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广东省科技计划工业攻关项目(2006A20301001): 作品数：7 被引量：59H指数：4; 相关作者：廖明刘红吴志新辛朝安马秀丽更多>>; 相关机构：华南农业大学山东省农业科学院广东省农业科学院更多>>; 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目山东省自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>; 相关领域：农业科学生物学更多>>

鸭源呼肠孤病毒DRV-GZ株S2基因的序列分析及其表达被引量：11: 2008年; 采用RT-PCR方法从鸭源呼肠孤病毒DRV-GZ株中扩增出了S2基因片段,将其克隆到表达载体pET-28a(+)中,测序验证后转化入表达宿主菌RosettaTM2(DE3)plysS,进行IPTG诱导表达。结果表明,重组菌可表达出相对分子质量约为50 000的重组融合蛋白,在浓度为0.6 mmol/L的IPTG诱导4 h的情况下表达效果最好。表达的蛋白以包涵体的形式存在于菌体中。表达产物经Ni柱纯化后可得到纯度较高的目的蛋白。经Western-blot分析,所纯化的蛋白能与抗呼肠孤病毒DRV-GZ株阳性血清进行特异性的免疫印迹反应,证实表达的蛋白具有较好的反应原性。; 刘红郁宏伟朱朝辉吴志新李苏芝廖明; 关键词：S2基因克隆原核表达纯化免疫印迹

华南地区DHV-1分离株全基因组的克隆与序列分析: 本研究根据GenBank中收录的8个DHV-Ⅰ全基因组序列,利用DNAStar软件对基因序列进行同源性分析,利用Primer 5.0软件在DHV基因组保守区设计合成7对引物,分别对临床分离野毒株及本实验室弱化的和参考疫苗...; 张伟季艳菊陈芳艳廖明王林川; 文献传递

种鸡禽流感(H5+H9)二价灭活疫苗免疫程序的研究: 本试验设计不同的免疫程序,用禽流感(H5+H9)二价灭活疫苗(H5N1 Re-1+H9N2 Re-2株)免疫黄羽种鸡,通过对H5、H9的HI抗体滴度监测,探讨H5、H9的HI抗体消长规律及推荐禽流感(H5+H9)二价灭活...; 蔡弋亓文宝徐成刚陈晓春罗开键肖智远廖明; 关键词：禽流感二价灭活疫苗免疫程序种鸡; 文献传递

番鸭细小病毒型”白点病”PCR检测方法的建立与初步应用: 前言:番鸭细小病毒型"白点病",又叫番鸭"肝白点病"、"花肝病"、"白点病",本病主要侵害三周龄以内的雏番鸭。番鸭细小病毒型"白点病"通常与番鸭小鹅瘟以及番鸭"三周病"混合感染,加之番鸭小鹅瘟与番鸭"三周病"临床症状和病...; 张伟季艳菊陈芳艳廖明王林川; 文献传递

鸭病毒性肝炎病毒VP1基因表达及其抗体检测ELISA方法的建立被引量：24: 2008年; 【目的】研究DHV VP1基因在大肠杆菌中的表达,并以纯化的重组蛋白为抗原建立鸭病毒性肝炎抗体检测ELISA方法。【方法】采用RT-PCR技术,扩增VP1基因,与pMD18-T载体进行连接,构建DHV VP1基因克隆重组质粒。然后定向插入到pET-32a(+)表达载体,筛选原核表达载体pET-32a-VP1,进行ITPG诱导表达分析。以纯化的重组蛋白为抗原建立间接ELISA方法并初步应用于临床。【结果】DHV VP1基因可在大肠杆菌中稳定、高效地表达。Western blot检测表明,表达的重组蛋白能与鸭肝炎阳性血清发生特异性反应。确定间接ELISA方法的抗原最佳包被浓度为5μg/孔,血清最佳稀释度为1∶100,临界值为OD450值≥0.302,建立的ELISA方法具有较好的敏感性、特异性和重复性。通过对80份血清样品的检测表明,该方法与中和试验的符合率为97.5%,初步临床应用结果表明该方法可用于雏鸭母源抗体和免疫后抗体的消长变化的检测。【结论】以大肠杆菌表达的DHV VP1重组蛋白为抗原建立的间接ELISA方法可用于鸭病毒性肝炎抗体的检测。; 马秀丽宋敏训于可响廖明辛朝安; 关键词：鸭肝炎病毒 VP1基因 ELISA 抗体

一株2007年H5N1亚型AIV广东分离株的基因组分析: 禽流感(Avian Influenza,AI)作为严重危害养禽业的动物传染病一直受到广泛关注。自1997年香港发生H5N1亚型禽流感病毒(AIV)感染人并引起死亡的病例后,禽流感的公共卫生意义愈发显得重要。; 齐岩陈晓春单芬胡玥李小康焦培荣亓文宝廖明; 文献传递

华南地区小鹅瘟和番鸭“三周病”分离野毒株部分VP基因的序列差异分析被引量：6: 2009年; 为了研究华南地区小鹅瘟病毒(GPV)和番鸭"三周病"病毒(MDPV)分离野毒株部分VP基因的序列差异情况,试验从华南地区分离到疑似5株小鹅瘟病毒和2株番鸭"三周病"病毒野毒,并分析其变异情况。结果表明:华南地区小鹅瘟病毒分离野毒株的VP基因均与小鹅瘟病毒具有较近的亲缘关系,说明VP基因可能和致病性有关;番鸭"三周病"病毒分离野毒株的VP基因与小鹅瘟病毒的相似性相对较低,但均与GenBank注册登陆的小鹅瘟病毒处于同一较大分支上。; 张伟季艳菊陈芳艳廖明王林川; 关键词：小鹅瘟 VP基因

Ⅰ型鸭肝炎病毒鸡胚致弱毒株的选育被引量：1: 2009年; 将分离的一株DHV-I野毒株经鸡胚传代,培育出DHV-I的80代鸡胚致弱毒GFS99株。该弱毒株对1日龄雏鸭无致病性;在雏鸭体内连续盲传5代,也未出现毒力返强现象;1日龄雏鸭免疫100倍稀释的尿囊液弱毒GFS99后7天攻强毒GQY07株,保护率高达100%,且7日龄时即可产生高峰期中和抗体,后抗体效价有所下降,但易感期的3周内抗体保持较高水平;另外该弱毒的外源病原检验结果均为阴性和特异性实验结果良好。综上述结果表明,该弱毒GFS99株无外源病毒污染、特异性强、安全性好、遗传性稳定、免疫原性强,可以作为制备DHV-I弱毒疫苗的候选株。; 张伟季艳菊陈芳艳廖明王林川; 关键词：弱毒株选育

一种新病毒性鸭病的初步研究被引量：14: 2007年; 2006年2月初,广东某市出现了一种以肿头、软脚、流泪,拉黄绿色稀粪,肝脏出血和坏死及食道泄殖腔有溃疡和结痂为主要特征的鸭病。我们对该病进行了流行病学调查和实验室的初步分离、鉴定,发现该病属于一种病毒病,病毒无血凝活性,用鸭瘟病毒和呼肠孤病毒的通用引物扩增到了相应大小的条带,而用副黏病毒、禽流感病毒通用引物未扩增到目的片段。; 刘红吴志新郁宏伟罗开健梁敏刘胜安任涛徐成刚曹伟胜廖明; 关键词：鸭病通用引物呼肠孤病毒绿色稀粪血凝活性

北京鸭呼肠孤病毒σA、σB蛋白的二级结构及B细胞抗原表位的预测被引量：1: 2009年; 应用SOPMA方法和DNAStar Protean软件综合分析了北京鸭呼肠孤病毒分离株DRV-GZ株的σA、σB蛋白的二级结构、亲水性、表面特性、柔韧性和抗原指数，并对各个蛋白的B细胞抗原表位进行了预测．结果表明，σA蛋白的32～37，56—61，82—85，107～116，128～141，202～207，239—246，256～260，274—280，312～317，381—391和σB蛋白的62～86，117～125，141～163，179～186，270—275，287～289，343～345区域内或附近最有可能是B细胞抗原表位的优势区域．; 刘红樊惠英朱朝辉罗琼吴志新廖明; 关键词：B细胞表位

广东省科技计划工业攻关项目(2006A20301001)