国家重点基础研究发展计划(G1999054205)
- 作品数：119 被引量：1,131H指数：20
- 相关作者：程天民陆树良冉新泽青春廖镇江更多>>
- 相关机构：第三军医大学上海交通大学医学院附属瑞金医院第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金重庆市科委院士基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 肌损伤浸液对骨髓间充质干细胞在创伤修复中的作用被引量：2
- 2003年
- 目的:研究肌损伤浸液作用于骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)对其增殖的影响以及成肌诱导作用。方法:分离、扩增小鼠骨髓MSCs,以切割伤及液氮冻伤法建立肌损伤并提取伤后8～72h的伤浸液,以Bradford比色法检测其蛋白含量并选取含量最高的时相组,以四唑盐(MTT)法检测该组伤浸液对MSCs增殖的影响,以反转录聚合酶链反应(reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR)法检测其作用后生肌调控因子中生肌素(myogenin)的表达。结果:肌损伤后12h时的伤浸液蛋白含量最高;作用于MSCs后可明显增强MSCs的增殖能力,但并不能诱导MSCs表达myogenin。结论:肌损伤浸液可促进MSCs的增殖但对MSCs无成肌诱导分化作用。
- 王劲罗成基冉新泽徐辉粟永萍程天民
- 关键词：骨髓间充质干细胞细胞增殖创伤修复肌损伤
- c-Ski在TGF-β1调节成纤维细胞和纤维瘤细胞增殖差异中的作用研究
- 目的:探讨c-Ski在TGF-β1调节成纤维细胞和纤维瘤细胞增殖差异中的作用及机制。方法:应用不同剂量TGF-β1及联合转染c-Ski RNAi等途径,作用于原代小鼠成纤维细胞和纤维瘤细胞系,采用MTT法、BrdU掺入法...
- 刘苹李平熊仁平陈星云赵艳周元国
- 关键词：TGF-Β1成纤维细胞细胞增殖
- 文献传递
- 血清浓度对TGF-β1刺激成纤维细胞增殖的影响被引量：3
- 2008年
- 目的比较低血清浓度(0.4%)和正常血清浓度(10%)培养条件对TGF-β1刺激成纤维细胞增殖的影响。方法原代大鼠皮肤成纤维细胞分别采用0.4%和10%血清浓度培养,加TGF-β1刺激细胞后,分别用BrdU ELISA法检测细胞增殖情况,噻唑蓝(MTT)比色法制作细胞生长曲线。结果0.4%和10%血清浓度下,250pg/ml TGF-β1均促进成纤维细胞增殖(P<0.01),并促使生长曲线的峰值提前和增加。而25ng/ml TGF-β1均抑制成纤维细胞增殖(P<0.05),并导致生长曲线峰值的滞后和降低。结论血清浓度对大小剂量TGF-β1刺激成纤维细胞增殖变化无明显影响。
- 刘苹李平周元国雷英
- 关键词：血清TGF-Β1细胞增殖MTT法BRDUELISA法
- 一种增生性瘢痕动物模型的建立被引量：14
- 2004年
- 目的 建立兔耳瘢痕动物模型 ,观察兔耳腹侧创面在伤后不同时间瘢痕增生的情况。方法 于 32只新西兰白兔的 6 0只兔耳腹面手术切除 2cm× 5cm全层皮肤 ,创面用 1%磺胺嘧啶银冷霜外敷包扎至愈合 ,换药 1次 /周。未作手术的 4只兔耳作对照。 (1)术后连续 12个月观察兔耳创面自然愈合情况。 (2 )用光镜、透射电镜观察兔耳创面瘢痕增生情况。 (3)用计算机图像分析系统测定 1～ 6个月的瘢痕指数。 结果 兔耳创面上皮化后其色泽、厚度和质地均经历从瘢痕形成、成熟到退化的演变过程 ;1～ 2个月的瘢痕指数 2 .2 9± 0 .74较 3～ 4个月 (2 .82± 0 .36 )和 5～ 6个月 (2 .90± 0 .84 )低 (P <0.0 5),其变化与瘢痕增生程度的消长趋势吻合。 结论 兔耳腹面全层皮肤缺损经自然愈合后形成的增生性瘢痕与人体增生性瘢痕相似 。
- 向军王志勇贾生贤金曙雯陆树良廖镇江
- 关键词：增生性瘢痕动物模型创面修复
- 创伤局部微环境对大鼠真皮多能干细胞生物学性状的影响被引量：16
- 2003年
- 目的 研究创伤局部微环境对大鼠真皮多能干细胞生物学性状的影响。 方法 将大鼠真皮多能干细胞经荧光染料DAPI标记后 ,植入受损的皮肤组织 ,荧光显微镜观察标记细胞的植入情况 ;体外四唑盐 (MTT)法和划痕实验检测急性皮肤创伤伤口液对大鼠真皮多能干细胞增殖和迁移的影响 ;进一步将大鼠真皮多能干细胞置入透析袋中并植入大鼠背部伤口作用 3d ,免疫组化法检测碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)、神经生长因子 (NGF)、一种生长因子的辅受体synde can - 1的表达。 结果 移植 14d后 ,DAPI标记的真皮多能干细胞主要位于真皮和皮下组织 ;体积分数为 10 %的伤口液在体外促进真皮多能干细胞的增殖和迁移的能力最强 ;大鼠背部伤口局部微环境作用 3d后 ,真皮多能干细胞高表达bFGF、NGF等生长因子和syndecan - 1。 结论 创伤局部微环境可通过诱导真皮多能干细胞的增殖、运动和分化而直接参与修复 ,同时还可通过调控生长因子和辅受体的表达而间接促进修复。
- 史春梦程天民
- 关键词：创伤局部微环境真皮干细胞生物学性状
- 同源盒B2基因在内皮细胞增殖中的作用及血管内皮生长因子对内皮细胞放射损伤的保护作用被引量：1
- 2004年
- 目的 探讨同源盒B2 (HOXB2)基因在人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)增殖中的作用及血管内皮生长因子 (VEGF)对HUVEC放射损伤的保护效应。 方法 分离、培养HUVEC。(1)配制寡脱氧核苷酸 (ODN)或反义ODN(ASODN)浓度为 0 .2 5、0 .5 0、1.0 0、2 .5 0mg/L的脂质体 HOXB2 ASODN、脂质体 ODN,用以刺激HUVEC。以噻唑蓝 (MTT)法和氚标记胸腺嘧啶脱氧核苷 (3 H TdR)掺入法检测刺激后HUVEC增殖活性的变化 ,以流式细胞仪进行细胞周期分析 ,以逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测HUVEC内HOXB2mRNA的表达水平。 (2 )对HUVEC进行下述处理 :加入 5 0 μg/LVEGF;以 6、12Gy的60 Coγ射线照射 ;12Gy60Coγ射线照射后加入 5 0 μg/LVEGF。2 4、4 8h后进行形态学观察 ,采用MTT法检测细胞增殖活性的变化。 结果 (1)与脂质体 ODN比较 ,脂质体 HOXB2 ASODN对HUVEC的增殖有明显抑制作用 (P <0.0 5或 0 .0 0 1) ,且ASODN浓度越高变化越明显。 2 .5 0mg/L的ASODN可明显减少HUVEC的S期细胞数量及HOXB2mRNA表达水平 (P<0.0 1或 0 .0 0 1)。 (2 ) 60 Coγ射线照射可造成HUVEC核增大 ,胞浆多空泡 ,多核及核肿胀。当以 6Gy照射 2 4、4 8h时 ,细胞增殖活性分别由未照射时的 0 .36 5± 0 .0 4 7、0 .4 87± 0 .0 2 2升至 0 .5 5 7±
- 刘旭盛张晓启刘亮明佳徐辉冉新泽程天民
- 关键词：内皮细胞增殖血管内皮生长因子内皮细胞
- 成体干细胞可塑性研究的理论思考被引量：15
- 2003年
- 成体干细胞是存在于发育成熟机体组织中的具有高度自我更新和增殖潜能的未分化细胞。依据细胞的发育潜能,可将干细胞分为全能干细胞(具有分化为全部机体组织细胞类型的能力)、多能干细胞(具有分化为多种不同组织细胞类型的能力)和专能干细胞(只能分化为某一特定类型的组织细胞)。成体专能干细胞的研究已经开展多年,其中造血干细胞和角膜干细胞已经成功应用于临床,表皮干细胞和神经干细胞也取得了良好进展。进入20世纪90年代末,成体干细胞的研究又取得了重要突破。在发育成熟的高等动物甚至人类的多种组织器官中(如骨髓和皮肤等)发现存在有成体多能干细胞。这些成体多能干细胞同样具有很强的分化潜能,甚至可以跨越传统的胚层概念的界限,分化为其他胚层来源的细胞。成体干细胞的发育来源是一重要的理论问题,对干细胞的研究实践具有指导意义。从发育生物学的角度提出了成体干细胞发育来源的一个设想模式,同时对成体干细胞与胚胎干细胞的比较和成体干细胞与肿瘤细胞的联系进行分析,以期有助于对成体干细胞的理解和认识。
- 史春梦程天民
- 关键词：成体干细胞细胞分化
- 5-氮杂胞苷诱导间充质干细胞分化为成肌细胞的实验研究被引量：24
- 2003年
- 目的 探讨 5 -氮杂胞苷 ( 5 -Aza)诱导间充质干细胞 (MSCs)分化为成肌细胞的相关机制。 方法 分离纯化 4～ 6周龄Balb C小鼠骨髓MSCs,以不同浓度 5 -Aza作用 ,用四唑盐(MTT)法测定细胞生长活力 ;逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)鉴定肌形成调节因子 5 (Myf5 )、成肌素 (myogenin)表达 ;免疫组织化学染色鉴定结蛋白 (desmin)、肌凝蛋白 (myosin)表达 ;观察细胞形态变化。 结果 1,3μmol L 5 -Aza对细胞增殖无明显影响 ,2 0 μmol L 5 -Aza对细胞有毒性作用 ,影响其增殖。 10 μmol L 5 -Aza诱导后 6h ,MSCs表达Myf5 ,9h达最高 ;5 μmol L5 -Aza诱导后9h ,MSCs表达Myf5 ,12h达高峰。 10 μmol L5 -Aza诱导后 2 4h ,MSCs表达myogenin ,48h达最高 ;5 μmol L5 -Aza诱导后 6d ,MSCs表达myogenin ,且为高峰。 10 μmol L5 -Aza诱导后 7d ,部分细胞表达desmin ;14d部分细胞表达myosin。 10 μmol L5 -Aza诱导后 9d ,部分细胞胞体明显增粗 ,14～ 16d后可见有肌管样细胞出现。 结论 5 -Aza诱导MSCs向成肌细胞定向分化 ,可能是因其产生的去甲基化作用使MSCs中处于转录失活阶段的肌分化调控基因Myf5等得以表达 ,从而调控MSCs向肌细胞系定向分化并逐步表达myogenin ,最后分化为肌管样细胞的过程。
- 王劲郭朝华张勇李军冉新泽徐辉粟永萍罗成基程天民
- 关键词：5-氮杂胞苷间充质干细胞成肌细胞创伤细胞分化5-氮杂胞苷
- 5.21Gy软X线局部照射后伤口组织细胞凋亡的时相变化及其与创伤愈合的关系被引量：1
- 2002年
- 目的 研究 5 .2 1Gy软X线局部照射后大鼠伤口组织细胞凋亡的时相变化及其与创伤愈合速度的关系。方法 采用大体观察、图像分析等方法观察大鼠伤口愈合速度变化。采用PI染色 ,结合流式细胞术 (FCM)检测细胞凋亡。结果 5 .2 1Gy软X线局部照射后 ,照射侧愈合速度明显下降 ,3～ 6天时段最显著 ;9天以后逐渐增加 ,12～ 15天时愈合速度最快。在 3～ 9天时间段内 ,照射侧伤口组织细胞凋亡百分数明显高于对照侧 ;与之相反 ,在 12～ 2 2天时间段内 ,照射侧伤口组织细胞凋亡百分数明显低于对照侧。结论 5 .2 1Gy软X线局部照射后 ,伤口组织细胞凋亡率增加可能是影响创伤愈合早期的机制之一。
- 刘建忠周元国程天民周萍刘霞李平
- 关键词：软X线局部照射创伤愈合细胞凋亡
- c-Ski和Smad3在大小剂量TGF-β1刺激24小时后大鼠皮肤成纤维细胞中的表达及意义
- 目的:通过观察大小剂量 TGF-β1刺激24小时后 c-Ski 和 Smad3的表达变化和细胞转染 c-Ski 或 Smad3同时加 TGF-β1刺激后细胞增殖的变化,来探讨 c-Ski、Smad3在 TGF-β1对成纤...
- 李平赵艳熊仁平刘苹陈星云周元国
- 关键词：SMAD3成纤维细胞
