“十一五”国家科技支撑计划(2007BAD47B03-5) 作品数:3 被引量:25 H指数:2 相关作者: 李蒙 于红 殷幼平 王中康 吴瑜佳 更多>> 相关机构: 重庆大学 更多>> 发文基金: “十一五”国家科技支撑计划 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 更多>>
柑橘溃疡病菌快速诊断胶体金速测卡的研制 被引量:2 2012年 将制备并提纯的抗Xcc单克隆抗体、多克隆抗体及重组抗体,采用间接ELISA方法对比其效价和特异性,筛选用于胶体金速测卡的最优抗体;采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记抗Xcc单抗Xcc-2D8,固定于金标垫上;利用双抗夹心原理,将单抗Xcc-2D6和羊抗鼠抗体分别固定于硝酸纤维素膜上,作为检测线(T线)和质控线(C线),经试验条件优化,组装胶体金速测卡密封干燥保存。对Xcc菌悬液及柑橘样本浸泡液进行检查。结果表明ELISA方法筛选出2株特异性强、稳定性好的抗体(Xcc-2D8效价为1:128 000倍、Xcc-2D6效价为1:256 000倍),应用于胶体金速测卡的研发;所研制速测卡对Xcc菌悬液的最低检测下限为1×103~1×104 cfu/mL,对多个地区的206份柑橘样本进行实际检测所得结果与qPCR方法所得结果具有较高一致性(kappa值=95.15%),混杂的柑橘组织液对检测结果无影响,检测时间控制在10min以内,检测常见细菌及植物病菌显示特异性良好,各批次速测卡无批间差异,速测卡保存方便稳定性良好。 殷幼平 吴瑜佳 于红 李蒙 王中康关键词:胶体金 单克隆抗体 免疫层析 荧光定量PCR技术研究进展及其应用 被引量:21 2009年 荧光定量PCR技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃,更以其特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、速度快、全封闭反应等优点而成为分子生物学研究的重要工具,并用于生物特异核苷酸的检测。主要概述了荧光染料法、TaqMan探针法、分子信标法、Lux Primer 4种荧光定量技术的原理、特点以及荧光定量PCR技术在各方面的应用。 侯宇关键词:荧光探针法 DNA扩增