国家自然科学基金(30772418)
- 作品数：13 被引量：55H指数：5
- 相关作者：刘宏伟甄蕾宁慧影解涵薛瑾更多>>
- 相关机构：同济大学附属口腔医院同济大学第四军医大学更多>>
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- 猪小肠黏膜下层的生物相容性及其在组织工程化牙周组织中应用的研究被引量：1
- 2008年
- 目的:检测猪小肠黏膜下层(SIS)材料的生物相容性,并探讨其应用于组织工程化牙周组织的可行性。方法:采用反复冻融、酶消化法制备SIS材料,使用MTT方法检测其细胞毒性;培养猪牙周膜细胞(PDLCs),并与SIS复合培养,观察细胞的生长情况,以检测SIS的生物相容性。将PDLCs与SIS相复合,包裹在预先制备的猪牙根外来构建组织工程化的牙周组织,并移植于裸鼠皮下,术后2个月取材,形态学观察牙周组织的形成情况。结果:MTT法检测证实细胞毒性为0～1级,材料无细胞毒性;HE染色和甲苯胺蓝染色可见PDLCs在SIS表面和内部均生长良好,显示SIS具备良好的生物相容性。体内移植物取材,观察到在牙根表面有牙周组织样组织形成。结论:猪SIS显示了良好的生物相容性,并在异体牙周组织构建中发挥了作用,有望成为牙周组织工程的支架材料。
- 吕佳姝刘宏伟金岩马兆峰
- 关键词：牙周组织工程小肠黏膜下层牙周膜细胞
- 两种细胞膜片对牙生物性种植体牙周再生影响的动物实验被引量：5
- 2014年
- 目的 应用牙周膜细胞（periodontal ligament cells,PDLC）膜片、骨髓基质细胞（bone marrow stromal cells,BMSC）膜片与自体牙根体外构建牙生物性种植体,研究构建具有新生牙周组织支持的生物性牙根的可行性.方法 拔除2只比格犬下颌两侧双尖牙制作缺牙区,将比格犬自体牙根预备成近似圆柱状.培养犬第3代PDLC和BMSC成细胞膜片,体外将PDLC和BMSC膜片单独或共同包裹于牙根表面构建自体牙根种植体,将种植体分为4组：①双膜片组（每只犬2颗）,将PDLC、BMSC先后包裹于同一牙根表面;②PDLC膜片组（每只犬2颗）,将PDLC单膜片包裹于牙根表面;③BMSC膜片组（每只犬2颗）,将BMSC单膜片包裹于牙根表面;④无膜片组（空白对照组）（每只犬1颗）,无膜片牙根.制作缺牙区手术8周后,将种植体植入自体缺牙区牙槽嵴,12周时取材制作石蜡切片行HE和Masson三色染色,观察各组切片的组织学结果.结果 PDLC膜片组种植体根面可见包括牙骨质、牙周膜及牙槽骨的牙周组织样结构,其中可见类似牙周穿通纤维样组织垂直插入根面及骨面;双膜片组种植体和BMSC膜片组种植体根面多为骨性结合;空白对照组亦未见牙周组织样结构形成.结论 PDLC膜片能促进牙生物性种植体的牙周再生,可部分再生出包括牙骨质、牙周膜和牙槽骨的复杂牙周组织.
- 孙传明刘宏伟
- 关键词：牙种植体牙周膜细胞
- 深冷冻保存对牛牙本质力学性能影响的生物力学研究被引量：4
- 2009年
- 目的:探讨不同温度不同时间深冷冻保存对牙本质力学性能的影响。方法:收集新鲜牛下颌中切牙70个,制成70个实性块状牙本质标本分7组,每组10个,A、B、C三组放在-196℃液氮中分别深冷冻保存1周、1月和6个月,D、E、F三组放在-80℃低温冰箱中分别深冷冻保存1周、1月和6个月,再与对照组G组一起测试标本的压缩强度、弹性模量、比例极限等力学性能。结果:不同温度不同时间深冷冻保存后牙本质压缩强度、弹性模量、比例极限没有明显差异。结论:深冷冻保存对牙本质的力学性能不产生影响。
- 郑秋林刘宏伟
- 关键词：牙本质力学性能
- 人牙周膜干细胞体外诱导分化为神经元样细胞的实验研究被引量：10
- 2009年
- 目的体外定向诱导人牙周膜干细胞分化为神经元样细胞,探讨人牙周膜干细胞的多向分化潜能。方法体外分离、培养人牙周膜细胞,待细胞达一定量后用有限稀释法进行克隆化培养,筛选鉴定牙周膜干细胞(PDLSC),用含10μg/L碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的预诱导培养液诱导培养24h,然后换用含5mmol/Lβ-巯基乙醇(β-ME)的诱导培养液诱导培养6h,光镜下观察诱导细胞形态学的改变,免疫荧光、RT-PCR等方法检测鼠抗人神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白(NF)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。同时以未诱导细胞为对照。结果体外诱导培养6h细胞即发生形态学改变,可看到典型的神经元样细胞;免疫荧光、RT-PCR检测诱导细胞表达神经元细胞特异性标志NSE、NF,未诱导细胞无表达。结论人牙周膜干细胞在体外可以诱导分化为神经元样细胞,具有多向分化的潜能。
- 甄蕾刘宏伟
- 关键词：牙周膜干细胞神经元样细胞诱导分化
- 人骨髓基质干细胞对人牙周膜干细胞膜片再生牙周膜样组织的影响被引量：11
- 2011年
- 目的:研究人骨髓基质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,HBMMSCs)对人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells,HPDLSCs)膜片再生牙周膜样组织的影响。方法:利用Transwell共培养HBMMSCs和HPDLSCs,通过ALP和MTT的方法检测共培养HPDLSCs的ALP活性和增殖活性。将共培养的HPDLSCs制成膜片与煅烧的陶瓷牛骨(ce-ramic bovine bone,CBB)复合,行裸鼠体内异位移植。结果:体外结果显示,HBMMSCs可以提高HPDLSCs的ALP活性,促进细胞增殖。体内结果显示,共培养的HPDLSCs膜片不仅可以再生含矿化结构的牙周膜样组织,而且再生出丰富的血管。结论:HBMMSCs促进HPDLSCs膜片再生血管化的牙周膜样组织。
- 解涵刘宏伟
- 关键词：干细胞膜片牙周再生
- 犬牙周膜细胞和骨髓基质细胞相互作用的体外实验研究被引量：1
- 2012年
- 目的:研究牙周膜细胞(PDLCs)和骨髓基质细胞(BMSCs)共培养是否更利于牙周组织再生。方法 :用组织块法培养PDLCs,用全血贴壁法培养BMSCs,检测它们的成骨、成脂诱导分化能力。用Transwell小室共培养这两种细胞,通过3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)和实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测共培养后这两种细胞的增殖能力及部分基因的表达变化。结果:PDLCs和BMSCs具有多向分化潜能。共培养能促进它们各自增殖,上调Ⅰ型胶原(COLI)、碱性磷酸酶(ALP)、骨涎蛋白(BSP)、骨钙素(OCN)、核心结合因子2(RUNX2)的表达。结论:PDLCs和BMSCs共同运用作为种子细胞可能更有利于牙周组织再生。
- 刘曙刘宏伟
- 关键词：牙周膜细胞骨髓基质细胞共培养
- 人牙周膜干细胞的初步鉴定及体外成骨诱导被引量：7
- 2008年
- 目的:体外培养、鉴定人牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)并定向诱导分化为成骨细胞,探讨人PDLSCs的多向分化潜能。方法:体外分离、培养人牙周膜细胞,待细胞达一定量后用有限稀释法进行克隆化培养,筛选鉴定牙周膜干细胞(PDLSC),矿化诱导培养21d后检测钙结节形成情况、ALP活性,免疫细胞化学检测骨涎蛋白(BSP)、Ⅰ型胶原表达,RT-PCR检测ALP、BSPmRNA表达。结果:人PDLSCs体外诱导培养21d后可见钙结节形成,成骨细胞相关蛋白及mRNA均阳性表达。结论:人PDLSCs在体外诱导条件下具有成骨潜能。
- 甄蕾刘宏伟
- 关键词：牙周膜干细胞细胞克隆诱导分化
- 端粒、端粒酶与细胞永生化被引量：4
- 2008年
- 永生化（immortalization）体外培养细胞自发或受外界因素的影响从增殖衰老危机中逃离．从而具有无限增殖能力的过程。自发永生化的几率非常小，啮齿类动物为10^-5～10^-6，而人类细胞则更为罕见．小于10^-12。目前研究发现细胞永生化与端粒和端粒酶有密切联系。端粒除保持染色体完整性外，还作为细胞生存期限的关键性调控因子存在．
- 甄蕾刘宏伟
- 关键词：端粒端粒酶永生化
- PLGA新型纳米支架的制备及其生物相容性被引量：4
- 2012年
- 目的探讨和比较应用不同参数静电纺丝技术制备复合型聚乳酸-羟基乙酸[poly(lactic-co-glycolicacid),PLGA]纳米纤维缓释膜片的可行性,检测其表面特性以及生物相容性。方法使用不同参数制备纳米纤维膜,扫描电镜观察膜片表面形态;人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,hPLDCs)培养及鉴定后接种于空白膜上,扫描电镜观察细胞与膜的附着情况,以MTT[3-(4,5-dimethylthiaozol-2-yl)-2,5-dip henyltetrazolium bromide]实验检测不同浓度材料浸提液对细胞增殖变化情况的影响。结果随着PLGA流量增加,纳米纤维直径增加;细胞与PLGA膜复合后粘附良好且增殖状态无明显变化;不同浓度材料浸提液对牙周膜细胞增殖的影响无明显差异。结论通过不同参数静电纺丝制备的新型纳米纤维膜具有良好的生物相容性,可进一步作为多种药物及细胞因子载体构建缓释型支架,从而用于引导性牙周组织再生(guided tissue regeneration,GTR)或者牙周组织工程。
- 任谞挺刘轶洋刘宏伟
- 关键词：静电纺丝人牙周膜细胞MTT
- 釉基质蛋白与不同化学方式联合处理根面对牙周膜细胞附着、增殖的影响被引量：5
- 2009年
- 目的:观察釉基质蛋白(enamel matrix proteins,EMPs)与不同的化学方式联合处理牙周炎患牙根面后对牙周膜细胞(periodontal ligament cells,PDLCs)附着和增殖的影响,为牙周炎患牙体外牙周组织构建奠定基础。方法:收集因晚期牙周炎拔除的患牙60个,经刮治和根面平整后,制备5 mm×5 mm×1 mm大小的根片并随即分成3组,分别用20 g/L盐酸四环素、240 g/L EDTA、生理盐水(对照组)处理3 min后,再使用100μg/mL EMPs处理2 h。人PDLCs体外培养后接种于各组根片并于24 h后在扫描电镜下、HE染色观察细胞的附着状况,分别在1、3、5、7 d用CCK-8试剂盒检测细胞的增殖,并对数据进行双因素方差分析,检测水准α=0.05。结果:两实验组采用化学处理与EMPs联合应用后,PDLCs在根片上的附着良好,可见细胞间大量丝状伪足相连,HE染色显示细胞沿根片呈连续排列,优于单纯使用EMPs的对照组。接种第3天开始,240 g/LEDTA+EMPs组的细胞量,比对照组有显著增多(P(0.05),接种第5天开始,20 g/L盐酸四环素+EMPs组的细胞量比对照组有显著增多(P(0.05),而两实验组之间无显著性差异。结论:EMPs与不同化学处理方式联合处理牙周炎患牙根面相比,单纯使用EMPs更有利于PDLCs在根面的附着和增殖,而240 g/L EDTA与EMPs配伍使用有助于PDLCs在根面的早期增殖。
- 薛瑾刘宏伟
- 关键词：釉基质蛋白牙周膜细胞根面处理增殖
