国家自然科学基金(30300256)
- 作品数：10 被引量：41H指数：4
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- 梅花鹿源BVDV NS_(2-3)基因重要区的克隆与序列分析被引量：1
- 2006年
- 根据牛病毒性腹泻病毒(BVDV)NADL株的序列设计并合成1对引物,对从吉林不同地区分离的4株梅花鹿源BVDV(CCSYD株、CC JYD株、CCKCD株和JLCYD株)的N S2-3基因进行RT-PCR扩增,并对扩增的片段进行序列分析。结果表明,国内梅花鹿源BVDV CCSYD株属基因Ib亚型,CC JYD株、CCKCD株和JLCYD株属基因型待定。
- 温铁锋郜玉钢王树志杜锐
- 关键词：梅花鹿牛病毒性腹泻病毒
- 转E0基因黄芪及其免疫原性研究
- 为研制鹿源牛病毒性腹泻病毒(BVDV)转基因黄芪疫苗,首先,以BVDVRNA为模板,通过RT-PCR扩增其E0基因,将E0基因和pBI121植物表达载体进行连接和克隆。其次,通过花粉管通道法,将pBI121-E0转化黄芪...
- 郜玉钢赵雪亮臧埔李丽杜锐卫功庆张连学
- 关键词：分子病毒学E0基因免疫
- 文献传递
- 牛病毒性腹泻病毒梅花鹿分离株E_0基因的克隆与表达被引量：4
- 2005年
- 利用RT-PCR技术扩增了牛病毒性腹泻病毒(BVDV)梅花鹿分离株E0基因,并将其克隆到pMD18-T克隆载体和pET28a原核表达载体中,构建了pMD18-T/E0和pET28a/E0重组子,并进行了测序和表达。表达产物分别用12%SDS-PAGE检测和牛抗BVDV阳性血清进行Western-blotting检测,结果表明,BVDV梅花鹿分离株E0基因的核苷酸序列与匈牙利VEDEVAC株的同源性高达98.6%,与C24V标准株的同源性为84.9%,证明构建的重组子是正确的;BVDV梅花鹿分离株E0基因得到了正确表达。
- 郜玉钢杜锐王全凯王楠王树志
- 关键词：梅花鹿牛病毒性腹泻病毒E0基因
- 梅花鹿源牛病毒性腹泻病毒分离株油剂灭活苗的制备和免疫效果观察被引量：5
- 2006年
- 为了探索有效防制鹿黏膜病的方法,对从吉林省长春市双阳区梅花鹿流产胎儿肝脏病料中分离出的牛病毒性腹泻病毒灭活后制备成油剂灭活苗,免疫接种试验动物后,检测其体液免疫和细胞免疫水平,结果表明,梅花鹿源牛病毒性腹泻病毒(BVDV)分离株油剂灭活苗既能产生特异性体液免疫,又可以产生细胞免疫应答。
- 王铁郜玉刚王楠杜锐
- 关键词：梅花鹿牛病毒性腹泻病毒灭活苗
- 梅花鹿牛病毒性腹泻病毒的分离及其RT-PCR鉴定被引量：11
- 2004年
- 对梅花鹿的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)分离培养及RT—PCR进行了研究。从腹泻鹿粪样中分离到了 与BVDV的C24V标准椿致细胞病变相同规律的BVDV病毒株,经RT—PCR扩增进一步证实其为牛病毒性腹 泻病毒。
- 郜玉钢郑全杜锐王全凯王树志
- 关键词：梅花鹿牛病毒性腹泻病毒BVDVRT-PCR反转录-聚合酶链式反应
- 梅花鹿源牛病毒性腹泻病毒分离与鉴定被引量：10
- 2005年
- 从吉林省某鹿场梅花鹿流产胎儿肝脏病料中分离出1株病毒,并对其进行了鉴定。结果表明:该毒株接种于MDBK传代细胞后出现了BVDV典型而规律的细胞病变,其理化特性与BVDV相同,致细胞病变作用可被BVDV国际标准株C24V株的牛阳性血清所阻断,电镜负染观察病料接种MDBK细胞的F1代浓缩病毒液,可见典型的BVDV粒子形态,从F1代浓缩病毒液中分别扩增出402bp(NS2-3)和700bp(E0)的目的片段。认为该毒株是BVDV,命名为CCSYD株。
- 郜玉钢杜锐王全凯郑全王楠王树志
- 关键词：梅花鹿牛病毒性腹泻病毒反转录-聚合酶链式反应
- BVDV E0相互作用人参蛋白的筛选
- 本论文的目的是筛选BVDV E0蛋白相互作用的人参蛋白,探讨E0基因提高人参皂苷合成的分子机理。其方法是将BVDV E0基因与pGBK-T7质粒重组构建诱饵质粒,同时构建人参酵母双杂交cDNA文库,通过酵母双杂交技术筛选...
- 赵雪亮郜玉钢臧埔李丽杜锐卫功庆张连学
- 关键词：分子生物学酵母双杂交蛋白相互作用
- 文献传递
- 鹿源牛病毒性腹泻病毒E_0基因的RT-PCR扩增被引量：1
- 2009年
- 用RT-PCR方法,成功扩增了鹿源牛病毒性腹泻病毒保护性抗原E0基因。该RT-PCR最佳反应条件分别为退火温度为55℃、25 mmol/μL MgC l2(4μL)、10 pmol/μL上下游引物(2μL)、5 U/μL Taq酶(1μL)。
- 郜玉钢李璠瑛刘佳佳杜锐臧埔
- 关键词：梅花鹿牛病毒性腹泻病毒反转录-聚合酶链式反应E0基因
- 鹿粘膜病病毒的分离鉴定被引量：2
- 2004年
- 本研究首次应用MDBK传代细胞从腹泻幼鹿粪样中分离获得一株病毒(MDV N71)。该毒株可使培养细胞出现明显的空泡变性,电镜负染观察接毒细胞培养物见有典型的粘膜病病毒粒子。MDV N71在MDBK传代细胞上的TCID_(50)为10^(-5.4),对乙醚、氯仿和胰蛋白酶敏感,56℃70min被灭活。对酸的耐受力较弱,在pH3.0环境下毒力明显降低。对碱有较强的耐受力,在pH9.0环境下依然稳定。不凝集绵羊、猪、兔和鸡红细胞。用MDV长春184毒株的特异性免疫荧光抗体染色(IFA),可以在感染细胞浆内见有特异性荧光。该毒株的致细胞病变作用,可被MDV长春184毒株抗血清所中和。提取病毒感染细胞的总RNA进行反转录聚合酶链反应(RT-PCR),结果扩增出的片段大小为400 bp。根据MDV N71的理化特性、形态学、生物学、免疫学和RT-PCR鉴定结果,确证MDV N71株为粘膜病病毒,这为深入探讨鹿MD的诊断和防制以及进行分子生物学研究奠定了基础。
- 杜锐王全凯王树志王新平任东波
- 关键词：粘膜病病毒
- 梅花鹿源BVDV基因E_0克隆与序列分析被引量：5
- 2009年
- 对梅花鹿源BVDV基因E0进行了克隆和序列分析。结果表明,梅花鹿源BVDV基因E0的大小为681bp,与报道9株BVDV(VEDEVAC、Bega、C24V、ILLC、NADL、OSLOSS、R1935、SD-1、Y546)和7株猪瘟病毒(ALD、Bres-cia、c、GPE、JL、LN9912、SM)及3株羊边界病毒(BD31、C413、BDVX818)相比,核苷酸序列的同源性依次为98.6%～84.8%、76.1%～74.7%、77.0%～76.7%。梅花鹿源BVDV为Ιb基因亚型。
- 郜玉钢李璠瑛刘佳佳杜锐臧埔
- 关键词：梅花鹿牛病毒性腹泻病毒基因克隆
