山东省自然科学基金(ZR2011CM019)
- 作品数:1 被引量:3H指数:1
- 相关作者:李向东刘志强周涛耿超牟安丽更多>>
- 相关机构:中国农业大学山东农业大学更多>>
- 发文基金:山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 苹果褪绿叶斑病毒外壳蛋白基因的原核表达及抗血清制备被引量:3
- 2012年
- 【目的】为了制备苹果褪绿叶斑病毒(Apple chlorotic leaf spot virus,ACLSV)的抗血清,【方法】将ACLSV外壳蛋白(Coat protein,CP)基因克隆到原核表达载体pEHISTEV和pEHISEGFPTEV,转化大肠杆菌Rosetta,切胶回收诱导表达的CP融合蛋白免疫新西兰长耳兔,制备ACLSV的抗血清。【结果】利用原核表达载体pEHISTEV和pE-HISEGFPTEV在Rosetta中分别表达出了分子质量为25 ku和55 ku的ACLSV CP融合蛋白。切胶回收25 ku的融合蛋白免疫新西兰长耳兔。经ELISA测定,所制备的抗血清效价为1∶1 024,Western blot及组织印迹分析表明抗血清能与ACLSV CP发生特异性的免疫反应。【结论】该血清特异性强,效价高,可用于苹果叶片、果实和枝条等样品中A-CLSV的检测。
- 耿超牟安丽刘志强李向东周涛
- 关键词:苹果褪绿叶斑病毒外壳蛋白基因原核表达抗血清