国家自然科学基金(3087153)
- 作品数：1 被引量：3H指数：1
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- 相关机构：河南农业大学山东农业大学青岛科技大学更多>>
- 发文基金：作物遗传与种质创新国家重点实验室开放课题国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 山东鹅观草SSR-PCR反应体系的优化和验证被引量：3
- 2012年
- 山东鹅观草是一重要的小麦野生近缘种质资源,具有对黄矮病的高抗性和易于小麦杂交的高亲和性等优良性状。以CTAB法提取山东鹅观草叶片DNA为模板,进行反应PCR体系优化。选用20μL的PCR反应,对Mg2+浓度、dNTP浓度、引物、DNA模板和Taq酶5个因素设计5个水平进行体系优化和验证试验。先以1个SSR标记(Xgwm43-7B)对5个因素进行筛选。为了验证所选最优体系的稳定性,再选用9个SSR标记(Xgwm18-1B、Xgwm32-3A、Xgwm6-4B、Xgwm60-7A、Xgwm67-5B、Xgwm77-3B、Xgwm88-6B、Xgwm95-2A和Xgwm99-1A)进行验证性试验。单因素试验结果表明PCR反应最佳体系为:20μL反应体系,2μL的10×PCR Buffer,2.875mmol/L的Mg2+,200μmol/L的dNTP,3 pmol的引物,45 ng的模板DNA,1.5 U的Taq聚合酶,双蒸水以补足20μL反应体系。验证性试验结果表明该反应体系有一定通用性,但扩增效果及PCR产量有差异。
- 彭程刘全兰王洪光严学兵田纪春刘彬彬
- 关键词：SSR-PCR
