国家自然科学基金(3047080030771010)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 相关作者：杨俊伟谭若芸闻萍方丽周阳更多>>
- 相关机构：南京医科大学第二附属医院南京医科大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 高糖诱导大鼠血管平滑肌细胞转分化的作用被引量：1
- 2009年
- 目的:观察高糖对体外培养的大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)功能以及与成骨细胞转分化相关蛋白表达的变化,探讨糖尿病血管病变的可能细胞/分子发病机制。方法:用组织贴块法建立SD大鼠胸主动脉VSMCs的体外培养技术;高糖(葡萄糖浓度:50 mmol/L)作用该细胞,设相同浓度甘露醇为对照组,观察在不同的培养时间下(3、12h和第3、6、9、12d),采用免疫蛋白印迹法和间接免疫荧光法分别检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA),骨桥蛋白(osteopontin,OPN)和成骨细胞特异性核转录因子(core-binging factorα-1,Cbfα-1/RUNX 2)的表达。细胞钙沉积含量测定观察培养细胞钙盐的沉积。结果:组织贴块法培养的大鼠原代胸主动脉VSMCs呈梭型,α-SMA表达强阳性;高糖作用12h,VSMCs的Cbfα-1表达明显上升;高糖作用9d后,VSMCs的α-SMA表达量较高糖作用前降低近90%;免疫荧光染色显示VSMC细胞呈低强度的α-SMA染色阳性;同时,高糖作用下的VSMCs能够检测到OPN蛋白的表达,与对照组相比差异显著;高糖作用下细胞钙沉积含量明显增加。结论:持续的高糖作用能够使动脉VSMCs发生向类似成骨样细胞的转分化,提示高糖诱导的VSMCs转分化可能参与糖尿病血管病变的发生发展。
- 张涛闻萍李秀真周阳张华熊明霞方丽谭若芸鲁翔杨俊伟
- 关键词：高糖血管平滑肌细胞转分化
- 尿酸上调赖氨酸氧化酶增加肾小管上皮细胞纤维连接蛋白合成
- 2009年
- 目的:通过观察尿酸对肾小管上皮细胞赖氨酸氧化酶表达的影响,探讨尿酸在肾小管损伤中的作用及其可能的机制。方法:以正常大鼠肾小管上皮细胞株NRK-52E细胞为研究对象,以不同浓度的尿酸作用于该细胞,采用免疫蛋白印迹和间接免疫荧光的方法检测赖氨酸氧化酶(LOX)的表达水平,以及细胞外基质蛋白纤维连接蛋白(fibronectin,FN)表达的变化。观察用小干扰RNA下调LOX对尿酸诱导FN表达的影响。结果:尿酸能够显著上调NRK-52E细胞LOX前体及成熟蛋白的合成,并呈现明显的剂量依赖关系;同时,FN的表达亦显著增加。LOX siRNA能够显著抑制尿酸诱导NRK-52E细胞表达成熟LOX的作用;同时LOX siRNA能够降低高尿酸导致的FN表达的增加。结论:尿酸能够通过上调赖氨酸氧化酶增加FN的表达。
- 周阳张涛闻萍王晓华方丽曹红娣谭若芸杨俊伟
- 关键词：尿酸肾小管上皮细胞纤维连接蛋白
