国家自然科学基金(30571820)
- 作品数：6 被引量：17H指数：3
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- MBD1 RNA干扰对胰腺癌细胞株BxPC-3生长影响的实验研究
- 2009年
- 目的观察阻断MBD1表达后对胰腺痛细胞牛长增殖的影响，探讨MBD1在胰腺癌发生发展中的作用。方法采用RNA下扰技术，构建MBD1siRNA重组质粒，脂质体介导转染人胰腺癌细胞株BxPC3，RT-PCR和Western印迹检测转染前后MBD1 mRNA与蛋白的表达变化，MTT法检测转染前后BxPC-3细胞的生长曲线，将细胞接种于裸鼠，观察转染前后胰腺癌细胞体内移植瘤的生长情况。结果转染siRNA-MBD1质粒后胰腺癌细胞株BxPC～3MBD1的mRNA与蛋白表达水平明显降低。MTT法检测细胞的生长曲线，发现转染组较转染卒质粒组和未转染组生长明显缓慢（P〈C0．01）；体内实验显示，将转染前后的细胞接种于裸鼠，转染组移植榴生长速度明显较其他两组减慢（P〈0．01），RT-PCR检测移植瘤MBD1mRNA表达的变化，转染组中未能测到明显的MBD1表达。而转染组中CDH1、Rb等抑癌基因mRNA的表达明显高于转染空质粒组和未转染组。结论通过RNA干扰技术，可在转录和翻译水平降低MBD1在胰腺癌细胞株BxPC-3中的表达，并能抑制肿瘤细胞的生长，但其作用机制尚不清楚，MBD1介导的转录抑制作用可能在胰腺癌的发生发展过程中起到重要的作用。
- 刘辰虞先浚傅德良金忱徐近龙江缆采兴
- 关键词：胰腺肿瘤转染RNA干扰抑癌基因
- 胰腺癌组织中差异表达蛋白的筛选与鉴定被引量：5
- 2007年
- 目的:筛选并鉴定胰腺癌组织中的差异表达蛋白,并探讨其临床意义。方法:应用双向凝胶电泳技术对12对胰腺癌组织和癌旁组织样品进行分析,筛选出差异表达蛋白质;应用MALDI-TOF-MS/MS技术对差异表达蛋白质进行鉴定。结果:优化的胰腺组织双向凝胶电泳技术具有良好的分辨率和可重复性;应用双向凝胶电泳技术筛选出胰腺癌组织中30个差异表达蛋白质;应用MALDI-TOF-MS/MS技术鉴定了胰石蛋白、钙囊素、热休克蛋白B6等24个蛋白质,其中15个蛋白质在胰腺癌组织中表达上调,9个蛋白质表达下调。结论:双向凝胶电泳、生物质谱等蛋白质组学技术在胰腺癌的基础研究中有重要价值和应用前景,有助于筛选蛋白标志物和阐明分子发病机制。胰腺癌组织中有多个异常表达蛋白质,这些蛋白质与胰腺癌的发生相关,可能成为胰腺癌蛋白标志物和药物治疗的靶蛋白。
- 狄扬陈耀辉龙江金红金忱虞先浚傅德良倪泉兴
- 关键词：胰腺肿瘤蛋白质类
- 甲基化CpG结合域蛋白1在胰腺癌组织中的表达和意义被引量：4
- 2006年
- 目的:检测甲基化CpG结合域蛋白1(MBD1)蛋白在胰腺癌组织中的表达,并探讨其临床意义。方法:应用S-P免疫组织化学法检测38例胰腺癌、17例胰腺癌旁组织、8例胰腺良性肿瘤、3例慢性胰腺炎和6例正常胰腺组织中MBD1蛋白的表达。结果:MBD1在胰腺癌组织、正常胰腺组织、胰腺良性肿瘤、胰腺癌旁组织中的表达阳性率分别是76.32%(29/38)、16.67%(1/6)、25.0%(2/8)、29.41%(5/17),3例慢性胰腺炎标本中未见表达;胰腺癌阳性表达率明显高于正常胰腺、慢性炎症、良性肿瘤和癌旁对照组织(P<0.05)。MBD1表达水平的高低与病人的性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、分化程度和TNM分期无显著性差异(P>0.05);而与淋巴结转移密切相关,有淋巴结转移者胰腺癌组织MBD1的表达阳性率为92.31%(24/26),高于无淋巴结转移者的41.67%(5/12)(P<0.01)。结论:胰腺癌中MBD1呈高水平表达,并与胰腺癌的高转移侵袭活性有关,其机制可能与MBD1介导抑制多个甲基化相关抑癌基因的表达有关。MBD1的转录调控机制有待进一步研究。
- 狄扬龙江傅德良虞先浚金忱倪泉兴张延龄
- 关键词：胰腺肿瘤免疫组织化学
- MBD1 RNA干扰对胰腺癌细胞VIMENTIN、GRP78表达影响的实验研究
- 2009年
- 目的:观察下调甲基化CpG结合域蛋白1(MBD1)表达后对胰腺癌细胞甲基化相关基因VIMENTIN、GRP78表达的影响,探讨MBD1介导的甲基化调控网络在胰腺癌发生、发展中的重要作用。方法:人工设计合成针对MBD1基因的小分子干扰RNA,构建MBD1-siRNA重组质粒,脂质体法转染人胰腺癌细胞株BxPC-3,RT-PCR和Western印迹法检测转染前后MBD1、VIMENTIN和GRP78mRNA与蛋白表达的变化。结果:MBD1-siRNA重组质粒成功转染胰腺癌细胞系BxPC-3,并筛选得到稳定表达的细胞株。转染后胰腺癌BxPC-3细胞株MBD1、VIMENTIN和GRP78的mRNA与蛋白表达水平均明显降低。结论:MBD1下调可使胰腺癌细胞VIMENTIN和GRP78表达下降;MBD1可能通过调控甲基化相关基因的表达,在胰腺癌的发生、发展过程中起重要的作用。
- 虞先浚刘辰徐近金忱龙江傅德良倪泉兴
- 关键词：胰腺肿瘤甲基化
- 血清蛋白质指纹图谱预测模型在胰腺癌诊断中的应用研究被引量：3
- 2008年
- 目的血清蛋白质指纹图谱预测模型在胰腺癌诊断中的建立及应用。方法应用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱（SELDI—TOF—MS）技术，分析胰腺癌患者和健康对照者的血清蛋白质指纹图谱，从中筛选出与胰腺癌相关的血清差异蛋白质，通过生物信息学方法建立胰腺癌诊断预测模型，并通过盲法检测验证该模型的可靠性。比较该诊断预测模型与胰腺癌传统血清肿瘤标志物CA19-9对于胰腺癌诊断的灵敏度和特异度，评价其临床应用价值。结果采用金属亲和捕获芯片（IMAC3），在胰腺癌患者血清中发现了12个差异表达蛋白质，其中有6个蛋白质诊断胰腺癌的价值高于CA19-9；应用决策树原理，建立了由4个节点、5个终结点组成的胰腺癌血清蛋白质指纹图谱诊断预测模型；经盲法检测，该模型在区分胰腺癌与健康对照者时的灵敏度是90．7％（39／43），特异度是89．6％（43／48），均优于传统的肿瘤标志物CA19-9，诊断预测模型与CA19-9的系列试验可以将特异度提高至97．9％（47／48），而平行试验可以将灵敏度提高至95．3％（41／43）。结论血清蛋白质指纹图谱预测模型为胰腺癌的诊断提供了一条快速、简便、准确的新途径，并有助于筛选新的肿瘤标志物。
- 龙江狄扬金忱虞先浚刘维薇陈宇明傅德良倪泉兴
- 关键词：胰腺肿瘤蛋白质组血清学试验
- 正常组织和胰腺癌组织中差异表达蛋白的鉴定被引量：5
- 2009年
- 采用双向凝胶电泳和生物质谱技术,对12对胰腺癌组织和癌旁组织样品、3个胰腺良性疾病样品、3个正常胰腺组织样品的蛋白质进行了分离和鉴定,获得了重复性较好的双向凝胶电泳图谱;鉴定了胰腺癌和癌旁组织的差异表达蛋白质,发现了30个差异表达蛋白质;应用MALDI-TOF-MS/MS技术对差异表达蛋白质进行鉴定,共有24个蛋白质得到鉴定,其中15个蛋白质在胰腺癌组织中表达上调,9个蛋白质表达下调.这些蛋白质与胰腺癌的发生相关,可能成为胰腺癌的分子标志物和药物治疗的靶蛋白.
- 金红狄扬陈耀辉傅德良杨芃原
- 关键词：胰腺癌双向凝胶电泳生物质谱
