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国家自然科学基金(811011909)

作品数：1 被引量：1H指数：1
相关作者：薛亚军赵耀东卢亦成蔡如珏楼美清更多>>
相关机构：第二军医大学同济大学更多>>
发文基金：国家自然科学基金更多>>
相关领域：生物学更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学

主题

  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白纯化
  • 1篇原核
  • 1篇原核表达
  • 1篇原核表达及纯...
  • 1篇核表达

机构

  • 1篇第二军医大学
  • 1篇同济大学

作者

  • 1篇董艳
  • 1篇楼美清
  • 1篇蔡如珏
  • 1篇卢亦成
  • 1篇赵耀东
  • 1篇薛亚军

传媒

  • 1篇生物医学工程...

年份

  • 1篇2012
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
重组胶质细胞生长因子2蛋白的原核表达及纯化被引量：1
2012年
目的通过原核表达的方法得到胶质细胞生长因子2(GGF2)重组蛋白。方法将不含信号肽编码序列的GGF2基因用亚克隆的方法自PVT-GGF2质粒克隆至PCXJ18质粒,再由PCXJ18-GGF2质粒克隆至pET-32b(+)质粒,构建pET-32b(+)-GGF2表达载体。表达载体转染4种宿主菌,筛选合适者。优化表达时程和IPTG诱导剂量。GGF2大量表达后回收包涵体,复性。复性产物利用His Bind树脂进一步纯化。纯化产物用Western blot鉴定。结果测序鉴定表明,成功构建pET-32b(+)-GGF2表达载体。筛选结果表明Origami B(DE3)为合适宿主菌。适宜的表达条件为30℃诱导前扩增,浓度25μmol/L IPTG,37℃诱导2 h。所表达外源蛋白相对分子质量和预期一致。回收、纯化后得到纯度约为96%的产物。Western blot鉴定表明所获为GGF2重组蛋白。结论原核表达方法得到足量GGF2重组蛋白。
薛亚军赵耀东董艳蔡如珏卢亦成楼美清
关键词：原核表达蛋白纯化
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共1页<1>
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