国家自然科学基金(11162003)
- 作品数：6 被引量：16H指数：3
- 相关作者：曾柱龙金华胡祖权贾义岳萍更多>>
- 相关机构：贵州医科大学北京大学贵阳医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 转化生长因子-β1以浓度依赖的方式重组人成熟树突状细胞的细胞骨架丝状肌动蛋白被引量：5
- 2014年
- 目的:探索转化生长因子β1(tansforming growth factor-β1,TGF-β1)对人成熟树突状细胞(mature dendritic cells,mDCs)骨架丝状肌动蛋白(filament actin,F-actin)及其部分骨架结合蛋白表达的影响,为深入理解树突状细胞(dendritic cells,DCs)的生物学行为和提高基于DCs的抗肿瘤免疫治疗的临床效率提供线索。方法:不同浓度的TGF-β1处理mDCs后,用激光共聚焦显微镜和免疫印迹实验分别研究细胞骨架F-actin的结构和部分细胞骨架结合蛋白表达水平的变化。结果:(1)与对照组相比,TGF-β1处理后的mDCs的F-actin出现了明显重排,F-actin的表达量在3 ng/ml组下调(P=0.000),在5 ng/ml组上调(P=0.000)。(2)mDCs表面丝状突起长度和数量的变化,长度在3 ng/ml和5 ng/ml组较对照组细、短(P=0.001,0.000);数量在1、3 ng/ml和5 ng/ml组较对照组少而稀疏(P=0.000);在7 ng/ml组mDCs表面丝状突起长度和数量的变化均无统计学意义(P=0.114);通过回归分析细胞丝状突起长度和数量与F-actin表达量之间存在非线性相关性(R2分别为0.828和0.746,P=0.000)。(3)细胞骨架蛋白结合蛋白的表达,fascin1在所有实验组中均出现了下调(P=0.001、0.000);p-cofilin1与总cofilin1的表达水平比在1 ng/ml和3 ng/ml组均下调(P=0.000);profilin的表达在1、3 ng/ml和5 ng/ml组均上调(P=0.001、0.001、0.013)。结论:TGF-β1以浓度依赖的方式影响mDCs的细胞骨架F-actin结构及其部分结合蛋白的表达,提示在临床上施行基于DCs的抗肿瘤免疫治疗时,需以适当的方式阻断TGF-β1的信号转导通路,这对进一步深入理解DCs的生物学行为和肿瘤的免疫逃逸机制具有重要意义。
- 郑勤妮许筱莉姚伟娟田克诚曾柱
- 关键词：成熟树突状细胞转化生长因子-Β1细胞骨架
- 血管内皮生长因子对成熟树突状细胞蛋白质组的影响被引量：1
- 2012年
- 目的:探索血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)对成熟树突状细胞(maturedendritic cells,mDCs)蛋白质表达谱的影响,以进一步理解肿瘤的免疫逃逸机制,为改善基于DCs的抗肿瘤免疫的临床治疗效率寻找新的线索。方法:用免疫磁珠从人外周血分离CD14+单核细胞,加入粒-巨噬细胞集落刺激因子(Recombinant human granulocyte-macrophage CSF,rhGM-CSF)、白介素4(Recombinant human interleukins 4,IL-4)将单核细胞诱导分化为未成熟DCs(immature DCs,imDCs),利用肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)将imDCs诱导为成熟DCs(mature DCs,mDCs),VEGF作用于mDCs,用基于质谱的蛋白质组技术研究VEGF对mDCs的蛋白质表达谱的影响。结果:VEGF可上调或下调mDCs的细胞骨架及其相关蛋白、迁移相关蛋白、免疫功能相关蛋白和抗氧化相关蛋白的表达。结论:VEGF可能通过重组mDCs的细胞骨架来损伤其运动能力和免疫学功能,这对进一步理解DCs的生物学功能和肿瘤的免疫逃逸机制具有重要意义。
- 龙金华曾柱
- 关键词：树突细胞成熟树突状细胞血管内皮生长因子蛋白质组学
- 单核细胞与未成熟树突细胞的细胞骨架相关的核心差异基因表达的生物信息学分析被引量：1
- 2017年
- 为进一步深入理解不同分化阶段树突状细胞(dendritic cells,DCs)的生物物理学特性和免疫学功能的差异。从CEO数据库获得CD14^+单核细胞(monocytes,mon)及其诱导而成的未成熟DCs(immature DCs,im DCs)的m RNA表达数据(芯片编号:GSE15076),利用R语言软件(RGui 3.2.3)解析原始数据并筛选差异基因。进一步利用STRING online工具筛选核心差异基因(可信度≥0.4),Cytoscape软件构造蛋白质相互作用网络图。对STRING online工具筛选核心差异基因进行京都基因与基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)分析。实时荧光定量PCR技术检测mon及im DCs部分核心差异基因CCNB1、CDK5、IL-6和TNF在基因水平上的表达情况。im DCs相对于mon表达的差异的基因共3 371个(im DCs与mon对比,表达变化倍数≥2,p值<0.05),其中上调基因为2 396个,下调基因为975个,通过进一步筛选后获得上调基因655个,下调基因110个,主要涉及m TOR信号通路、细胞代谢、细胞粘附等功能。其中上调基因中CDK5、CCNB1等差异基因与细胞骨架改变密切相关,而下调基因中IL-6、TNF、CXCR4等差异基因与细胞骨架改变密切相关,这对进一步深入理解im DCs独特的生物物理学特性和免疫学功能来说具有重要意义。
- 谭诚胡祖权龙金华邱伟刘丽娜贾义曾柱
- 关键词：单核细胞未成熟树突状细胞基因芯片分析生物信息学细胞骨架
- F-actin重构对树突状细胞形态和功能影响的研究进展被引量：5
- 2018年
- 树突状细胞(Dendritic cells,DCs)是目前发现的最有效的抗原提呈细胞,在启动和放大先天性及适应性免疫应答中发挥重要的作用。在其整个生命过程中,它的细胞形态、迁移与黏附、抗原捕获及抗原提呈等多方面与细胞骨架的动态重构存在密切的关系。细胞骨架的动态重构是一个由多种细胞骨架蛋白共同参与调节的复杂的结构体系,随着研究的不断深入,人们对这种结构体系的认知越来越清晰。基于这些研究,本文综述了纤维状肌动蛋白(Filamentous actin,F-actin)重构对树突状细胞形态和功能的影响。
- 刘鲜梅曾柱姚伟娟
- 关键词：树突状细胞细胞骨架纤维状肌动蛋白抗原提呈迁移
- 转化生长因子-β_1以浓度依赖的方式影响成熟树突状细胞的微观流变学特性和运动能力
- <正>肿瘤的发生发展与树突状细胞(Dendritic cells,DCs)的功能密切相关。肿瘤能够通过多种方式逃脱机体的免疫监视。基于DCs抗肿瘤疫苗在临床应用上已经取得了一些令人鼓舞的成绩,但是还有许多问题需要解决,其...
- 郑勤妮曾柱许筱丽姚伟娟
- 文献传递
- 不同分化阶段树突状细胞肌动蛋白微丝结合蛋白的表达变化被引量：5
- 2017年
- 研究不同分化阶段树突状细胞(dendritic cells,DCs)重要肌动蛋白微丝结合蛋白的表达变化。人外周血经密度梯度离心和免疫磁珠法分离获得CD14+单核细胞,用细胞因子将单核细胞(monocytes,MOs)诱导分化为未成熟DCs(immature DCs,im DCs)和成熟DCs(mature DCs,m DCs)。分别提取不同分化阶段DCs的总蛋白和总RNA,实时定量PCR和蛋白质芯片检测部分细胞骨架微丝(filament actin,F-actin)结合蛋白的在基因和蛋白水平的表达变化。单核细胞经im DCs向m DCs分化的过程中,一些F-actin的单体隔离蛋白、加帽蛋白、交联蛋白、解聚蛋白和成核蛋白在基因和蛋白水平发生了不同程度的上调或下调。一些重要的F-actin结合蛋白在DCs不同分化阶段具有不同的表达水平,DCs的结构和功能受到这些蛋白的协同作用和精密调控,是细胞形态发生显著变化的结构基础,这对于深入理解DCs的免疫调节功能来说具有重要意义。
- 孙见飞胡祖权龙金华贾义邱炜雷霆雯岳萍吴宁曾柱
- 关键词：树突状细胞基因水平蛋白水平
- 生理层流剪切力对树突状细胞免疫表型的影响
- 2016年
- 从力学生物学的角度探索生理层流剪切力(shear stress,SS)对树突状细胞(dendritic cells,DCs)的形态、细胞骨架和免疫表型分子表达水平的影响。采用常规方法从CD14^+单核细胞诱导获得未成熟DCs(immature DCs,im DCs)和成熟DCs(mature DCs,m DCs),旋转锥板装置给DCs加载10 dyn/cm^2的剪切力,观察DCs形态和细胞骨架的变化,流式细胞术和实时荧光定量PCR技术检测DCs表面分子CD80、CD83和CD86在蛋白和基因水平上的表达情况。在流体剪切力的作用下,DCs的细胞直径变小(p<0.05),细胞骨架(F-actin)发生了明显的重组。DCs的免疫表型分子CD80、CD83和CD86在蛋白和基因水平上的表达均受到影响。因此,DCs能够对生理层流剪切力作出应答,生理层流剪切力可能是DCs免疫功能的一个负调控因子,支持"力学免疫学(mechanoimmunology)"和"免疫力学生物学(immunomechanobiology)"的学术观点,这对于深入理解DCs的免疫调节功能来说具有重要意义。
- 吴翠芳董蓉胡祖权龙金华王赟邱炜岳萍曾柱许晓风
- 关键词：树突状细胞剪切力蛋白
