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宁波市科技计划项目(2007C10065)
作品数:
1
被引量:5
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相关作者:
滑世轩
赵行
吕建新
涂植光
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相关机构:
重庆医科大学
温州医学院
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发文基金:
浙江省医药卫生科学研究基金
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2009
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NK4基因的克隆及其在Raji细胞中的表达
被引量:5
2009年
目的:克隆NK4基因,构建其重组真核表达载体,并观察其在Raji细胞中的表达。方法:从人肝组织中提取总RNA,行RT-PCR获得NK4基因cDNA,与载体pVITRO2-mcs构建重组真核表达载体,转染Raji细胞。潮霉素B筛选后,采用实时荧光定量PCR、ELISA、细胞免疫组化和半固体培养等方法检测NK4基因在Raji细胞的表达,筛选稳定表达的细胞株。结果:NK4基因获成功克隆并构建了重组真核表达载体pVITRO2-mcs-NK4;转染NK4基因后的Raji细胞经RT-PCR发现存在特异性DNA片段。NK4基因在Raji细胞可稳定表达NK4mR-NA和蛋白,且可抑制Raji细胞的增殖、迁徙和侵袭。结论:NK4基因成功克隆并构建了重组真核表达载体,转染Raji细胞后表达稳定。
滑世轩
岑东
赵行
吕建新
涂植光
裴仁治
关键词:
基因
NK4
克隆
基因表达
RAJI细胞
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