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浙江省自然科学基金(LYl2H19002)

作品数：1 被引量：2H指数：1
相关作者：张少妮楼永良孙爱华严杰孙颜红更多>>
相关机构：杭州医学院温州医科大学浙江大学更多>>
发文基金：浙江省自然科学基金浙江省医药卫生科学研究基金国家自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇酸酶
  • 1篇内酰胺
  • 1篇内酰胺类
  • 1篇球菌
  • 1篇酰胺类
  • 1篇磷酸酶
  • 1篇磷酸酶活性
  • 1篇酶活性
  • 1篇抗生素
  • 1篇类抗生素
  • 1篇活性
  • 1篇基因
  • 1篇肺炎
  • 1篇肺炎链球菌
  • 1篇Β-内酰胺类...
  • 1篇PHP
  • 1篇P基因

机构

  • 1篇浙江大学
  • 1篇杭州医学院
  • 1篇温州医科大学

作者

  • 1篇孙颜红
  • 1篇严杰
  • 1篇孙爱华
  • 1篇楼永良
  • 1篇张少妮

传媒

  • 1篇中华微生物学...

年份

  • 1篇2014
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
肺炎链球菌phpP基因重组表达及其产物PP2C型磷酸酶活性的研究被引量：2
2014年
目的：构建肺炎链球菌StkP／PhpP信号偶联中磷酸酶编码基因phpP原核表达系统，了解表达产物rPhpP磷酸酶活性及类型。方法采用PCR扩增肺炎链球菌ATCC6306株phpP基因并测序。采用常规基因工程技术构建phpP基因原核表达系统。采用SDS-PAGE及凝胶图像分析系统检查rPhpP表达情况及其可溶性，Ni-NTA亲和层析法提纯rPhpP。实时荧光定量RT-PCR检测亚致死量青霉素和头孢噻肟药物作用后phpP基因转录水平变化。采用专业生物信息学软件分析phpP基因序列中磷酸酶功能结构域及其类型。采用丝／苏氨酸磷酸酶检测试剂盒检测rPhpP水解PP2C型磷酸酶活性并测定其酶动力学参数。结果克隆的phpP基因序列与GenBank报道序列完全相同。所构建的phpP基因原核表达系统表达可溶性rPhpP。亚致死量青霉素和头孢噻肟药物作用后phpP-mRNA水平升高。 phpP基因序列中含有PP2Cc磷酸酶结构功能域。提纯的rPhpP能水解PP2C型磷酸酶底物磷酸肽[RRA（pT）VA]且活性随rPhpP浓度增加而升高，其Km 和Kcat值分别为277．35μmol／L和0．71 S－1。结论肺炎链球菌phpP基因表达产物为PP2C型磷酸酶，亚致死量青霉素和头孢噻肟可诱导phpP基因表达上调。
孙颜红张少妮楼永良严杰孙爱华
关键词：肺炎链球菌Β-内酰胺类抗生素
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