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山东省优秀中青年科学家科研奖励基金(2006BS03062)
作品数:
2
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相关作者:
潘新
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骨形态发生蛋白7局部基因治疗和组织工程化骨对大鼠脊柱融合的影响
2009年
目的评价腺病毒介导的人骨形态发生蛋白7(Ad-hBMP-7)基因转染的骨髓间充质干细胞(BMSCs)和纳米羟基磷灰石/胶原复合材料(NHAC)复合后对脊柱融合的影响。方法抽取大鼠骨髓获得BMSCs,应用Ad-hBMP-7转染大鼠BMSCs,将NHAC材料和密度为2×105/ml的Ad-BMP-7转染大鼠的BMSCs细胞孵育2h后备用;Wistar大鼠56只,随机分成4组,建立脊柱后外侧融合模型,分别植入自体髂骨(A组)、NHAC材料(B组)、NHAC材料和BMSCs(C组)以及Ad-hBMP-7-BMSCs与NHAC材料混合物(D组)。每组行RT-PCR及Western blotting检测,8周和12周后分别行X线摄片,并对标本进行手触检测硬度、生物力学检测和组织学观察。结果D组10只大鼠的脊柱L4/5节段全部融合;A组12周0例融合;B组12周0例融合;C组12周3例融合。D组同A、B、C组结果相比均有显著性差异(P<0.001)。结论BMP-7局部基因治疗和组织工程化骨能促进脊柱融合。
程雷
聂林
潘新
张力
关键词:
骨形态发生蛋白7
骨髓间充质干细胞
脊柱融合
基因治疗
免疫印迹法
腺病毒介导的人骨形态发生蛋白-7基因转染大鼠骨髓基质干细胞及其表达
2009年
目的利用人骨形态发生蛋白-7(hBMP-7)腺病毒表达载体(Ad—hBMP-7)转染大鼠骨髓基质干细胞(BMSC)的方法,观察Ad—hBMP-7转染后对BMSC分化的影响,探讨基因治疗的可能性。方法获取Wistar大鼠BMSC,并分为3组:Ad—hBMP-7转染组、Ad-绿色荧光蛋白(Ad—GFP)转染组、未转染组。将Ad—hBMP-7和Ad—GFP的病毒液分别转染体外培养的大鼠BMSC,用RT~PCR法检测hBMP-7mRNA的表达-7d后用Westernblot法检测hBMP-7的蛋白表达,同时进行碱性磷酸酶(ALP)染色。结果在Ad—hBMP-7转染组,RT—PCR可检测到hBMP-7mRNA的表达(470bp),Westernblot可检测到hBMP-7蛋白分泌(相对分子质量为15X10。),转染后第10天ALP染色多数细胞胞浆呈棕黑色阳性着色;而Ad—GFP转染组和未转染组ALP染色阳性细胞少见并且未检测到hBMP-7蛋白分泌。结论Ad—hBMP-7基因可高效转染BMSC,促进BMSC向成骨细胞转化,为利用hBMP-7开展局部基因治疗的研究奠定了基础。
程雷
潘新
刘春喜
聂林
关键词:
腺病毒
骨形态发生蛋白质类
基因疗法
骨髓基质干细胞
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