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国家科技支撑计划(2012BAD43B02): 作品数：40 被引量：210H指数：9; 相关作者：剡根强王静梅杨铭伟凌晨朱玲更多>>; 相关机构：石河子大学新疆农垦科学院新疆生产建设兵团更多>>; 发文基金：国家科技支撑计划国家级星火计划国家自然科学基金更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>

溶血曼氏杆菌对药物及消毒剂的敏感性分析被引量：1: 2020年; 为了对引起肉牛运输热的病原溶血曼氏杆菌进行药物及消毒剂敏感性分析,试验对7株溶血曼氏杆菌进行19种药物的药敏试验,观察各药物抑菌圈直径并分析多重耐药性;选择3株菌株进行消毒剂消毒效果试验,在不同消毒剂不同浓度下,作用不同时间计算消毒剂的灭菌率。结果表明:7株菌株均对氨苄西林、环丙沙星、氟苯尼考、头孢拉定、头孢西丁、头孢噻肟、头孢噻吩、新霉素、万古霉素、替米考星等大部分药物敏感,对链霉素、四环素、阿莫西林、卡那霉素、土霉素青霉素、磺胺嘧啶钠耐药;3株菌在0.005%的次氯酸钠中作用10 min、在0.05%的氢氧化钠中作用20 min、在0.001%的碘液中作用15 min、在0.001%的过氧乙酸中作用10 min、在0.5%的甲醛中作用15 min均可被完全杀灭。说明溶血曼氏杆菌对大部分药物敏感,常用的消毒剂作用足够时间均可完全杀灭溶血曼氏杆菌。; 韩小丽任静静杨铭伟朱玲张锐剡根强; 关键词：肉牛运输热药敏试验

牛支原体扩大培养效果测定及生长曲线的观察被引量：3: 2015年; 为了监测培养过程中牛支原体的生长情况,利用含氯化三苯基四氮唑（TTC）牛支原体培养基,采用倾注培养法对牛支原体扩大培养效果进行了菌落形成单位（CFU）计数,通过颜色变化单位（CCU）法进行浓度检测,并测定了OD630值及p H值的变化,据此绘制生长曲线。结果表明：待测牛支原体培养物在梯度稀释后采用倾注培养可方便计数,且计数菌落显色特征明显;CCU法检测待测菌株在96小时时的生长效价为5.0×108CCU/m L;牛支原体纯培养物在不同时段其OD630值变化范围为0.024~0.213,呈现二段式分布,即快速上升阶段和平稳阶段,平稳阶段后有下降趋势;p H值变化范围为6.8~7.9,随时间累积而下降,且在培养48 h内下降速度较快,48~84 h下降缓慢,84 h后基本无变化。; 杨铭伟高家登王超丽杨龙龙剡根强王静梅; 关键词：牛支原体菌落形成单位

石河子部分地区规模化奶牛场奶牛球虫感染调查被引量：4: 2015年; 为调查石河子地区奶牛球虫感染与流行现状,试验选取石河子地区的6个规模化奶牛养殖场,直肠采集粪便482份进行球虫检测。结果发现,被调查的6个规模化奶牛场均存在球虫感染,感染率最高为21.33%;共检出6种疑似艾美耳球虫,分别为:牛艾美耳球虫(Eimeria bovis)(12%)、邱氏艾美耳球虫(Eimeria zuerni)(10.67%)、椭圆艾美耳球虫(Eimeria ellipsoidalli)(18.67%)、柱状艾美耳球虫(Eimeria cylindrce)(6.67%)、奥博艾美耳球虫(Eimeria auburnensis)(7.33%)、亚球形艾美耳球虫(Eimeria subspherica)(11.33%);感染率较高的椭圆艾美耳球虫、牛艾美耳球虫、亚球艾美耳球虫为该地区奶牛球虫的优势虫种。; 蒋业慧王正荣张艳艳薄新文; 关键词：奶牛艾美耳球虫感染率优势虫种

致肉牛运输热溶血曼氏杆菌的分离鉴定及部分生物学特性研究被引量：13: 2019年; 为探明一起肉牛运输热的病原及生物学特性,本研究无菌采集病死牛心血、肺脏、肝脏和脾脏,对其进行细菌分离、生化试验和PCR鉴定,并对分离株进行毒力基因检测、致病性研究。结果显示,7株分离菌均为革兰氏阴性短杆菌,具有微弱的β-溶血,瑞氏染色可见两极浓染及明显的荚膜。生化试验结果显示,分离菌能发酵葡萄糖、麦芽糖、阿拉伯糖、甘露醇、甘露糖、木糖等碳水化合物,不发酵脲酶、MR-VP和吲哚,产生少量酸而不产气,结果符合溶血曼氏杆菌生化特性。PCR鉴定均为荚膜血清A2型,分离菌均含有四型菌毛相关基因ptfA、参与复制相关基因dnaN、白细胞介素相关基因LktC3种毒力基因。分离菌对小鼠的LD50值在107.83～108.50 CFU/mL之间,不同菌株间小鼠LD50值存在一定差异,但差异不明显。结果表明,引起该批肉牛运输热的病原为携带毒力基因的荚膜血清A2型溶血曼氏杆菌,本研究结果为进一步研究溶血曼氏杆菌的致病机制提供参考。; 韩小丽任静静杨铭伟朱玲张锐剡根强; 关键词：肉牛生物学特性

牛支原体间接免疫酶标组织化学检测方法的建立被引量：5: 2013年; 为建立检测牛支原体的间接免疫组织化学(简称免疫组化)方法,分别以鸡抗牛支原体(Mycoplasma bovis)IgY、羊抗鸡IgG-HRP为一抗和二抗,对牛支原体菌体涂片和牛支原体阳性肺脏组织切片进行免疫组化染色,并对染色条件进行优化,确定组织触片及组织切片的最佳免疫组化条件。在最佳条件下对病死犊牛病料切片进行免疫组化检测,并以细菌分离培养和PCR方法进行验证。结果显示,免疫组化法阳性标本与分离培养和PCR结果相符,而阴性对照和替代试验均为阴性。结果表明本试验建立的间接免疫组化方法可用于检测临床病例组织样本及培养物中的牛支原体,具有特异性和可靠性,为探究该病原在机体内的定位、动态分布规律及致病机理提供了手段。; 金云云剡根强王静梅石刚; 关键词：免疫组化牛支原体

牛源荚膜A型多杀性巴氏杆菌疫苗候选株的筛选及鉴定被引量：6: 2018年; 为了筛选生长快、毒力强、免疫原性好、副反应小的牛源荚膜A型多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)灭活疫苗菌株,本试验选取6株来自不同地区致犊牛肺炎死亡的牛源荚膜A型多杀性巴氏杆菌分离株,测定了培养基生长曲线、小鼠毒力、菌体脂多糖(LPS)含量及各菌株灭活菌苗免疫小鼠和家兔后的抗体效价,并进行了攻毒保护试验。结果显示,分离株Pm2、Pm3、Pm5生长速度较快、毒力较强、LPS含量较多,均含有与毒力和免疫相关的ptfA和fimA基因;免疫小鼠及家兔未发现明显不良反应,在二免后14d血清抗体达1∶64~1∶128,强毒攻毒后全部存活,而PBS对照组全部死亡。本试验结果表明,Pm2、Pm3、Pm5均可作为多杀性巴氏杆菌灭活菌苗的候选菌株,其中Pm3作为首选株。; 朱玲柳旭伟剡文亮张锐韩小丽剡根强; 关键词：灭活菌苗免疫保护抗体效价

牛支原体间接ELISA检测方法的建立被引量：13: 2014年; 以牛支原体(Mycoplasma bovis)全菌蛋白经超声波裂解后的裂解物作为包被用抗原,建立检测牛支原体血清抗体的间接ELISA方法。通过棋盘滴定法确定抗原最适包被浓度、待检血清最佳稀释度,同时对抗原的包被方式、封闭剂和封闭时间、酶标二抗最佳工作浓度、一抗和二抗最佳作用时间、血清稀释液、底物显色时间进行优化。用该方法测定10份阴性血清的OD450值计算出阴性临界值,并对牛布氏杆菌病、牛病毒性腹泻黏膜病抗血清进行检测。结果:抗原最适包被浓度为200μg/mL,待检血清最佳稀释度为1∶100,阴性临界值为0.327。用该方法检测牛布氏杆菌病、牛病毒性腹泻黏膜病抗血清均无交叉反应,表明该间接ELISA具有很好的特异性。; 金云云剡根强王静梅王超丽马玉英; 关键词：间接ELISA 牛支原体抗体

牛支原体(新疆株)灭活疫苗的制备及犊牛免疫保护性评价被引量：4: 2016年; 为研发用于预防犊牛支原体肺炎及关节炎灭活油佐剂疫苗并评价其免疫效果,本研究采用牛支原体(Mycoplasma bovis,M.bovis)新疆分离株做为制苗菌株,经牛支原体专用液体扩大培养基培养后进行膜分离浓缩、甲醛灭活,加入油佐剂乳化制备牛支原体灭活疫苗,经无菌检验、实验动物安全性检验及乳化效果检测后进行犊牛免疫效果测定。结果显示,免疫组犊牛在二免后14 d,血清中M.bovis抗体达到0.465(OD_(450)),3头攻毒犊牛均保持良好的精神状态且体温变化不明显,临床症状综合评分为3,肺脏解剖学及病理组织学观察无异常,肺脏病变指数为2且肺脏中未分离回收到M.bovis;未免疫对照组犊牛同期血清M.bovis抗体为0.142(OD_(450)),3头攻毒犊牛均先后出现体温升高、轻度咳喘、脓性鼻液、明显消瘦等症状,临床症状综合评分为11,肺脏病变指数为17,肺脏尖叶、心叶及部分膈叶均表现明显肝变,2头犊牛表现胸膜与肺脏黏连,1头犊牛整个尖叶广泛分布黄白色蚕豆状大小坏死性结节,与自然感染病例相同,病理组织学观察显示肺泡腔和支气管中有大量中性粒细胞浸润,支气管管壁充血、水肿,肺脏部分坏死灶呈均质红染,为典型的化脓性及坏死性肺炎变化,从病变肺组织中均分离回收到M.bovis。结果表明,本研究制备的牛支原体灭活疫苗给犊牛免疫后能产生良好的免疫应答反应,并能抵抗M.bovis感染所致的肺脏病变作用。; 杨铭伟剡根强王静梅王树杰王学; 关键词：牛支原体疫苗犊牛免疫保护病理学

抗牛支原体及多杀性巴氏杆菌二联卵黄抗体的制备及初步临床应用观察被引量：2: 2014年; 本研究将自制牛支原体和牛源荚膜血清A型多杀性巴氏杆菌灭活菌苗分别免疫产蛋鸡,并检测效价,采用卡拉胶结合硫酸铵沉淀法提取Ig Y,观察抗牛支原体及多杀性巴氏杆菌二联高免卵黄抗体制剂在犊牛中应用的效果,并进行临床应用研究。结果显示,牛支原体在首免后第60d抗体效价达到高峰,经ELISA检测效价为1:128000;牛多杀性巴氏杆菌首免后第50d抗体效价达到高峰,经IHA检测效价为1:1024。临床初步应用表明,二联卵黄抗体对犊牛肺炎的预防和治疗均有一定作用。; 高家登杨铭伟剡根强王静梅王超丽杨龙龙; 关键词：牛支原体

犊牛大肠杆菌K_(99)-F_(41)二价菌毛疫苗的制备及免疫效果的测定被引量：8: 2016年; 为了比较分析由致犊牛腹泻大肠杆菌分离株K99-F41分别制成的二价菌毛油佐剂苗和全菌体油佐剂灭活苗不同注射剂量时的妊娠母牛、所产犊牛免疫抗体效价及抗体消长时间的差异,试验采用免疫接种方法将两种疫苗分别按照不同剂量接种怀孕母牛,收集母牛产后6个时段内的初乳及所产犊牛灌服初乳后1,3,5,7天的血清,并通过间接ELISA法检测初乳和犊牛血清中相应抗体效价。结果表明:两种疫苗在剂量为5 m L时初乳中抗体效价明显高于3 m L,初乳中抗体效价在24 h后呈下降趋势;犊牛血清中的抗体效价明显上升;两种疫苗5 m L时犊牛腹泻自然发病率分别为15.4%和7.7%。说明两种疫苗均能产生良好的免疫应答及预防初生犊牛的大肠杆菌腹泻。; 邝佳丽剡根强王静梅王超丽王学王树杰; 关键词：犊牛菌苗免疫效果抗体消长

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