江苏省“333工程”培养资金资助项目(BRA2011046)
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 相关作者：石磊王之敏万意王存祖李晓良更多>>
- 相关机构：江苏大学附属昆山医院上海交通大学江苏省苏北人民医院更多>>
- 发文基金：江苏省“333工程”培养资金资助项目国家自然科学基金苏州市科技发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- miR-21抑制替莫唑胺诱导U87细胞凋亡的体外实验研究被引量：1
- 2012年
- 目的探讨miR-21过表达在替莫唑胺诱导胶质瘤U87细胞凋亡中的作用及其机制。方法miR-21过表达载体转染U87细胞，Hoeehst33258染色和流式细胞分析凋亡，Westernblot验证Bax和Bcl-2表达及检测Caspase-3活性。结果替莫唑胺可显著诱导U87细胞凋亡，上调Bax表达、下调Bcl-2表达及增加Caspase-3活性。U87细胞预转染miR-21过表达载体后，替莫唑胺的这种效应可部分被抑制。结论miR-21过表达可通过下调Bax／Bcl-2比率及Caspase-3活性部分抑制替莫唑胺诱导的U87细胞凋亡，提示胶质瘤中miR-21过表达可能是胶质瘤对替莫唑胺耐药的g 大新的因素。
- 杨鉴王颖毅何敖林王之敏石磊
- 关键词：微RNAS替莫唑胺细胞凋亡
- miR-125b对胶质瘤细胞侵袭能力影响的体内研究被引量：2
- 2014年
- 目的探讨体内miR-125b表达对人脑胶质瘤细胞侵袭力的影响及其可能的机制。方法培养原代胶质瘤细胞,分别转染miR-125b mimics和miR-125b inhibitor慢病毒载体,上调或下调细胞中miR-125b表达水平,种植乳鼠皮下,Transwell试验评价胶质瘤细胞侵袭能力的变化,Western Blot验证侵袭相关基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9及RECK和TIMP3蛋白的表达。结果转染miR-125b mimics能有效提高原代胶质瘤细胞中miR-125b的表达,miR-125b inhibitor有效降低miR-125b的表达;体内实验表明miR-125b mimics及inhibitor对胶质瘤侵袭能力无明显影响,不影响侵袭相关MMP-2、MMP-9及RECK、TIMP3蛋白的表达。结论体内miR-125b表达水平与原代胶质瘤细胞的侵袭能力无明显相关。
- 李晓良孙王伟张曙光万意石磊王之敏王存祖
- 关键词：胶质瘤
- let-7i通过调节LIN28影响胶质瘤U251干细胞成熟分化被引量：1
- 2014年
- 目的 探讨微小RNA（miRNA）let-7i对胶质瘤U251干细胞成熟分化的影响及其调控机制. 方法 （1）体外培养胶质瘤U251细胞,磁珠分选出CD133阳性细胞,通过合成let-7imimics（let-7i mimics组）及let-7i control （let-7i control组）转染U251干细胞,实时荧光定量PCR验证转染后let-7i表达水平,Western blotting检测U251干细胞转染前后CD133、巢蛋白（nestin）和LIN28表达水平,利用胶质纤维酸性蛋白（GFAP）免疫荧光染色U251干细胞评价其成熟分化水平.（2）LIN28 siRNA（LIN28 siRNA组）及siRNA control（siRNA control组）转染U251干细胞后,Westernblotting检测转染前后CD133和nestin表达水平.（3）利用Targetscan软件分析及荧光素酶报告系统验证LIN28是let-7i靶基因的可能性. 结果 （1）转染let-7i mimics的U251干细胞中let-7i显著过表达,为let-7i control组的17.9倍;CD133、nestin和LIN28表达水平分别是let-7i control组13.9％、43.7％和53.6％;GFAP阳性标记指数为（83.0＆#177;1.93）％,显著高于let-7i control组[（39.7＆#177;6.73）％],差异有统计学意义（P＜0.05）.（2）LIN28 siRNA转染U251干细胞后CD133和nestin表达水平分别下调为siRNA control组的23.7％和37.9％.（3）Targetscan软件分析表明LIN28 3＇UTR存在let-7i的配对结合位点,荧光素酶报告系统证明LIN28是let-7i的靶基因. 结论 过表达let-7i可显著下调CD133及nestin的表达水平,促进胶质瘤干细胞的成熟分化,其机制可能是通过下调LIN28表达.
- 蒋栋毅石磊万意费喜峰王之敏
- 关键词：神经胶质瘤干细胞
