江苏省自然科学基金(BK2006010) 作品数:3 被引量:13 H指数:3 相关作者: 方纬 孟庆乐 王峰 王自正 郑玉民 更多>> 相关机构: 中国医学科学院阜外心血管医院 江苏省人民医院 苏州大学 更多>> 发文基金: 江苏省自然科学基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
^99Tc^m—His10—Annexin Ⅴ探测非小细胞肺癌细胞凋亡的实验研究 被引量:5 2008年 目的探讨^99Tc^m标记带有10个连续组氨酸的膜联蛋白Ⅴ(His10-Annexin Ⅴ)探测荷非小细胞肺癌(NSCLC)裸小鼠模型化疗后肿瘤细胞凋亡的可行性。方法用^99Tc^m直接标记His10-Annexin Ⅴ。荷H460 NSCLC肿瘤裸小鼠模型20只,按体表面积以100mg/m^2剂量紫杉醇化疗诱导,分成未治疗(对照)、化疗诱导后24,48,72h共4组.^99Tc^m-His10-AnnexinⅤ显像探测化疗前后肿瘤组织细胞凋亡,计算肿瘤/对侧正常肌肉组织放射性比值(T/NT),测定每克组织百分注射剂量率(%ID/g)。以^99Tc^m-IgG显像为对照,确定肿瘤的非特异性摄取。用流式细胞术(FCM)测定肿瘤组织活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase-3),光学显微镜HE及原位末端标记法(TUNEL)染色测定凋亡指数。采用SPSS12.0软件进行统计学处理,运用单因素方差分析和直线相关分析(Pearson)。结果”^99Tc^m -His10-Annexin Ⅴ放化纯为(98.01±1.67)%。注射^99Tc^m- His10-Annexin Ⅴ后2h即可得到清晰图像,化疗诱导组肿瘤部位可见明显的放射性浓聚,化疗后24,48,72h组的T/NT值分别为2.63±0.76,3.41±0.90,3.85±0.62;对照组T/NT值为1.42±0.19,F值分别为12.064,23.322,70.177,P均〈0.01。未治疗组肿瘤仅有少量放射性摄取,为(1.09±0.18)%ID/g,化疗后肿瘤摄取明显增加,24,48,72h肿瘤摄取分别为(2.55±0.73)、(3.60±1.09)、(3.73±0.97)%ID/g,明显高于未治疗组(F值分别为18.733,20.624,35.626,P均〈0.01)。^99Tc^m-IgG显像化疗组及对照组肿瘤均未见明显放射性浓聚。未治疗组活化Caspase-3为(3.70±0.74)%,化疗后24,48,72h分别为(23.46±2.23)%、(62.85±6.13)%、(70.44±6.09)%,3个化疗诱导组和未治疗组相比差异均有统计学意义(F值分别为354.610,459.438,591.052� 郑玉民 王自正 颜珏 杨翔 华子春 方纬 孟庆乐 王峰关键词:细胞凋亡 锝标突触结合蛋白Ⅰ C2A片段探测肺癌凋亡的实验研究 被引量:7 2007年 目的探讨锝标突触结合蛋白ⅠC2A片段(^99mTc-C2A)探测非小细胞肺癌(NSCLC)化疗后,肿瘤细胞凋亡的情况。方法采用2-IT修饰后配体交换法标记合成^99mTc-C2A。H460 NSCLC肿瘤裸鼠25只,以25 mg/kg紫杉醇化疗诱导,分成治疗前、化疗诱导后12、24、48、72 h共5组,^99mTc- C2A显像探测化疗前后各组肿瘤组织细胞凋亡,勾画感兴趣区,计算肿瘤与对侧正常组织放射性比值(T/NT)。显像结束后,即刻断颈处死,取出肿瘤及各脏器,测定每克组织百分注射剂量率(%ID/g)。瘤体分成两部分,一部分通过流式细胞术测定肿瘤组织活化半胱氨酸天冬蛋白水解酶(caspase-3),另一部分通过光镜HE及TUNEL染色测定凋亡指数。结果^99mTc-C2A显像显示,治疗前肿瘤有少量放射性摄取,肿瘤摄取为(1.21±0.51)%ID/g;化疗诱导后肿瘤摄取(%ID/g)明显增加,12、24、48 h肿瘤摄取分别为2.82±0.90、3.13±0.48和3.52±1.18。治疗前肿瘤T/NT为1.48±0.23;12、24、48 hT/NT分别为1.79±0.34、2.23±0.33和2.78±0.34,各组之间差异均有统计学意义(P〈 0.05)。未化疗组活化caspase-3为2.33±0.63%;紫杉醇化疗后,大量caspase-3被激活,12、24、48 h分别为(10.03±2.15)%、(33.80±5.04)%和(57.80±11.29)%。光镜HE及TUNEL染色法显示,未化疗组有散在细胞发生凋亡,化疗诱导后12、24、48、72 h大批细胞发生凋亡,12、24、48 h每个高倍视野中的凋亡细胞数分别为(8.25±2.27)%、(34.43±4.73)%和(71.88±11.88)%。肿瘤摄取同活化caspase-3及凋亡细胞数有很好的相关性。结论^99mTc-C2A显像可早期探测实体肿瘤化疗后凋亡,并和活化caspase-3及凋亡指数呈直线相关。C2A有望成为探测细胞凋亡的分子探针,进而早期预测和评价肿瘤疗效。 王峰 方纬 季顺东 孟庆乐 立彦 樊克武 王自正关键词:凋亡 非小细胞肺癌 核素显像 ^(99)Tc^m-Annexin V衍生物的制备及其生物分布和凋亡显像 被引量:5 2007年 目的探讨^(99)Tc^m 直接标记带有10个连续组氨酸的膜联蛋白 V(Annexin V)衍生物的可行性,研究其在健康小鼠体内的分布和肺癌裸鼠模型凋亡显像。方法直接标记法制备^(99)Tc^m-Annexin V 衍生物,并测产物放化纯、胶体含量及健康小鼠体内不同时间点(5,30 min 和1,2,4,6,12,24 h)的生物分布,DAS 2.0软件拟合计算药代动力学参数。建立荷 H460非小细胞肺癌裸鼠模型,分为紫杉醇诱导化疗组(5只)和未治疗对照组(5只)。紫杉醇诱导化疗后48 h,于裸鼠尾静脉注射^(99)Tc^m-Annexin V 衍生物18.5 MBq,2和4 h 时进行凋亡显像,勾画 ROI 并计算肿瘤与对侧正常组织(T/NT)放射性比值。结果放化纯达(98.01±1.67)%,3 h 后放化纯仍可达(95.45±1.34)%,胶体含量为(3.31±1.37)%。健康小鼠体内分布实验表明肾脏对该示踪剂摄取最高,肝、脾摄取较少。DAS 2.0软件拟合得到时间-放射性曲线符合二室模型特征,分布相半衰期(T_(1/2α))为(21.18±5.95)min,清除相半衰期(T_(1/2β))为(69.32±0.10)min。荷瘤鼠显像示,给药后2 h 即可获得清晰的图像,紫杉醇诱导化疗组2和4 h 的 T/NT 比值为3.85±1.10和4.63±0.97,明显高于对照组(1.60±0.29和1.71±0.43,P<0.01)。结论该Annexin V 衍生物易于^(99)Tc^m直接标记,方法简便,标记物在血液中清除迅速,肝、脾摄取少,易得到高清晰图像。 郑玉民 王自正 杨翔 华子春 王峰 方纬 孟庆乐 范我关键词:膜联蛋白V 放射性核素显像