浙江省重大科技专项资金(2007C12010)
- 作品数：2 被引量：8H指数：2
- 相关作者：云涛周芳李兴华杨华军陈柳更多>>
- 相关机构：浙江省农业科学院浙江大学更多>>
- 发文基金：浙江省重大科技专项资金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 具有荧光标签的猪瘟病毒E^(rns)蛋白在杆状病毒表达系统中的表达被引量：4
- 2011年
- 为了获得具有标记的猪瘟病毒Erns蛋白,通过基因工程操作,使猪瘟病毒Erns基因与绿色荧光蛋白基因(GFP)融合,用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在昆虫细胞中高效表达了ErnsGFP融合蛋白,经Western Blot和荧光显微镜观察证实,表达产物分子量正确,且发出易于检测的绿色荧光,具有标记的Erns蛋白的获得为进一步研究Erns蛋白结构和功能奠定了基础。
- 陈柳余斌云涛倪征华炯钢李双茂
- 关键词：猪瘟病毒绿色荧光蛋白
- 利用杆状病毒Bac-to-Bac系统在家蚕表达猪繁殖与呼吸综合征病毒的E蛋白和M蛋白被引量：4
- 2010年
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是一种严重危害养猪业的传染性病原。PRRSV病毒的E蛋白和M蛋白基因是开发PRRSV病毒新型疫苗的目标基因。利用杆状病毒Bac-to-Bac表达系统,将PRRSV病毒的E蛋白和M蛋白的基因亚克隆到杆状病毒转移载体pFastBacHTb中,获得重组转移质粒pFastBacHTb-E和pFastBacHTb-M,转化大肠杆菌Bm DH10 Bac感受态细胞,获得重组杆粒BmNPV Bacmid-E、BmNPV Bacmid-M,将这些重组杆粒转染家蚕培养细胞Bm5,获得重组病毒BmNPV-E和BmNPV-M。将2种重组病毒分别接种5龄起蚕,用SDS-PAGE和Western blotting方法在重组Bacmid DNA转染的Bm5细胞和感染重组病毒的家蚕幼虫血细胞中分别检测到分子质量约20 kD和18 kD的E蛋白和M蛋白,表明PRRSV病毒的E蛋白和M蛋白在家蚕培养细胞及幼虫体内获得了表达,为利用家蚕-杆状病毒表达系统研制PRRSV的新型疫苗与诊断试剂奠定了基础。
- 王丹BHASKAR Roy李兴华杨华军周芳缪云根云涛刘光清
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒E蛋白M蛋白
