国家自然科学基金(30972057)
- 作品数:5 被引量:40H指数:4
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- 相关领域:生物学轻工技术与工程农业科学更多>>
- 植物叶绿素降解途径及其分子调控被引量:22
- 2011年
- 文章介绍了近年来在叶绿素降解产物结构解析和关键酶基因克隆方面的最新成果,以及在此基础上的叶绿素降解途径修正及其分子调控机理研究。
- 唐蕾毛忠贵
- 关键词:叶绿素降解产物基因克隆降解途径分子调控
- 芥蓝叶片过氧化物酶稳定性的研究被引量:4
- 2012年
- 过氧化物酶(POD)具有多种生理功能和应用价值。以提高芥蓝叶片POD稳定性为目的,从幼苗的叶片中提取POD,考察温度、pH对酶活性的影响;以及添加糖类(葡萄糖、蔗糖、海藻糖)、多元醇类(甘油、山梨醇)、无机盐类(氯化钙、硫酸镁)和蛋白质类(白蛋白、明胶)对提高POD稳定性的作用。结果表明:芥蓝POD的最适pH为5.6,最适温度为55℃,体积分数为1%的甘油、1g/L山梨醇、1g/L海藻糖以及1g/L氯化钙、1g/L硫酸镁和1g/L明胶能够提高POD的稳定性,其中氯化钙和明胶的效果最为明显,与对照比较分别提高了28%和26%。添加保护剂能够有效地提高芥蓝POD的稳定性。
- 王趁趁丁超唐蕾王海鸥毛忠贵
- 关键词:芥蓝过氧化物酶稳定性
- 圆二色谱表征芥蓝抗坏血酸过氧化物酶变性过程中的结构变化被引量:6
- 2014年
- 圆二色谱(CD)是一种特殊的吸收光谱,蛋白质的二级结构如α-螺旋、β-折叠、β-转角在远紫外区(190~250nm)都具有特征性的CD图谱。为了了解芥蓝抗坏血酸过氧化物酶(BaAPX)在变性过程中活性变化和结构变化的关系,动态监测了不同时间、温度及浓度条件下BaAPX的比酶活及远紫外CD图谱,并利用CD分析软件Dichroweb计算了BaAPX中四种二级结构的百分含量。结果表明:BaAPX属于全α型蛋白,α-螺旋的百分含量与比酶活之间存在比较明显的正相关关系。在低浓度低温的变性过程中,BaAPX发生了初始态(N态)→α-螺旋最少态(R态)一步结构变化;在高浓度低温的变性过程中,BaAPX发生了N态→平衡态(T态)一步结构变化;在热处理后低温复性的变性过程中,BaAPX发生了N态→R态→T态两步结构变化。
- 席加富唐蕾张建华张宏建陈旭升毛忠贵
- 关键词:圆二色谱芥蓝抗坏血酸过氧化物酶
- 大肠杆菌中芥蓝抗坏血酸过氧化物酶基因的高效表达
- 2013年
- 将芥蓝抗坏血酸过氧化物酶(Apx)在大肠杆菌中高效表达。以芸薹属植物apx保守区基因序列为基础,利用PCR,RACE技术从芥蓝中扩增得到全长为753 bp的芥蓝apx编码基因,用DNAMAN V6软件分析该基因氨基酸组成,计算出蛋白分子质量约为27.6 kDa。通过构建重组质粒pET-28a-apx,转化大肠杆菌E.coli BL21,实现了芥蓝Apx的可溶性表达。通过单因素实验优化诱导表达条件,结果表明:0.2 mmol/L IPTG,23℃诱导培养10 h为最佳诱导条件。采用Ni2+亲和层析,纯化了重组蛋白,并得到重组酶最适反应条件为pH 6.5和40℃。为进一步研究Apx的生理特性和功能打下基础。
- 黄加保唐蕾华子安毛忠贵
- 关键词:芥蓝抗坏血酸过氧化物酶大肠杆菌
- 低温贮藏和短波紫外线辐照对芥蓝采后叶绿素降解及脱镁叶绿素酶活性的影响被引量:10
- 2013年
- 采后叶绿素降解造成绿叶蔬菜失绿,直接影响产品的感官品质和货架寿命。以研究芥蓝采后叶绿素降解和脱镁叶绿素酶(PPH)之间的关系为目的,考察了温度以及短波紫外线(UV-C)辐照对贮藏过程中芥蓝叶绿素含量及脱镁叶绿素酶活性变化的影响。结果表明常温22℃贮藏时,PPH活性在前期快速上升,第3d时约为第0d的200%,而在低温4℃时酶活仅为第0d的135%,第3d时叶绿素a的含量是常温时的2.8倍;UV-C辐照降低了PPH活性,第1dPPH酶活仅上升14%,而对照则上升50%,第5d时叶绿素a的含量是对照的1.3倍。因此低温和UV-C辐照抑制了贮藏过程中PPH酶活性的快速上升,从而降低了叶绿素降解的速度。
- 刘振唐蕾王海鸥毛忠贵张玲王武
- 关键词:芥蓝叶绿素