陕西省自然科学基金(2012JM4010)
- 作品数：8 被引量：16H指数：3
- 相关作者：吴臻李发荣程光费舟汤海峰更多>>
- 相关机构：陕西师范大学第四军医大学西京医院第四军医大学更多>>
- 发文基金：陕西省自然科学基金国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- P-糖蛋白的细胞内转运及表达调控被引量：6
- 2014年
- 肿瘤多药耐药(multidrug resistance,MDR)的发生多与P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)过度表达相关。作为一种糖蛋白,P-糖蛋白在内质网中合成、折叠,然后转运到高尔基体进行加工、修饰,最终定位于细胞膜,且只有定位于细胞膜的P-糖蛋白才与肿瘤多药耐药的产生相关。P-糖蛋白的表达与多种信号通路如MAPK、Wnt/β-catenin、PKC、NF-κB有关。研究证实,还有多种miRNA与肿瘤多药耐药的发生相关。本文综述了P-糖蛋白的细胞内转运过程及P-糖蛋白表达相关信号通路的研究进展,为以P-糖蛋白为靶标的肿瘤多药耐药逆转剂提供新的研究策略。
- 汤燕高巧慧吴臻李发荣
- 关键词：P-糖蛋白肿瘤多药耐药信号通路MIRNA
- 太白银莲花皂苷B对胶质瘤细胞生长抑制的研究被引量：1
- 2014年
- 目的:太白银莲花皂苷B(Anemone taipaiensis saponin B)是第一次从太白银莲花中经过系统化学分析和分离鉴定的皂苷之一,所以它的生物学效应目前仍然不清楚。在本研究中,我们首次体外研究太白银莲花皂苷B对胶质瘤细胞系的生物学效应,观察它对胶质瘤细胞增殖的的抑制作用。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定太白银莲花皂苷B对胶质瘤细胞生长曲线的影响,Hoechst 33342细胞核染色后荧光显微镜观察,采用光学显微镜观察细胞的形态学变化。结果:MTT实验结果显示太白银莲花皂苷B对胶质瘤细胞U87MG和U251MG有强烈的生长抑制作用,且具有剂量依赖性,应用SPSS18.0统计软件得出太白银莲花皂苷B对U87MG细胞72 h的抑制浓度为IC25=5.2μmol/L,IC50=6.7μmol/L and IC75=8.7μmol/L,U251细胞的抑制浓度为IC25=6.2μmol/L,IC50=7.9μmol/L and IC75=10.5μmol/L。Hoechst 33342细胞核染色荧光显微镜观察以及光学显微镜下细胞形态观察显示出典型的凋亡细胞形态学特征,经过皂苷B处理后,细胞皱缩成圆球形,细胞核碎裂或者致密浓染,向核膜边缘聚集,染色质浓缩为半月状、车轮状或者马蹄状,凋亡小体出现。这些特征在24 h时更明显。结论:体外实验初步显示,太白银莲花皂苷B对U87MG和U251MG细胞具有明显的增殖抑制作用,并具有促凋亡作用。
- 王元刚汤海峰张赟李娟李博高振辉王啸洋程光费舟
- 关键词：胶质细胞瘤增殖抑制
- 太白银莲花皂苷-A诱导人胶质瘤U87细胞凋亡及其机制研究
- 2013年
- 目的探讨太白银莲花皂苷A诱导胶质瘤U87细胞株细胞凋亡作用及机制。方法以四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测太白银莲花皂苷A对U87细胞和VEC304细胞存活率的影响;Hoechst 33342核染色后荧光显微镜下观察细胞核形态学变化;透射电子显微镜观察太白银莲花皂苷A处理后U87细胞超微结构;流式细胞仪AnnexinV/IP双染检测太白银莲花皂苷A处理后U87细胞凋亡比率;免疫印迹法(Western blot)检测致凋亡分子Fas、Fas-L、Pro-Caspase8、Pro-Caspase3、Bcl-2、Bax等表达情况。结果极低浓度(<5 mg/L)下太白银莲花皂苷A处理后U87细胞生存率明显下降,同比正常EVC304细胞生存率影响不显著;Hoechst 33342核染色及透射电镜下均可见典型细胞凋亡形态学变化;流式细胞仪分析显示低浓度太白银莲花皂苷A(1.75 mg/L IC50)处理后U87细胞系早期凋亡细胞比率随时间递增,呈明显时间依赖性;免疫印迹实验发现太白银莲花皂苷A处理U87细胞6,12,24 h后细胞Fas及Fas-L表达递增,Pro-Caspase8、Pro-Caspase3递减,活化Caspase-3片段12 h达到峰值,Bcl-2表达差别不显著,Bax表达未测出。结论太白银莲花皂苷A能够诱导U87细胞凋亡,并且其机制与Fas介导的表面受体凋亡通路有关。
- 刘宁程光汤海峰费舟
- 关键词：三萜皂苷胶质瘤
- 太白银莲花皂甙-1诱导胶质瘤U87MG细胞凋亡及机制研究
- 2013年
- 目的研究太白银莲花皂甙-1对人脑胶质母细胞瘤U87MG凋亡的影响,并探讨其可能的分子机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度不同时间(6、24、48、72 h)太白银莲花皂甙-1对U87MG细胞生长增殖的抑制作用;应用倒置显微镜和Hoehst荧光染色、末端脱氧核苷酸转移酶介导的生物素脱氧尿嘧啶核苷酸缺口末端标记法(TUNEL)、膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(AnnexinV-FITC/PI)检测太白银莲花皂甙-1作用U87MG细胞后形态的变化和凋亡情况;通过免疫印迹法法检测太白银莲花皂甙-1处理后细胞凋亡相关蛋白Survivin及活化的Caspase-3的表达。结果太白银莲花皂甙-1可明显抑制U87MG细胞的增殖,诱导其凋亡;同时下调Survivin表达,激活了凋亡蛋白Activated Caspase-3的表达。结论体外实验显示,太白银莲花皂甙-1对U87MG细胞具有显著的增殖抑制作用,并能成功诱导人脑胶质母细胞瘤U87MG细胞发生凋亡,其机制可能与抑制细胞增殖及诱导细胞凋亡有关。
- 李娟程光申广浩汤海峰张赟费舟章翔罗二平王啸洋罗鹏高振辉
- 关键词：凋亡
- 灵芝逆转SGC7901/ADR多药耐药性的活性部位研究被引量：3
- 2013年
- 目的:筛选灵芝逆转胃癌耐药细胞系SGC7901/ADR多药耐药性的活性部位并探讨其可能的作用机制。方法:以药物对Caco-2细胞中Rho-123蓄积的影响为筛选模型,筛选灵芝具有肿瘤多药耐药逆转作用的潜在活性部位;以SGC7901和SGC7901/ADR为细胞模型,检测了灵芝活性提取部位与化疗药物联用后,对SGC7901/ADR耐药性的逆转效应;检测了灵芝活性提取部位处理后,耐药细胞P-gp的表达水平、mdr1基因的表达变化及细胞内阿霉素的蓄积变化。结果:灵芝乙酸乙酯部位和正丁醇部位能有效提高化疗药物阿霉素在SGC7901/ADR细胞内的蓄积,降低mdr1基因的转录,降低P-gp的表达。结论:灵芝逆转胃癌耐药细胞SGC7901/ADR的多药耐药性的活性部位是乙酸乙酯部位和正丁醇部位,其逆转作用与抑制P-gp的表达相关。
- 汤燕高巧慧许文婷吴臻李发荣
- 关键词：灵芝多药耐药P-糖蛋白
- 太白银莲花皂甙-1抑制人脑胶质瘤U251细胞生长的实验研究被引量：3
- 2015年
- 目的研究太白银莲花皂甙-1对人脑胶质瘤U251细胞生长的影响及其机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测太白银莲花皂甙-1对U251细胞增殖的影响;应用倒置显微镜和Hochest33342荧光染色、透射电子显微镜观察细胞形态的变化;通过逆转录酶多聚酶链反应(RTPCR)检测与凋亡相关基因Bcl-2 mRNA和Bax mRNA水平的表达变化,Western blot分析Bcl-2和Bax在胶质瘤U251细胞中蛋白的表达情况。结果 U251细胞经太白银莲花皂甙-1诱导后,细胞的增殖明显受到抑制,通过RT-PCR结果证实Bcl-2 mRNA在太白银莲花皂甙-1作用下明显呈低表达而Bax mRNA的表达随时间延长逐渐增高,Western blot检测结果显示太白银莲花皂甙-1作用后,下调抑凋亡蛋白Bcl-2的表达并激活了促凋亡蛋白Bax的表达。结论太白银莲花皂甙-1明显抑制U251细胞的生长活性,且能引起胶质瘤细胞大量凋亡,具有显著的抗肿瘤作用。
- 李娟程光李三中费舟章翔汤海峰张赟汤池甄海宁陈涛罗鹏殷安安
- 关键词：胶质瘤U251细胞凋亡
- 冬凌草活性部位逆转SGC7901/ADR细胞多药耐药性的体外研究被引量：1
- 2014年
- 以SGC7901和SGC7901/ADR为细胞模型,检测了冬凌草活性部位与化疗药物联用后,对SGC7901/ADR耐药性的逆转效应;冬凌草活性部位处理细胞后,检测耐药细胞内阿霉素的蓄积变化、耐药细胞P-糖蛋白(P-gp)的表达水平以及mdr1基因的表达变化。结果显示,冬凌草氯仿部位和乙酸乙酯部位可以有效提高化疗药物阿霉素在SGC7901/ADR细胞内的蓄积,降低P-gp的表达,降低mdr1基因的转录。冬凌草逆转胃癌耐药细胞SGC7901/ADR多药耐药性的活性部位是冬凌草氯仿部位和乙酸乙酯部位,其逆转作用与抑制P-gp的表达相关。
- 高巧慧许文婷谢婷刘瑞媛吴臻李发荣
- 关键词：冬凌草SGC7901ADR多药耐药
- 冬凌草甲素逆转SGC7901/ADR细胞的多药耐药性及其机制被引量：3
- 2016年
- 目的观察冬凌草甲素(Ori)对胃癌细胞株SGC7901/ADR多药耐药性的逆转及其作用机制。方法用MTT法检测Ori的非细胞毒浓度及对SGC7901/ADR细胞株阿霉素敏感性的影响;免疫荧光法检测Ori对SGC7901/ADR细胞P-糖蛋白(P-gp)活性及表达的影响;RT-PCR法检测Ori对细胞MDR1基因转录的影响。结果用Ori无毒剂量处理细胞后,细胞对阿霉素的逆转倍数为4.53,MDR1基因的转录降低了0.78,P-gp的表达率降低了18.83%。结论 Ori能逆转SGC7901/ADR细胞的多药耐药性,其机制为降低MDR1基因的转录和下调P-gp的表达。
- 许文婷高巧慧伏艳艳吴臻李发荣
- 关键词：冬凌草甲素P-糖蛋白多药耐药性阿霉素MDR1基因
