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胎鼠皮质神经元细胞核的制备和鉴定被引量：1: 2008年; 目的建立制备皮质神经元细胞核的方法，以便用于核移植研究。方法（1）采用胎龄17d的胎鼠进行皮质神经元的分离培养，用抗MAP2和NeuN免疫细胞化学法进行鉴定；（2）用梯度离心法制备神经元细胞核，并用HE染色、免疫荧光染色、透射电镜检查等方法进行鉴定，用台盼蓝染色检测其活性。结果（1）胎鼠皮质神经元呈多角形，伸出多个突起，MAP2染色显示神经元细胞浆和突起呈免疫反应阳性，NeuN染色显示神经元细胞核呈免疫反应阳性，部分核周胞质和部分近端突起也呈免疫反应阳性，MAP2和NeuN阳性细胞比例均在90％左右；（2）HE染色和Hoechst33342免疫荧光染色显示神经元梯度离心后在22％～30％Ficoll400梯度层可见到大量圆点状细胞核，台盼蓝染色显示活细胞核比例为99．6％；在22％～30％Ficoll400梯度层细胞透射电镜标本中可观察到圆形的细胞核，在细胞核的周围仅见到一层薄薄的胞浆成分。结论梯度离心法是制备皮质神经元细胞核的可靠方法。; 周竹娟郑健徐炎; 关键词：神经元细胞核核移植

梯度离心法制备骨髓间充质干细胞胞质体及其鉴定: 2008年; 目的建立制备骨髓间充质干细胞胞质体的方法，以用于体细胞核移植研究。方法（1）培养骨髓间充质十细胞，用流式细胞仪检测骨髓间充质干细胞表面标志物CD44、CD90、CD71、CD11b；（2）用梯度离心法制备骨髓间充质干细胞胞质体，并用HE染色、Giemsa染色、荧光双标染色、透射电镜检查等方法进行鉴定，用台盼蓝染色检测其活性。结果（1）骨髓间充质干细胞呈长梭形、漩涡状生长，骨髓间充质干细胞表面标志物CD44、CD90、CD71表达阳性，CD11b表达阴性；（2）HE染色、Giemsa染色、荧光双标染色和透射电镜检查显示骨髓间充质干细胞经梯度离心后在15％－18％Ficoll400梯度层可收集到大量胞质体，胞质体可快速贴壁，表达CD71，与完整骨髓间充质干细胞相似，体积与完整细胞相比差别不大。有活性的胞质体比例达99．5％。结论用梯度离心法可有效获得骨髓间充质干细胞胞质体。; 周竹娟郑健徐炎; 关键词：骨髓间充质干细胞梯度离心法

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重庆市科技计划项目(7452)