比,BXSB小鼠肾组织中HMGB1mRNA及蛋白表达升高,HMGB1蛋白尤其在细胞增生明显而肥大的肾小球呈高表达,主要位于细胞浆和细胞外;而在C57BL/6小鼠肾脏组织中以小管细胞核表达为主;(5)狼疮性肾炎模型组小鼠肾组织p-NF-κB和TLR2蛋白表达明显升高;(6)HMGB1蛋白与p-NF-κB蛋白表达呈显著正相关(r=0.833,P=0.000);p-NF-κB蛋白与TLR2蛋白表达呈显著正相关(r=0.765,P=0.001)。结论:(1)HMGB1能促进肾小球固有细胞的增生,导致增生性肾小球肾炎形成;(2)HMGB1在小鼠狼疮性肾炎中的致炎作用可能部分通过结合其受体TLR2,激活NF-κB信号途径而实现的。 刘淑霞 郝军 郭惠芳 陈宁 刘青娟 唐丽娟 吴海江 段惠军关键词:狼疮性肾炎 HMGB1 NF-ΚB 细胞增殖 TLR4介导高迁移率族蛋白致系统性红斑狼疮肾损害的作用研究 被引量:3 2008年 目的探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)致红斑性狼疮肾损害的作用机制与Toll样受体4(Toll-like receptor4,TLR4)表达的相关性。方法ELISA检测12例健康对照组、16例系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)无肾脏损害和18例狼疮性肾炎(lupus nephritis,LN)患者血清中HMGB1、基质金属蛋白酶。2(MMP-2)和基质金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)的表达情况;流式细胞术检测外周血CD3/TLR4和CD14/TLR4表达情况;分离外周血单个核细胞(PBMC),RT-PCR检测HMGB1 mRNA的表达变化。结果HMGB1 mRNA相对表达量及血清中HMGB1蛋白在LN组明显高于SLE组和健康对照组;流式细胞术显示CD14^+的单核细胞表面HMGB1受体TLR4在LN组表达最高(P〈0.05),且与尿蛋白呈正相关(P〈0.01);LN患者血清中MMP-2和TIMP-2蛋白的浓度明显低于SLE和健康对照组,同时MMP-2/TIMP-2比值下降。HMGB1 mRNA及CD14^+/TLR4^+与MMP-2/TIMP-2比值均呈显著负相关;LN组患者血清中HMGB1蛋白水平与蛋白尿呈正相关,与MMP-2/TIMP-2比值呈显著负相关。结论HMGB1是狼疮性。肾炎发病中的重要细胞因子;HMGB1可能部分通过TLR4激活PBMC,降低MMP-2/TIMP-2的活性,从而引起蛋白尿。 刘淑霞 郝军 郭惠芳 张玉军 刘青娟 唐丽娟 陈宁 吴海江 段惠军关键词:高迁移率族蛋白1 TLR/STAT通路在HMGB1诱导的系膜细胞增殖中的作用 被引量:6 2009年 目的:探讨TLR/STAT通路在HMGB1诱导的系膜细胞增殖中的作用。方法:将体外培养的人系膜细胞分为正常对照组和HMGB1刺激组,培养6、12和24小时后收集细胞,免疫细胞化学检测PCNA表达的变化;免疫细胞化学和流式细胞术检测TLR2蛋白表达的变化;PCR技术检测STAT1/STAT3mRNA表达的变化。结果:人重组HMGB1刺激系膜细胞后,能够促使其增殖;与正常对照组相比,HMGB1刺激组中TLR2蛋白表达增强;与正常对照组相比,HMGB1刺激组中STAT1和STAT3mRNA表达增强;TLR2蛋白与STAT1、STAT3mRNA表达均呈显著正相关(r=0.830,P<0.001;r=0.926,P<0.001);PC-NA阳性表达率与STAT1、STAT3mRNA表达亦呈显著正相关(r=0.817,P<0.001;r=0.863,P<0.001)。结论:HMGB1可能通过与其受体蛋白TLR2结合,进而激活STAT1/STAT3,促进系膜细胞增生,从而导致肾脏损害。 唐丽娟 郝军 陈宁 郭惠芳 刘青娟 刘淑霞关键词:高迁移率族蛋白1 STAT1 系膜细胞 细胞增殖 NF-κB信号途径在小鼠狼疮性肾炎发病中的可能作用 被引量:8 2010年 目的:探讨NF-κB信号途径在小鼠狼疮性肾炎发病中的可能作用。方法:选取16周龄的雄性BXSB小鼠(狼疮性肾炎模型组)和同周龄C57BL/6小鼠(正常对照组)作为研究对象,透射电镜和PAS染色观察肾组织的超微结构形态改变;RT-PCR技术检测小鼠全血中HMGB1mRNA的表达变化。采用ELISA方法检测血清中HMGB1蛋白浓度;免疫组织化学检测肾组织中HMGB1和PCNA蛋白的表达变化;Western blot和流式细胞术检测肾组织中RAGE、p-NF-κB和IκB蛋白的表达。结果:16周时,与正常的C57BL/6小鼠相比,BXSB小鼠血清中BUN水平及尿中微球白蛋白水平明显升高;与正常的C57BL/6小鼠相比,BXSB小鼠全血中HMGB1mRNA水平和血清中HMGB1蛋白浓度明显升高;16周时,与正常的C57BL/6小鼠相比,BXSB基底膜明显增厚,部分足突融合,内皮细胞下可见团块状电子致密物沉积;与正常的C57BL/6小鼠相比,BXSB小鼠肾组织的肾小球中可见较多的PCNA阳性表达,肾小管上皮细胞核内也可见少量的表达;BXSB小鼠肾组织中HMGB1蛋白表达升高,HMGB1蛋白尤其在细胞增生明显而肥大的肾小球呈高表达,主要位于细胞浆和细胞外;而在C57BL/6小鼠肾脏组织中以小管细胞核表达为主;与对照组相比,BXSB小鼠肾组织p-NF-κB和RAGE蛋白表达明显升高;而IκB蛋白表达明显降低;HMGB1蛋白与p-NF-κB蛋白表达呈显著正相关(r=0.833,P=0.000);p-NF-κB蛋白与RAGE蛋白表达呈显著正相关(r=0.621,P=0.018);HMGB1蛋白与RAGE蛋白表达呈显著正相关(r=0.848,P=0.000);p-NF-κB蛋白与IκB蛋白表达呈显著负相关(r=-0.759,P=0.002)。结论:HMGB1在小鼠狼疮性肾炎中的致炎作用可能部分通过结合其受体RAGE,激活NF-κB信号途径,促进肾小球固有细胞的增生,从而导致增生性肾小球肾炎形成而实现的。 封晓娟 刘淑霞 张玉军 郭惠芳 郝军 陈宁 唐丽娟 刘青娟 吴海江关键词:狼疮性肾炎 HMGB1 RAGE NF-ΚB IΚB HMGB1在系统性红斑狼疮肾损害中的作用 被引量:3 2009年 目的研究高迁移率族蛋白1(hjgh mobility group protein box1,HMGB1)在系统性红斑狼疮肾损害中的作用。方法ELISA检测12例健康对照、16例系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)无肾脏损害和14例合并肾脏损害的系统性红斑狼疮患者(lupus nephritis,LN)血清中HMGB1的表达情况。将体外培养的人系膜细胞分为正常对照组和HMGB1刺激组,于培养6、12、24h后收集细胞,免疫细胞化学检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表达变化;免疫细胞化学和流式细胞术检测Toll样受体2(TLR2)、NF—κB p65蛋白的表达变化。结果血清中HMGB1蛋白在LN组明显高于SLE组和健康对照组,且血清中HMGB1水平与LN患者的蛋白尿呈显著正相关;人重组HMGB1能够促进系膜细胞增殖;与正常对照组相比,HMGB1刺激组中TLR2、NF—κBp65蛋白表达增强;TLR2蛋白与NF-κBp65蛋白表达呈显著正相关(r=0.658,P=0.000);NF—κBp65蛋白表达与PCNA阳性表达率呈显著正相关(r=0.536,P=0.007)。结论HMGB1是狼疮性肾炎发病中的重要的细胞因子之一,可能部分通过与其受体蛋白TLR2结合激活NF—κB促进系膜细胞增生,从而引起肾脏损害。 陈宁 刘淑霞 唐丽娟 张玉军 刘青娟 郝军 封晓娟关键词:高迁移率族蛋白1 TOLL样受体2 核转录因子-ΚB 细胞增生