国家自然科学基金(81101486)
- 作品数：3 被引量：11H指数：3
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- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 过表达miR-455抑制宫颈癌细胞SiHa的生长被引量：6
- 2012年
- 研究表明,microRNA(miRNA)可作为癌基因或抑癌基因发挥功能、调控细胞增殖和凋亡等生物学行为,与肿瘤的发生发展密切相关.在本研究中,我们检测了miR-455在宫颈癌组织中的表达变化及其对宫颈癌SiHa细胞生物学功能的影响.Real-time PCR实验结果显示,miR-455在宫颈癌组织样本中较正常宫颈组织表达明显降低.瞬时转染miR-455 mimics使其在SiHa细胞中过表达.CCK-8及流式细胞术分析显示,过表达miR-455明显抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,导致细胞G1/S期阻滞.Real-time PCR分析显示,PI3KR1,BCL2L2 mRNA明显降低.上述研究结果表明,miR-455可显著降低SiHa细胞存活能力,是一个潜在的抑癌基因.
- 张康梅倩李祥赵亚力李小雷韩为东孟元光
- 关键词：MICRORNA宫颈癌细胞周期
- 上调miR-181a和miR-181b表达对HeLa细胞生物学特性的影响被引量：4
- 2012年
- 目的:探讨miR-181a和miR-181b表达改变对HeLa细胞生物学特性的影响。方法:收集18例宫颈癌手术标本及18例正常宫颈组织标本,提取总RNA,应用实时荧光定量PCR技术检测miR-181a和miR-181b的表达情况。选取人宫颈癌细胞系HeLa细胞为研究对象,转染miR-181a和miR-181b成熟体。应用实时定量PCR技术检测转染后HeLa细胞中miR-181a和miR-181b的表达情况;流式细胞术检测细胞凋亡和周期变化情况;CCK-8实验及细胞生长曲线检测细胞增殖能力。结果:miR-181a和miR-181b在宫颈癌组织中低表达。转染microRNA成熟体使细胞中miR-181a和miR-181b表达增高;HeLa细胞凋亡增加,细胞增殖能力下降,周期阻滞。结论:上调miR-181a和miR-181b的表达能够促进HeLa细胞凋亡,抑制细胞增殖,导致细胞G0/G1期阻滞。miR-181a和miR-181b可能为宫颈癌临床靶向治疗的靶点选择和药物开发提供理论基础。
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- 关键词：MICRORNAHELA细胞凋亡增殖
- miR-455慢病毒表达载体的构建与鉴定被引量：3
- 2013年
- 目的:构建人源microRNA-455(miR-455)慢病毒载体,并鉴定成熟has-miR-455在细胞内的表达水平。方法:提取SiHa细胞中的人基因组DNA,设计并合成人miR-455的上下游引物,PCR扩增目的基因,将其中表达miR-455的结构经酶切后插入慢病毒转移质粒pWPT-GFP,构建成pWPT-GFP-pri-miR-455,在293T细胞中与pMD2G、pSPAX2包装产生慢病毒,并用含慢病毒的上清感染SiHa细胞。结果:测序结果证明插入质粒载体中的miR-455前体序列完全正确,慢病毒载体构建成功并获得相应的慢病毒;重组慢病毒质粒pWPT-GFP-pri-miR-455感染SiHa细胞后上调miR-455的表达近40倍。结论:构建了miR-455的慢病毒载体,并能在293T细胞中表达,产生的慢病毒能成功感染SiHa细胞。为进一步研究miR-455的功能,以及利用慢病毒进行基因治疗奠定了基础。
- 张康梅倩李祥赵亚力韩为东孟元光
- 关键词：慢病毒表达载体SIHA细胞
