上海市自然科学基金(10ZR1430900) 作品数:16 被引量:105 H指数:8 相关作者: 高月求 孙学华 李曼 朱晓骏 杨婉凤 更多>> 相关机构: 上海中医药大学附属曙光医院 海南省中医院 更多>> 发文基金: 上海市自然科学基金 国家自然科学基金 上海市教育委员会重点学科基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
补肾冲剂联合干扰素治疗慢性乙型肝炎及其对树突状细胞的影响 被引量:8 2011年 目的:观察干扰素联合补肾冲剂治疗慢性乙型肝炎(chron ic hepatitis B,CHB)的疗效,探讨该药物对CHB患者树突状细胞(dentritic cells,DCs)的影响。方法:收集CHB患者60例,随机分为治疗组及对照组,治疗组给予补肾冲剂联合干扰素治疗,对照组单用干扰素治疗,疗程均为6个月。分离扩增外周血单个核细胞中DC,流式细胞法检测DC表面CD86、CD80、CD40、CD14、CD11c、HLA-DR的表达。检测同种异体T淋巴细胞混合培养后的刺激指数及培养上清液中IFN-γ、IL-10表达。结果:治疗后治疗组ALT、AST改善较对照组明显,P<0.05;治疗后治疗组HBVDNA对数均值明显低于对照组,具有显著差异(P<0.05)。治疗后治疗组淋巴细胞混合实验中IFN-γ明显高于对照组(P<0.05)。结论:中药补肾冲剂与干扰素联合治疗CHB在改善肝功能、降低HBVDNA数量方面疗效更,且对IFN-γ有明显的升高作用,提示其疗效机理可能在于提高患者的细胞免疫能力。 孙学华 郑亚江 李曼 朱晓骏 商斌仪 杨婉凤 卓蕴慧 高月求关键词:补肾冲剂 干扰素 慢性乙型肝炎 肝功能 HBVDNA 树突状细胞 参葛方对单纯高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝病大鼠脂质代谢的影响 被引量:6 2012年 目的:研究参葛方对单纯高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝病模型大鼠脂质代谢的影响。方法:采用单纯高脂饮食8周诱导非酒精性脂肪性肝病动物模型,设正常组、模型组、参葛方不同剂量组及阳性药物对照组。造模大鼠分别在第5周开始随机分为模型组及药物组,并给予相应药物干预。观察大鼠肝脏组织病理变化、肝组织三酰甘油(TG)、游离脂肪酸(FFA)含量,及空腹血糖(FPG)、空腹血胰岛素水平(FINS)、胰岛素抵抗指数(IRI)的变化。结果:与模型组比较,参葛方治疗组大鼠肝脏组织TG、FFA的水平显著降低(P<0.01),肝组织病理明显改善,同时FINS和IRI下降(P<0.01)。结论:参葛方可降低单纯高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝病模型大鼠肝脏FFA的含量,减轻肝脏脂肪沉积和肝脂肪变性,改善胰岛素抵抗,调节代谢紊乱。 杨婉凤 齐艳平 李曼 孙学华 朱晓骏 高月求关键词:非酒精性脂肪性肝病 动物模型 脂质代谢 胰岛素抵抗 中药灵猫方的抗肝纤维化作用及其机制 被引量:5 2012年 目的研究灵猫方抗肝纤维化的作用及其机制。方法 55只BALB/c小鼠随机分为4组:正常组、模型组、秋水仙碱组、灵猫方组。ConA(15mg/kg)尾静脉注射制作肝纤维化模型,每周两次,共10周。正常组给予双蒸水灌胃,其余组分别给予秋水仙碱(0.2mg/kg)、灵猫方(7.5g/kg)。末次灌胃24h后处死小鼠,检测肝脏病理变化以及血清ALT、AST、ALB、DBIL表达水平、肝组织羟脯氨酸(HYP)含量变化、肝组织纤维化蛋白(FBRS)的表达水平。结果 (1)与模型组相比,灵猫方组血清ALB水平明显增加,DBIL水平明显降低(P均<0.01),HYP的含量明显降低(P<0.05)。(2)肝脏病理学检测,灵猫方组肝纤维化的程度和胶原显色指数较模型组明显减轻(P<0.05,P<0.01)。(3)与正常组相比,模型组的FBRS表达水平明显增加(P<0.05),与模型组相比,灵猫方组肝组织中FBRS的表达水平明显降低(P<0.05)。结论中药灵猫方通过降低肝组织纤维化蛋白的表达发挥抗肝纤维化的作用。 曾震军 李曼 孙学华 朱晓骏 高月求关键词:纤维蛋白 肝硬化 慢性乙型肝炎患者CD4^+和CD8^+T细胞亚群的研究 被引量:25 2011年 目的:比较不同感染状态慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血CD4+和CD8+T细胞亚群的差异。方法:收集CHB患者78例,根据感染状态分为乙型肝炎e抗原(HBeAg)阳性且肝功能正常、HBeAg阳性且肝功能异常和HBeAg阴性3组。13例健康志愿者(正常对照组)来自曙光医院体检中心。应用流式细胞术(FCM)检测不同感染状态CHB患者外周血中CD4+CD25+、CD8+CD28-、CD4+CD95+、CD8+CD95+细胞亚群的分布情况,并对各亚群分布情况与HBeAg和HBVD-NA水平的相关性进行分析。结果:与正常对照组相比,HBeAg(+)肝功能正常组的CD4+CD25+/CD4+和CD4+CD95+/CD4+明显升高(P<0.01,P<0.05),3个感染组CD8+CD28-/CD8+值均明显升高(P<0.01);与HBeAg(+)肝功能正常组相比,HBeAg(+)肝功能异常组和HBeAg(-)组的CD4+CD25+/CD4+明显降低(P<0.01),HBeAg(-)组CD8+CD95+/CD8+明显降低(P<0.05),HBeAg(+)肝功能异常组的CD8+CD95+/CD8+明显降低(P<0.01)。CD4+CD25+/CD4+,CD4+CD95+/CD4+与HBVDNA呈正相关(P<0.01,P<0.05),CD8+CD28-/CD8+与HBVDNA和HBeAg均呈正相关(P<0.01)。结论:CHB患者外周血中CD4+CD25+、CD8+CD28-T、CD4+CD95+细胞表达频率增加,可能对慢性乙肝病毒感染过程中的免疫耐受起一定作用。 孙学华 刘巧丽 李曼 高月求关键词:慢性乙型肝炎 乙型肝炎E抗原 HBV启动子克隆及萤光素酶报告基因载体的构建 2013年 目的对HBV启动子基因序列进行分析,克隆并构建S1、S2、ENⅠ/X及ENⅡ/C 4个启动子的萤光素酶报告基因载体。方法用pHBV 1.3作为模板进行PCR扩增目的片段,将获得片段与pGL3-Enhancer荧光素酶报告载体重组构建,分别转染Huh7细胞后,检测萤光素酶活性。结果成功获得121 bp、368 bp、437 bp、237 bp 4个目的扩增片段,并成功构建了S1、S2、ENⅠ/X及ENⅡ/C启动子报告基因载体。结论上述载体的成功构建及初步分析为进一步研究HBV启动子活性及新的抗HBV药物奠定了基础。 余卓 孙学华 李曼 朱晓骏 周振华 乔兵 高月求关键词:HBV 启动子 基因克隆 灵猫方抑制饥饿诱导HepG2.2.15细胞自噬研究 被引量:2 2012年 目的研究灵猫方对饥饿诱导HepG2.2.15细胞自噬的作用。方法选取15只SD大鼠制备灵猫方药物血清,设立厄尔平衡盐缓冲液(Earle's balanced salt solution,EBSS)组、EBSS+空白血清组、EBSS+5倍药物血清组、EBSS+10倍药物血清组及DMEM组,每组3个样本。培养HepG2.2.15细胞1、2、4及6h,构建pEGFP-N1-LC3B表达载体,转染HepG2.2.15细胞,在荧光显微镜下观察细胞浆中GFP-LC3B分布表达变化,计算点状样GFP-LC3B的细胞数与GFP-LC3B转染HepG2.2.15细胞数比值。透射电镜观察各组HepG2.2.15细胞浆内自噬体。Western Blot检测各组HepG2.2.15细胞LC3BⅡ/Ⅰ比值(microtubule-associ-ated protein 1 light chain 3 betaⅡ/Ⅰ)。结果培养2h时,与EBSS+空白血清组比较,EBSS+5倍药物血清、EBSS+10倍药物血清明显抑制GFP-LC3B由散在分布向点状分布改变(P<0.01),电子透射电镜显示EBSS+5倍药物血清组、EBSS+10倍药物血清组抑制自噬体形成,Western Blot检测显示EBSS+10倍药物血清组LC3BⅡ/Ⅰ比值较EBSS+空白血清组明显下降(P<0.01)。结论灵猫方药物血清抑制饥饿诱导HepG2.2.15的自噬。 朱晓骏 孙学华 刘顺庆 李曼 商斌仪 杨婉凤 高月求关键词:HEPG2.2.15细胞 自噬 先天免疫模式识别受体与病毒感染的研究进展 被引量:1 2012年 近年研究发现,先天免疫通过模式识别受体(pathogenrecognitionreceptors,PRR)对外来病原体中病原体相关模式分子(pathogen-associatedmolecularpattern,PAMP)或机体自身产生的蛋白质、或病理代谢产物的损伤相关模式分子(damage-associatedmolecularpattern,DAMP)进行识别(感应性)“取样”,激活胞内信号转导和基因表达程序。 孙学华 金树根 李曼 朱晓骏 商斌仪 高月求关键词:模式识别受体 先天免疫 病毒感染 胞内信号转导 代谢产物 病原体 参葛方防治大鼠非酒精性脂肪肝的实验研究 被引量:14 2012年 目的:研究参葛方对CCl4复合高脂低蛋白饮食诱导的非酒精性脂肪肝模型大鼠的防治作用。方法:运用四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)皮下注射4周(2次/周)复合高脂低蛋白饮食2周诱导非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver,NAFL)动物模型,造模大鼠在造模第1天开始随机分为正常组、模型组、参葛方组及阳性药物对照组,自造模之日起参葛方高、中、低剂量组给药分别为0,10,5 g.kg-1,易善复组剂量为0.076 g.kg-1,并ig给药或蒸馏水。处理后,观察药物对大鼠血清肝功能、肝脏组织病理变化、肝组织甘油三酯(triglyceride,TG)、游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)含量,及丙二醛(malondialdehyde,MDA)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性变化的影响。结果:与模型组相比,参葛方治疗组大鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT,68.00±17.84,52.50±18.03)U.L-1,天冬氨酸转氨酶(AST,382.66±109.78,291.30±74.33)U.L-1显著降低(P<0.01),肝组织脂肪变性明显改善,肝组织SOD活性有升高趋势,肝组织MDA(370.25±61.28,249.82±15.98)nmol.g-1含量显著下降(P<0.01)。结论:参葛方可显著降低CCl4结合高脂低蛋白饮食诱导的大鼠脂肪肝模型中TG和FFA含量,减轻炎症损伤和肝脂肪变性,抗脂质过氧化作用,对NAFL动物模型有理想疗效。 齐艳平 李曼 孙学华 朱晓骏 高月求关键词:非酒精性脂肪肝 动物模型 游离脂肪酸 超氧化物歧化酶 丙二醛 改良后高脂饮食所致大鼠非酒精性脂肪性肝病模型的建立 2013年 目的:探讨非酒精性脂肪性肝病动物模型的一种快速的建立方法。方法:将30只雄性大鼠随机分为正常组和模型组,分别喂养普通基础饲料和改良后高脂饲料10 w。比较两组大鼠血清ALT、AST、DBIL、HDL-C、LDL-C、TC和肝组织匀浆GGT、TG、GSH含量的变化及肝脏组织学变化。结果:与正常组比较,第10周时模型组大鼠血清ALT、AST、DBIL、HDL-C、LDL-C、TC、TC/HDL-C均明显升高(P<0.05);肝组织匀浆GGT、TG含量升高,GSH含量降低(P<0.05)。正常组大鼠肝组织未见明显脂肪变性及炎症,模型组大鼠在小泡性脂肪变性的基础上伴随淋巴细胞浸润和灶状坏死。结论:改良后高脂饲料可加快非酒精性脂肪性肝病的造模进程,值得推广。 李玲 孙学华 李曼 周振华 高月求关键词:非酒精性脂肪性肝病 动物模型 关于慢性乙型肝炎治疗的几点新认识 被引量:2 2012年 本文就慢性乙型肝炎在治疗策略和方法上的几个重要问题提出一些看法,并对现状作了概括评价,同时,就中西医结合防治慢性乙型肝炎提出可行的方案。 王灵台关键词:乙型肝炎 慢性 中西医结合疗法