国家自然科学基金(3977066)
- 作品数：16 被引量：28H指数：3
- 相关作者：金宁一郭焱张应玖郭志儒殷震更多>>
- 相关机构：解放军军需大学北华大学长春中医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- HIV-gag基因克隆、表达及对免疫应答的影响
- 2002年
- 实验首先以pcDNA3.1( +)为载体 ,构建了含HIV gag基因序列核酸疫苗质粒 pGP。将此疫苗质粒在体外转染BHK 2 1细胞 ,以ELISA法和IFA法检测到结构蛋白得以表达。将此疫苗质粒免疫小鼠 ,免疫学指标检测结果表明 ,免疫小鼠对刀豆蛋白A、脂多糖诱导的细胞增殖能力显著增强 ,提示 pGP能有效地促进细胞与体液免疫应答。
- 郭焱郭巍张应玖金宁一
- 关键词：GAG基因克隆
- HIV-1重组核酸疫苗质粒诱导小鼠免疫应答的研究被引量：2
- 2002年
- 目的 研究白细胞介素 6(IL 6)对人类免疫缺陷病毒 (HIV)gp1 2 0基因免疫小鼠的调节作用。方法 构建表达中国流行株HIV 1B亚型gp1 2 0基因的核酸疫苗质粒pGP及共表达中国流行株HIV 1B亚型gp1 2 0基因与IL 6基因的核酸疫苗质粒pGPIL 6 ,检测其在哺乳动物细胞中的表达并将上述两种质粒注射Balb/c鼠 ,检测小鼠产生的CD4+ 和CD8+ T细胞数情况及诱导CTL反应能力。结果 以间接免疫荧光法 (IFA)检测到gp1 2 0在哺乳动物细胞中得到表达。pGPIL 6免疫鼠 ,小鼠产生的CD4+ 和CD8+ T细胞数及诱导产生CTL反应的能力明显高于单独注射gp1 2 0的小鼠。结论 协同应用IL 6基因可明显加强HIV 1gp1 2 0基因免疫效果 ,为中国流行株HIV
- 郭焱金宁一张应玖郭志儒夏志平
- 关键词：人类免疫缺陷病毒白细胞介素6艾滋病毒AIDS疫苗
- HIV-1_(CN)gp120与IL-6基因共表达质粒的构建及其免疫调节作用被引量：8
- 2001年
- 目的 研究白细胞介素 6对人类免疫缺陷病毒 (HIV)gp1 2 0基因免疫小鼠后效果的调节作用。方法 构建表达中国流行株HIV 1gp1 2 0基因的核酸疫苗质粒pGP及共表达中国流行株HIV 1gp1 2 0基因与IL 6基因的核酸疫苗质粒pGPIL 6 ,并检测其在哺乳动物细胞中的表达。将上述两种质粒经胫前肌注射BALB/c鼠 ,检测gp1 2 0抗体的产生情况及ConA和LPS诱导的T细胞增殖能力。结果 以间接免疫荧光法 (IFA)检测到gp1 2 0在哺乳动物细胞中得到表达。pGPIL 6与pGP均可刺激小鼠产生抗gp1 2 0抗体 ,协同注射gp1 2 0和IL 6基因的小鼠产生的抗体滴度明显高于单独注射gp1 2 0的小鼠。pGPIL 6免疫鼠对ConA和LPS诱导的T细胞增殖能力明显高于单独注射gp1 2 0的小鼠。结论 协同应用IL 6基因可明显加强HIV 1gp1 2 0基因的免疫反应 ,为中国流行株HIV 1核酸疫苗的可行性提供了重要实验依据。
- 郭焱金宁一张应玖夏志平王宏伟郭志儒殷震
- 关键词：人类免疫缺陷病毒
- HIV-1中国流行株gag-hIL-2重组痘苗病毒与pIRES-gag-hIL-2核酸疫苗联合免疫的实验研究被引量：1
- 2002年
- 目的 将HIV 1中国流行株B亚型gag和hIL 2基因在天坛株痘苗病毒中进行共表达 ,与核酸疫苗联合免疫 ,评价免疫效果 ,为新型艾滋病疫苗开发研制奠定基础。方法 将HIV 1中国流行株gag hIL 2基因片段插入到痘苗病毒载体pJ38启动子下游 ,经同源重组和血凝素阴性空斑筛选重组痘苗病毒 ,SDS PAGE、Westernblot检测目的蛋白。以重组病毒和核酸疫苗免疫BALB c小鼠 ,进行淋巴细胞转化实验及血清抗体的细胞免疫和体液免疫指标检测。结果 获得了重组痘苗病毒vJ38gag IL 2 ,具有更好的免疫原性 ,3rVV效果好于 2rVV ,以 2rVV DNA混合免疫效果最好。结论 重组痘苗病毒vJ38gag IL
- 王莉馨林军王宏伟王洪军金宁一
- 关键词：联合免疫HIV-1HIL-2核酸疫苗
- 中国流行株HIV及其与细胞因子基因共表达核酸疫苗质粒的构建及表达
- 2003年
- 以表达中国流行株HIV-1gp120基因的核酸疫苗质粒pGP及共表达中国流行株HIV-1gp120基因与IFN基因的核酸疫苗质粒pG-PIFN转染BHK-21细胞,以间接免疫荧光鉴定其表达产物。将上述两种质粒经胫前肌注射BALB/c鼠,检测gp120抗体的产生情况及ConA和Lps诱导的T细胞增殖能力。结果显示,荧光显微镜下pGPIFN转染细胞可见绿色荧光而pGP转染细胞未见绿色荧光。pGPIFN与pGP均可刺激小鼠产生抗gp120抗体,协同注射gp120和IFN基因的小鼠产生的抗体滴度明显高于单独注射gp120的小鼠。pGPIFN免疫鼠对ConA和Lps诱导的T细胞增殖能力明显高于单独注射gp120的小鼠。实验结果表明,协同应用IFN基因可明显加强HIV-1gp120基收稿日期:2002-07-19基金项目:国家自然科学基金项目(3977066);国家杰出青年基金项目(39825119)作者简介:郭 焱(1963-),女,吉林省长春市人,长春中医学院基础医学部副教授,硕士,主要从事分子病毒学研究工作。因的免疫反应,为中国流行株HIV-1核酸疫苗的可行性提供了重要实验依据。
- 郭焱郭巍顾红缨李璐于伟光刘斌罗晶
- 关键词：细胞因子人类免疫缺陷病毒基因表达
- vJ38gag/IFNα-2b基因共表达核酸疫苗免疫程序的优化
- 2004年
- 目的 观察国际流行株HIV - 1gag与IFNα - 2b基因共表达颗粒化抗原疫苗与质粒DNA核酸疫苗免疫程序优化的效果。方法 将质粒 pJ38gag/IFNα- 2b经脂质体介导转染RK细胞 ,并在痘苗病毒中共表达HIV - 1gag与IFNα - 2b基因 ,以间接免疫荧光与斑点酶联免疫法鉴定其表达产物。以表达产物与质粒DNA联合免疫小鼠实验 ,检测淋巴细胞转化率、细胞毒性T细胞杀伤活性、CD+ 4 、CD+ 8细胞计数与体液免疫水平。结果 pJ38gag/IFNα - 2b基因表达的颗粒化抗原疫苗具有良好的免疫原性 ,3vJ38gag/IFNα- 2b +pJ38gag/IFNα- 2b联合免疫效果优于vJ38gag/IFNα - 2b单独免疫。 结论 pJ38gag/IFNα- 2b基因表达的颗粒化抗原疫苗能诱导机体产生细胞免疫与体液免疫。
- 王继群王洪军吴扬凡文博王立强于淼殷震
- 关键词：痘苗病毒DNA疫苗免疫程序
- HIV-1_(CN)嵌合基因与IL-2基因共表达产物诱导产生CTL的实验研究
- 2001年
- 经脂质体介导共表达中国流行株HIV 1gag gp12 0基因与IL 2基因的核酸疫苗质粒 pGPIL 2转染BHK 2 1细胞 ,以间接免疫荧光法鉴定其表达。取 pGPIL 2免疫鼠脾细胞 ,检测 pGPIL 2诱导的细胞毒性T细胞杀伤活性。杀伤实验结果证明 ,经基因免疫获得的CTL效应细胞 ,可杀伤HIV 1CN嵌合基因转染的靶细胞。提示pGPIL 2可有效诱导CTL的产生 ,该研究结果为进一步设计中国流行株HIV 1核酸疫苗提供了重要实验依据。
- 郭焱郭巍张学英
- 关键词：嵌合基因IL-2基因细胞毒性T细胞HIV病毒
- 中国流行株HIV-1gag和hIL-2/hIL-6核酸疫苗构建与实验免疫研究被引量：8
- 2001年
- 目的探讨中国流行株 HIV- 1gag与 h IL - 2 /h IL - 6共表达重组核酸疫苗质粒的免疫效果。方法以核酸疫苗质粒 p IRES1neo为表达载体 ,构建重组核酸疫苗质粒 p IRES1- gag、p IRES1- gag- h IL- 2、p IRES1- gag- h IL- 6 ,通过间接免疫荧光试验、Dot- EL ISA检测 gag/h IL - 2 /h IL - 6基因的表达产物。另将此重组核酸疫苗质粒免疫 Balb/c小鼠 ,进行淋巴细胞转化试验、CD4+ 、CD8+ T淋巴细胞数量测定、细胞毒性 T淋巴细胞 (CTL )特异性杀伤作用检测及血清抗体检测 ,结果构建的重组质粒转染 BHK细胞后可表达目的基因 ,免疫小鼠后可有效地刺激淋巴细胞增殖、诱导特异性 CTL 反应 ,当和 h IL- 2 /h IL- 6共表达时免疫效果更加显著。讨论与 Gag蛋白共表达的 h IL- 2 /h IL- 6能够进一步增强免疫鼠的细胞免疫与体液免疫水平 ,构建的重组质粒为 HIV-
- 秦云龙金宁一罗坤李凡王宏伟王莉馨张永生殷震
- 关键词：HIV-1GAG蛋白白细胞介素-2
- 中国流行株HIV-1gp120及其与IFNα基因共表达核酸疫苗质粒的构建及表达
- 2000年
- 目的 研究pGP和pGPIFNα在真核细胞中的表达。方法 以表达中国流行株HIV－1gp120基因的核酸疫苗质粒pGP及其表达中国流行株HIV－1gp120基因与IFNα基因与IFNα基因的核酸疫苗质粒pGPIFNα。转染BHK－21细胞，以间接免疫荧光鉴定其表达产物。结果 荧光显微镜下，pGP和pGPIFNα转染细胞可见绿色荧光，而HK－21细胞和空质粒则不见绿色荧光。结论 pGP和pGPIFNα可在真核细胞中表达目的蛋白gp120。
- 郭焱郭巍
- 关键词：结构基因核酸疫苗
- 共表达HIV-1与IL-6核酸疫苗质粒诱导小鼠免疫原性的研究被引量：8
- 2002年
- 郭焱金宁一张应玖夏志平郭志儒
- 关键词：艾滋病毒白细胞介素6免疫原性小鼠
