国家高技术研究发展计划(2010AA101503) 作品数:31 被引量:150 H指数:7 相关作者: 于殿宇 姜绍通 李越 刘晶 庞敏 更多>> 相关机构: 东北农业大学 合肥工业大学 哈尔滨理工大学 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 国家科技支撑计划 “十一五”国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 轻工技术与工程 化学工程 农业科学 生物学 更多>>
脂肪酶修饰丝网印刷电极测定三油酸甘油酯 被引量:1 2012年 制备了用于快速检测三油酸甘油酯的脂肪酶修饰丝网印刷电极(SPE)电化学传感器单元。用循环伏安法(CV)和计时电流法(CC)研究了三油酸甘油酯在脂肪酶修饰SPE上的电化学行为,确定了测定甘油酯的最优条件,建立了测定三油酸甘油酯浓度的电化学方法。其中CV法的线性范围为0.01~5 g.L-1,检出限为2.5 mg.L-1;CC法的线性范围为0.001~5.50 g.L-1,检出限为0.2 mg.L-1。以CV法考察样品的加标回收率,6个葵花籽油样品的加标回收率为94%~105%。 刘韩凤 郭春景 叶永康 罗水忠 姜绍通关键词:脂肪酶 脂肪酶修饰碳糊电极测定甘油三酯 <正>甘油三酯是由脂肪酸和甘油酯化后形成的脂肪分子,是人体内含量最多的脂类。大多数电化学测定方法都是测定甘油三酯水解后生成脂肪酸或甘油的量[1]。由于脂肪酶的制备简便,可用脂肪酶修饰电极来制备甘油三酯传感器,并应用于医疗... 郭春景 叶永康 程杰顺 罗水忠 姜绍通两种常见固定化脂肪酶的酶学性质和微观结构比较 2012年 分别对游离脂肪酶、大孔树脂吸附-交联固定化脂肪酶和海藻酸钠固定化脂肪酶的热稳定性、pH稳定性和操作稳定性等方面进行研究。结果显示,固定化脂肪酶在热稳定性、pH稳定性和重复利用次数上均有明显提高。对大孔树脂吸附-交联和海藻酸钠固定化微球进行了表观结构的考察。从SEM图片可以看出:海藻酸钠固定化微球表面和内部为均匀的蜂窝状多孔性结构,孔径较大,约0.1mm;而大孔树脂吸附-交联固定化微球内部具有规则蜂窝状通孔结构,孔径都在几微米以下。说明大孔树脂吸附-交联固定化脂肪酶效果比较理想。 陈晓慧 李越 时敏 李志平 于殿宇关键词:固定化 脂肪酶 SEM 酶活 菜籽蛋白质组双向电泳技术体系的优化研究 被引量:7 2011年 [目的]建立适用于菜籽蛋白质组研究的双向电泳技术。[方法]以湘油17号为材料,对双向电泳技术中的样品制备方法、凝胶浓度、上样量等条件进行了优化。[结果]使用TCA-丙酮法提取菜籽总蛋白最佳,所获蛋白在2-DE图谱上获得的点数最多。当采用pH3~10IPG胶条和12%的凝胶、上样量为250μg时,可得到背景清晰、重复性好、蛋白点分辨率较高的双向电泳图谱。[结论]为开展油菜种子蛋白质组学研究奠定了基础。 王丽娟 任学敏 杜艳慧 张其彬 罗水忠 姜绍通 郑志关键词:菜籽 蛋白质组 双向电泳 产脂肪酶真菌的筛选及产酶条件优化 被引量:11 2011年 [目的]从富含油脂的土壤中寻找高产脂肪酶的真菌,以期为扩大脂肪酶的菌源提供材料。[方法]从上海市、河北省唐山、江苏省兴化、安徽省合肥地区土样中,经富集培养、平板筛选得到22株脂肪酶产生菌株,通过复筛得到1株脂肪酶活力较高真菌。根据《常见与常用真菌》对菌株进行鉴定,并研究不同条件对菌株产酶的影响。[结果]从富含油脂土壤中分离得到1株产脂肪酶能力较高菌株,根据菌落群体及个体形态,查阅相关鉴定手册,初步确定该菌株为黑曲霉。菌株产酶条件研究表明:其最适产酶条件为温度30℃,初始pH 7,装液量20%,最适碳源与氮源分别为淀粉和蛋白胨。[结论]为脂肪酶产生菌以及脂肪酶的工业化生产与应用奠定了基础。 李军红 姜绍通 童洋洋关键词:脂肪酶 产酶条件 高碘酸钠氧化法固定化磷脂酶A_1的研究 被引量:3 2012年 研究了高碘酸钠氧化法在纤维素滤纸膜载体上固定化磷脂酶A_1的最佳条件。结果表明,以固定化酶活力为指标,当高碘酸钠浓度为0.15mol/L,活化80min,与浓度为0.05g/mL酶的磷酸盐缓冲溶液(pH为5.8)于戊二醛浓度0.4%、温度4℃交联4h,获得的固定化磷脂酶A_1酶活最高为4.8U/cm^2。固定化酶膜的酶学性质为:最适温度35℃;最适pH为9.0。与游离酶相比,pH向碱性偏移1.0;经7次重复使用后,固定化酶膜活力为原酶活的65%以上。SEM结果显示,经高碘酸钠氧化后的纤维素滤纸膜能较好地固定磷脂酶A_1。 于殿宇 马莺 刘晶 张佳宁 李琳关键词:固定化 酶活 薄层色谱法测定油脂中甘油三酯含量 被引量:19 2013年 采用薄层色谱-可见分光光度法以内标法定量测定油脂中甘油三酯的含量。应用硅胶柱层析将混合甘油酯中的甘油三酯分离出来,得到甘油三酯的高纯品,作为甘油三酯测定的标准品。混合甘油酯经薄层色谱分离、洗脱及显色,然后经分光光度法在700nm测定其吸光度,测定甘油三酯的含量。本方法的平均回收率为99.8%,有良好的准确度,精密度略低;获得的甘油三酯标准品,在10~100μg/mL范围内线性关系良好;保证薄层板在5min固定时间显色,洗脱液在1.5h内检测,其稳定性良好;样品的检测限为0.55μg/mL。本方法为混合脂肪酸组成的甘油三酯含量测定提供简单快捷的方法。 鲍方宇 张敏柱层析法提纯羊毛脂中胆固醇的工艺 被引量:3 2011年 采用柱层析法分离羊毛脂中的胆固醇,以胆固醇与杂质羊毛甾醇的分离度为判定依据来筛选吸附剂及优化层析工艺,同时对吸附剂进行了再生考察。实验表明,当以200~300目粗孔硅胶为吸附剂、丙酮/正己烷混合溶剂(体积比4∶96)为流动相、35℃下胆固醇上载量为2.4%(质量分数)时,胆固醇的分离效果较好,所得胆固醇含量可达84.36%,收率为85.67%。另外选用丙酮/正己烷混合溶剂(体积比50∶50)对吸附剂进行再生处理,硅胶经7次使用再生循环,分离效果未降低。 胡文娜 苏宝根 苏云 杨亦文 任其龙关键词:胆固醇 柱层析 硅胶 氧化镍-脂肪酶修饰丝网印刷电极测定二油酸甘油酯 被引量:1 2012年 利用电化学氧化沉积纳米氧化镍(NiO)于丝网印刷电极(SPE),使用壳聚糖包埋法将脂肪酶固定在NiO-SPE上构建一种新的脂肪酶生物传感器用于测定二油酸甘油酯。以铁氰化钾作为电子媒介体,在1%Triton-X100,PBS(0.1 mol/L,pH 7.0)体系中,用循环伏安法(CV)表征了二油酸甘油酯在Lipase-NiO-SPE上的伏安行为,并用CV检测二油酸甘油酯。在0.04~180μmol/L范围内呈现良好线性关系(R=0.993),检出限为0.01μmol/L。该方法简单、快速、准备、稳定,可用于二油酸甘油酯含量的检测。 郭春景 叶永康关键词:生物传感器 纳米氧化镍 脂肪酶 伏安法 Study on the Optimization of Two-dimensional Electrophoresis Technology System for Rapeseed Proteome 被引量:4 2011年 [Objective] The research aimed to establish the two-dimensional electrophoresis(2-DE)technology which was suitable for the rapeseed proteome research.[Method] Xiangyou 17 was as the material.The sample preparation method,gel concentration and loading amount,etc.in 2-DE technology were optimized.[Result] The best extraction method of total protein of rapeseed was TCA-acetone method,and the protein spots on 2-DE map were the most.When IPG strip(pH 3-10)and 12% gel were used,and the loading amount was 250 μg,the two-dimensional electrophoresis map with the clear background,good repeatability and high protein spot resolution was obtained.[Conclusion] The research laid the foundation for carrying out the rapeseed proteomics research. 王丽娟 任学敏 杜艳慧 张其彬 罗水忠 姜绍通 郑志关键词:RAPESEED PROTEOME