国家自然科学基金(30772441)
- 作品数：5 被引量：22H指数：3
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- 口腔鳞状细胞癌血管内皮生长因子与树突状细胞的相关性被引量：2
- 2009年
- 目的探讨口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma，OSCC）中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）对外周血树突状细胞（dendritic cell，DC）的分化发育及功能的影响。方法OSCC组81例及对照组24例行流式细胞仪检测外周血DC含量，ELISA法检测血清VEGF质量浓度，免疫组化法检测其中57例OSCC癌组织中VEGF的表达，观察血清与原发灶VEGF的相关性以及与DC的关系。通过体外实验，将CD-14外周血单核细胞（peripheral blood mononuclear cell，PBMC）诱导为DC过程中加入VEGF165，观察其对DC分化成熟及功能的影响。结果与对照组[（325．70±117．54）ng／L]相比，OSCC患者血清VEGF质量浓度[（764．33±263．64）ng／L]显著升高（P〈0．01），而DC／PBMC比值和DC计数显著降低（P〈0．01）。且外周血DC与血清VEGF质量浓度呈负相关（P〈0．01）。OSCC组织中VEGF的表达与血清VEGF呈正相关（P〈0．01），与外周血DC含量呈负相关（P〈0．01）。体外研究则显示VEGF165使DC表面分子CD．1a、CD-40、CD-80、CD-86、CD-83及人类白细胞抗原（human leucocyte antige，HLA）-DR的表达较对照组显著降低（P〈0．05），刺激T细胞增殖能力下降，而吞噬能力增强（P〈0．05）。结论OSCC过量分泌的VEGF可能是抑制DC分化发育及成熟的重要原因之一。
- 施佩花胡勤刚王志勇黄晓峰韩伟
- 关键词：鳞状细胞血管内皮细胞生长因子树突状细胞
- 树突细胞及其功能和疫苗的研究现状被引量：4
- 2010年
- 树突细胞(DC)可引发初次免疫应答,在机体免疫抗瘤中起着重要的作用。头颈鳞状细胞癌(HNSCC)局部不同表型的DC浸润与肿瘤预后密切相关。本文就DC的亚型,DC浸润的程度及其与肿瘤预后的相关性,HNSCC患者肿瘤组织、淋巴结和外周血中DC的数目、成熟度和功能异常,DC功能受损的原因,DC疫苗等研究现状作一综述。
- 贺智凤王志勇胡勤刚
- 关键词：树突细胞头颈鳞状细胞癌疫苗
- VEGF靶向RNA干扰质粒构建及其对人舌鳞癌Tca8113细胞的影响被引量：13
- 2009年
- 目的:用RNA干扰技术阻断人舌鳞癌系Tca8113细胞中VEGF基因的表达,观察细胞增殖及凋亡特征。方法:检测人舌鳞癌系Tca8113细胞中血管内皮生长因子VEGF表达水平;采用真核转录质粒pRNA-U6.1/Neo构建针对VEGF基因的重组转染质粒。将4种不同序列的VEGF-shRNAV1、VEGF-shRNAV2、VEGF-shRNAV3、VEGF-shRNAV4质粒以及含与VEGF无关序列的VEGF-shRNAVc和空白质粒VEGF-shRNAU6分别转染Tca8113细胞,48h后检测其VEGF表达水平,筛选稳定转染RNAi-VEGF的细胞;CCK8检测其增殖能力;流式细胞仪检测其细胞周期;Anexin-V-PI检测其凋亡特征。结果:RT-PCR和Western blot检测:Tca8113细胞阳性表达VEGF;用Lipofectamine 2000成功将不同VEGF片段的质粒转染入Tca8113细胞;RT-PCR发现,VEGF-shR-NAV2组细胞VEGF表达被显著抑制,用400ng/mLG418压力筛选获得VEGF稳定被抑制的细胞系;CCK8检测各组Tca8113细胞增殖见VEGF-shRNAV2组增殖能力小于VEGF-shRNAVc组和VEGF-shRNAU6组;转染VEGF-shRNAV2的Tca8113细胞G0-G1期细胞较VEGF-shRNAVc组和VEGF-shRNAU6组高,且细胞凋亡多。结论:用RNA靶向干扰能明显降低人舌鳞癌Tca8113细胞内VEGF的表达并抑制肿瘤细胞增殖及促进凋亡。
- 泥艳红施佩花王志勇黄晓峰韩伟侯亚义华子春胡勤刚
- 关键词：口腔鳞状细胞癌血管内皮生长因子RNA干扰质粒
- 两种转染方法介导质粒转染人舌鳞癌细胞的实验研究被引量：1
- 2008年
- 目的:比较新型阳离子聚合物交联化聚乙烯亚胺(polyethylenimine-ethyleneglycol dimethacrylate,PEIEGDMA)与阳离子脂质体TRANSfection转染人舌鳞癌(Tca8113)细胞的转染效率和细胞毒性。方法:将合成的含有绿色荧光蛋白报告基因的靶向血管内皮生长因子RNA干扰质粒,分别通过PEI-EGDMA和TRANS-fection转染入Tca8113细胞中,每组设4种浓度。转染后24h,荧光显微镜下观察转染效果,计算各组的转染效率。48h后四甲基偶氮唑盐(MTT)法行细胞毒性检测。结果:PEI-EGDMA与重组质粒质量比(W∶W)控制在1.5∶1时转染效率最高,约为72%,与其余浓度组相比存在显著性差异(P<0.05)。TRANSfection与重组质粒质量比控制在2∶1时,转染效率最高,约为55%,与其余各浓度组有显著性差异(P<0.05)。在各自最佳转染条件下,PEI-EGDMA的转染效率明显提高。MTT结果显示在实验设定的浓度范围内,各组细胞的生长无显著性差异(P>0.05),细胞毒性较小。结论:新型阳离子聚合物PEI-EGDMA与TRANSfection相比转染效率更高,细胞毒性小,有望成为人舌鳞癌细胞基因转染的有效载体。
- 韩伟胡勤刚王志勇董伟李淑锋华子春
- 关键词：聚乙烯亚胺转染效率细胞毒性
- 口腔鳞癌及其临床病理特征对外周血树突状细胞的影响被引量：3
- 2008年
- 目的:探讨口腔鳞癌临床病理特征对患者外周血树突状细胞的影响。方法:采用流式细胞术对81例口腔鳞癌患者外周血DC水平进行检测,分析口腔鳞癌及其临床病理特征对外周血树突状细胞的影响。结果:与口腔颌面部良性病变者相比,OSCC患者外周血DC水平显著降低(P<0.05)。肿瘤的大小、淋巴结转移情况、临床分期以及肿瘤分化程度对肿瘤患者外周血DC水平均有显著的影响(P<0.05)。结论:OSCC可能阻抑DC的分化发育,导致外周血DC水平降低。这种DC的下降与OSCC的临床病理特征有关,而且可能影响DC启动的机体抗肿瘤免疫作用。
- 王志勇施佩花胡勤刚韩伟黄晓峰
- 关键词：树突状细胞口腔鳞状细胞癌流式细胞术
