国家自然科学基金(30260029)
- 作品数:17 被引量:71H指数:5
- 相关作者:黄瑾于娜杨磊唐娟罗星更多>>
- 相关机构:石河子大学复旦大学新疆医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金兵团博士基金新疆生产建设兵团博士基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- neuritin基因杆状病毒表达载体的构建
- 2006年
- 为研究Neuritin蛋白的功能,将neuritinORF在杆状病毒-昆虫表达系统中表达,构建杆状病毒表达载体。以308D10为模板,利用PCR方法扩增neuritinORF,定向克隆法将其克隆至PFASTBAC-HTA转移载体中。然后利用同源重组原理将其转移至杆粒bacmid中。得到携带neuritin ORF的重组杆粒。本实验获得了重组目的基因真核表达载体并经PCR鉴定,插入片段方向、大小正确,DNA测序分析表明插入处接头和读框与预期序列相符,成功构建了Neuritin的杆状病毒表达载体。
- 黄延红唐娟张树军高剑锋杨磊黄瑾
- 关键词:NEURITIN
- 原核表达的Neuritin蛋白对PC12细胞突起生长的影响被引量:2
- 2016年
- 目的纯化原核表达的Neuritin蛋白,通过观察其对PC12细胞和研究其神经生物学功能。方法采用镍离子金属螯合亲和层析法纯化Neuritin蛋白,Bradford法对纯化的Neuritin蛋白进行定量,然后加入到PC12细胞,通过观察PC12细胞突起的生长情况和细胞形态的变化,研究其促进细胞突起生长的功能。结果纯化后的Neuritin蛋白经SDS-PAGE电泳显示,获得唯一蛋白条带,即Neuritin蛋白;Bradford定量法计算出其浓度为0.45 mg/ml,纯化的Neuritin蛋白加入到PC12细胞培养液中,PC12细胞长出突起,发生类神经元样改变。结论原核表达的Neuritin蛋白得到有效纯化及复性,纯化的Neuritin蛋白能促进神经突起生长,考虑Neuritin促进突触发生和调节突触可塑性等方面具有重要作用,为实验室进一步功能研究打下了一定的基础,同时作为新的神经营养因子在治疗神经疾病及其损伤中具有良好的应用前景。
- 唐娟冯丽娜李晓军于娜王宏黄瑾
- 关键词:原核表达蛋白纯化NEURITINPC12细胞
- 人Neuritin在原核表达系统的构建及表达纯化被引量:10
- 2006年
- Neuritin是一种新发现能促进神经突起和轴突分支的蛋白,为了更清楚的研究它的生物学功能,在已克隆Neuritin cDNA的基础上,PCR扩增出Neuritin ORF,与原核表达载体pET32a重组后,成功的构建了Neuritin原核表达质粒pET32a-Neuritin。重组质粒转化B121大肠杆菌,IPTG 诱导后,表达产物用SDS-PAGE和Western blot证实系Neuritin,用镍离子亲和层析的方法获得了纯化的Neuritin蛋白。
- 唐娟于娜吴亮生杨磊仙玲玲黄延红张树军黄瑾
- 人Neuritin真核表达载体的构建及其在细胞中的定位被引量:2
- 2011年
- 目的获得人突触生长素Neuritin基因并构建pEGFP-C1-neuritin真核表达载体,观察Neuritin在人AD293细胞中的定位。方法利用PCR获得Neuritin基因,然后克隆到pEGFP-C1载体中,利用脂质体将构建的表达载体转染AD293细胞,荧光观察融合蛋白的表达。结果从人类cDNA文库中得到Neuritin的完整开放阅读框序列,将其重组到pEGFP-C1载体中并转染AD293细胞,荧光显示Neuritin蛋白定位在细胞浆中。结论成功构建Neuritin真核表达载体并在人AD293细胞表达,证明Neuritin蛋白定位于细胞浆,为进一步研究Neuritin与其他蛋白的相互作,探讨Neuritin功能及作用机制奠定理论基础。
- 罗星徐坚黄瑾
- 关键词:NEURITIN细胞定位
- 神经营养因子用于治疗中枢神经系统疾病被引量:12
- 2005年
- 张峪涵杨磊黄瑾
- 关键词:神经营养因子中枢神经系统疾病
- 狗枣猕猴桃根对小鼠抗氧化作用被引量:9
- 2008年
- 目的观察狗枣猕猴桃根提取物对小鼠抗脂质过氧化及延缓衰老的作用。方法昆明种小鼠36只随机分为对照组、衰老模型组和实验组。衰老模型组饮用D-半乳糖,实验组除饮用D-半乳糖外,每日定时灌服狗枣猕猴桃根提取物。50 d后,分别检测各组红细胞超氧化物歧化酶(SOD)的活性、肝总抗氧化能力、血浆和肝丙二醛(MDA)的水平。结果与衰老模型组比较,实验组小鼠的红细胞SOD及肝总抗氧化能力显著增高,血浆和肝脏MDA降低。结论狗枣猕猴桃根具有增强组织清除白由基功能及延缓衰老的作用。
- 黄瑾郑玉建王维山包晓玲
- 关键词:超氧化物岐化酶总抗氧化能力
- 构建人类neuritin真核表达系统被引量:3
- 2005年
- 目的:构建人类neuritin基因真核表达载体,并观察其转染的PC12细胞中neuritin的表达。方法:用基因重组技术,将人类NeuritincDNA的开放阅读框克隆到真核表达载体pcDNA4.0中,经酶切鉴定及测序分析、并以脂质体介导转染PC12细胞,了解其在细胞内的表达。结果:酶切鉴定及测序分析,表明重组pcDNA4.0-neuritin表达质粒克隆成功,neuritin基因在PC12细胞中获得表达。结论:以脂质体介导pcDNA4.0-neuritin质粒转染真核细胞,为基因治疗神经系统退行性病变奠定实验基础。
- 张峪涵罗星黄瑾于娜黄延红唐娟仙玲玲杨磊
- 关键词:NEURITINPC12细胞转染
- neuritin的研究进展
- 2006年
- neuritin又名cpg15,是一条与神经可塑性密切相关的基因,其表达产物能够促进神经突起的快速生长及分支、突触的发生和成熟,并可调节突触回路的形成。研究表明neuritin在脑、肝、心、肺、骨骼肌等多个组织器官都有表达,并可能涉及肿瘤的发生。
- 徐芬黄瑾
- 关键词:神经元可塑性肿瘤NEURITIN
- 中枢神经再生抑制因子-Nogo的研究被引量:5
- 2006年
- 唐娟黄瑾吴亮生
- 关键词:中枢神经再生抑制蛋白少突胶质细胞NOGO生物学作用
- 神经营养因子的研究进展被引量:5
- 2006年
- 越来越多的神经营养因子被发现和鉴定,它们在神经细胞的发育、分化和再生过程中发挥了不可替代的作用。文章就神经营养因子在中枢神经系统中的生物学作用、信号转导机制和作用模式做了综述。
- 唐娟吴亮生黄瑾
- 关键词:神经营养因子中枢神经系统