广州市番禺区科技计划项目(2009-Z-73-1) 作品数:7 被引量:40 H指数:3 相关作者: 梁旭方 方荣 余锐 彭敏燕 张进 更多>> 相关机构: 暨南大学 华中农业大学 更多>> 发文基金: 广州市番禺区科技计划项目 广东省海洋渔业科技推广专项项目 广州市科技计划项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
鳜胰蛋白酶基因外显子3上SNP G169A位点鉴定和四种不同检测方法的比较 被引量:1 2011年 采用PCR产物直接测序法(DS)对鳜(Siniperca chuatsi)胰蛋白酶基因(TRY)进行单核苷酸多态性(SNPs)分析,发现外显子3上的G169A多态性。对312个样品进行分析,共发现三种基因型GG、GA、AA,其基因型频率分别为0.26、0.54、0.20,两个等位基因G和A的基因频率分别为0.53和0.47。用创造限制性酶切位点法PCR(CRS-PCR)、单管双向等位基因专一性扩增(SB-ASA)和单链构象多态性分析(PCR-SSCP)对该SNP位点进行验证。结果表明,CRS-PCR法不能对该SNP位点分型,PCR-SSCP和SB-ASA法可以且准确度分别为100%和96.67%。 于海静 梁旭方 方荣 彭敏燕 朱滔关键词:单核苷酸多态性 直接测序法 单链构象多态性分析 翘嘴鳜人工雌核发育的初步研究 被引量:3 2012年 采用紫外线照射灭活精子,经冷休克诱导染色体加倍的方法对翘嘴鳜(Siniperca chuatsi)进行人工诱导雌核发育育种。灭活翘嘴鳜精子,紫外线照射剂量80 mJ/cm2是最佳的辐射剂量。冷休克结果表明,在0~3℃冰水下,冷休克起始时间为授精后3~7 min均有效,以5 min为最适;冷休克持续时间10-50 min均有效,以30 min最佳。综合以上两项因素,授精5 min后,休克时间持续30 min组的原肠胚存活率和孵化率均为最高,与其他处理组差异显著(P<0.05),此时雌核发育率最高,达到4.72%。 余锐 梁旭方 张进 易提林 符云 叶卫关键词:雌核发育 冷休克 二倍体 鳜脂蛋白脂酶基因SNP及其与食性驯化相关性分析 被引量:5 2011年 鳜食性奇特,通常情况下拒食死饵或配合饲料,在长期的养殖过程中发现:通过驯养,能逐步诱导部分鳜以非活饵为食。通过分子标记定向选育易驯化鳜并使用人工饲料大规模养殖,可以有效解决鳜养殖中存在的成本高、污染严重、病害严重等问题。脂蛋白脂酶基因(Lipoprotein lipase LPL)是脂蛋白代谢的关键酶之一,生理功能是将乳糜微粒和极低密度脂蛋白核心的甘油三酯催化分解为甘油和脂肪酸,以供组织氧化供能和贮存。文章采用PCR产物直接测序法对鳜脂蛋白脂酶基因6、7内含子和6、7、8外显子进行了SNPs遗传多态性检测和分析,探寻LPL基因的等位基因及其基因型在两个食性驯化表型群体中的分布情况。结果在第7外显子处共检测到3个SNPs位点(A25T、G26T和C29G),其中A25T、C29G两个为非同义突变。利用卡方检验分析驯化与未驯化组,结果表明LPL基因3个SNPs位点对鳜的食性驯化不具显著差异性(P>0.05)。将3个SNPs位点不同基因型组合成5种双倍型,卡方检验表明双倍型Dip2在两组中存在显著差异(P<0.05)。文章成功完成鳜LPL基因组部分区段多态性分析,因而可以考虑将LPL基因作为影响鳜食性驯化的候选基因,作为遗传标记,为今后的标记辅助选择育种工作奠定基础,具有广泛的应用前景。 杨宇晖 梁旭方 方荣 彭敏燕 黄志东关键词:脂蛋白脂酶 单核苷酸多态性 食性驯化 高温季节鳜及饵料鱼池塘浮游生物调查研究 被引量:3 2012年 于高温多雨季节对广东省清远市鳜养殖基地的6个鳜(Siniperca chuatsi)及饵料鱼养殖池塘发病前后的浮游生物组成进行了调查分析。结果表明,易发病池塘,水中浮游生物总生物量比其他池塘略低。浮游植物优势种均为微囊藻(Microcystis sp.),颤藻(Oscillatoria sp)等蓝藻。此外,池塘出现出血病症状时,浮游生物的马格利夫(Margalef)丰度指数和香农(Shannon-weaver)多样性指数均处于较低水平,这两项指数可作为池塘发病的预警参考指标。在实际生产中,平时应注意调节水质,以稳定水中浮游生物的数量和组成,在天气不佳时更应多加巡塘,以便及早发现病情。 程炜轩 梁旭方 余锐 符云 叶卫关键词:池塘养殖 浮游植物 浮游动物 翘嘴鳜淀粉酶基因SNPs和微卫星位点多态性的检测 被引量:2 2013年 本研究主要检测翘嘴鳜淀粉酶(amylase,AMY)基因的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)和微卫星位点多态性.实验采用PCR产物直接测序法(PCR-direct sequencing,PCR-DS)检测翘嘴鳜AMY基因组序列的SNPs和微卫星位点,并使用创造限制酶切位点PCR法(created restriction sites PCR,CRS-PCR)和PCR-DS法对SNPs进行分型,应用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测AMY基因微卫星位点的多态性.实验结果发现AMY基因第1内含子有一个SNP位点A1,第5内含子有3个SNPs位点(A2、A3和A4);此外,第5内含子中还存在一个微卫星位点B1,共检测到4个等位基因,有9种单倍型.在翘嘴鳜群体中,4个SNP位点呈中度遗传多样性,而微卫星位点表现出高度遗传多样性. 彭敏燕 梁旭方 方荣 于海静 朱滔关键词:淀粉酶 翘嘴鳜 单核苷酸多态性 微卫星 翘嘴鳜与斑鳜杂交F_1代食性驯化及主要形态性状的通径分析 被引量:21 2013年 对翘嘴鳜(♀)和斑鳜(♂)杂交F1代进行程序性的驯化,挑选出易驯化和不易驯化的2组。采用一维方差分析和主成分分析研究了易驯化和不易驯化杂交鳜的形态差异;对易驯化杂交鳜全长、体长、体宽、体高、吻长、头长、眼径、眼间距、尾长、尾柄高、尾柄长和体质量等12个性状进行了相关分析和通径分析。试验结果显示,所选易驯化杂交鳜F1代体长、体高和眼径3个形态性状对体质量的相关系数均达到极显著水平(P<0.01),对体质量的通径系数亦达到极显著水平(P<0.01),体长对体质量的直接影响最大,通径系数达0.435;所选3个形态性状与体质量的共同决定系数r2=0.949,说明所选性状是影响体质量的主要形态性状;应用逐步多元回归分析建立了以体质量为依变量(Y),体长(X2)、体高(X4)和眼径(X7)为自变量的回归方程:Y=-15.527+0.127 X2+0.344 X4+0.903 X7。试验结果说明,翘嘴鳜和斑鳜杂交F1代存在易驯化和不易驯化个体的食性分化;用体长、体高和眼径估计体质量的多元回归方程为易驯化杂交鳜选择育种提供了理论依据。 张进 梁旭方 易提林 窦亚琪 王乾 余锐 符云 叶卫关键词:食性驯化 形态性状 通径分析 鳜胃蛋白酶基因外显子7上SNP检测及其与食性驯化相关分析 被引量:6 2011年 本研究旨在探寻胃蛋白酶(pepsinogen,PEP)基因的等位基因及其基因型在不同食性驯化表型鳜(Siniperca chuatsi)群体中的分布情况。通过2周食性驯化,挑选出最易驯化和最不易驯化的2组,提取各组鳜鳍条组织DNA,采用PCR产物直接测序法(direct sequencing,DS)、限制性片段长度多态性技术(restriction fragment length poly-morphism,RFLP)和创造限制酶切位点PCR法(created restriction site PCR,CRS-PCR)对鳜胃蛋白酶基因5、6、7、8内含子和6、7、8外显子进行SNPs遗传多态性检测和分析。结果共检测到2个SNPs位点(C1T和C52 T),均为同义突变,利用卡方检验分析,结果表明PEP基因的这2个SNPs位点分别与鳜的食性驯化不具显著相关性(P>0.05)。将2个SNPs位点的不同基因型组合成5种双倍型,卡方检验表明双倍型Dip1与Dip5在两组中存在显著差异(P<0.05)。本研究成功完成鳜PEP基因组多态性分析,因而可以考虑将PEP基因作为影响鳜食性驯化的候选基因。 方荣 梁旭方 杨宇晖 杜嵇华 曹亮 叶卫 符云关键词:胃蛋白酶 SNP 食性驯化